Полиэтиологичностью макроглоссии объясняется отсутствие в настоящее время четкой ее классификации. Практически все синдромы с макроглоссией, входящие в группу истинных врожденных имеют схожий комплекс внешних признаков и нарушений развития внутренних органов. В первую очередь это изменение размеров черепа, носа, глаз, ушей, губ и другие изменения внешности, также наблюдаются сдвиги в развитии сердца, почек, размеров мозга и нарушении функции эндокринных органов. В то же время мы не обнаружили в доступной нам литературе данных, свидетельствующих об изменении активности эндокринных органов при приобретенной макроглоссии, связанной, например, с сахарным диабетом 2 типа, тиреотоксикозом, онкопроцессами и другими заболеваниями, возникшими в постнатальном периоде.
В связи с этим представляет определенный интерес реакция таких железистых органов крыс, как надпочечники, слюнная и щитовидная железы, на объемное изменение языка в эксперименте.
Цель исследования - изучение влияния модели экспериментальной макроглоссии у лабораторных животных на эндо- и экзокринные железы.
Методика исследования. С целью биологического моделирования макроглоссии был проведен эксперимент на 32 беспородных крысах-самцах массой 120-160 граммов. 16-ти опытным животным однократно с двух сторон от средней линии языка в толщу мышцы вводилось по 0,05 мл полиакриламидного гидрофобного геля. Место введения соответствовало середине длины языка. Остальные животные составили контрольную группу. В течение 4 месяцев животные содержались на стандартном корме вивария при свободном доступе к воде. Животные выводились из эксперимента методом декапитации. При забое изучаемые органы извлекались целиком: одни половины непарных органов (фрагмент трахеи вместе со щитовидной и паращитовидными железами) и левые органы парных (слюнные железы, надпочечники) фиксировались в 10%-ном растворе забуференного формалина с последующей заливкой в парафин по стандартной методике и изготовлением блоков, из которых затем изготавливались срезы толщиной 5 мкм, окрашиваемые гематоксилином и эозином для морфометрической и описательной оценки с помощью программы SigmaScanPro. После проведения морфометрических исследований щитовидной железы рассчитывался фолликуло-эпителиальный индекс (ФЭИ): диаметр фолликула/высота тиреоцита.
Вторые половины непарныхи правые органы парных замораживались, с последующим изготовлением 10-мкм срезов. На замороженных срезах выявлялась активность щелочной фосфатазы (ЩФ) методом Burstone M.S. [4], неспецифической эстеразы (НЭ) методом одновременного азосочетания с 1-нафтилацетатом и стабилизированными солями диазония в модификации Gomori [4]. Оценку активности ферментов осуществляли фотометрированием в проходящем свете на микроскопе «Микмед-2» с использованием фотоэлектронасадки ФМЭЛ-1 с ФЭУ-79 и выходным напряжением усилителя 1200 В, а также интерференционного светофильтра с максимумом светопропускания на длине волны 624 нм (для ЩФ), а активность НЭ определяли без использования последнего. Регистрацию светопропускания осуществляли с помощью цифрового вольтметра Щ 4300, после чего путем отрицательного десятичного логарифмирования уровень светопропускания трансформировали в светопоглощение, выражавшееся в условных единицах оптической плотности (е.о.п.) [1].Содержание катехоламинов в слюнной железе определяли газово-параформальдегидным люминесцентно-гистохимическим методом B. Falcketal [9]. Уровень люминесценции катехоламинов определяли путем цитоспектрофлуориметрии по шкале вольтметра Щ 4300 в единицах люминесценции.
Полученный цифровой массив обрабатывали общепринятыми статистическими методами с использованием программ MicrosoftOfficeExcel 2003, а именно рассчитывали среднюю арифметическую (М), стандартную ошибку средней арифметической (m). Для оценки достоверности различий между полученными значениями в сравниваемых группах использовали t-тест.
Результаты исследования. При микроскопическом исследовании было обнаружено, что микроскопическое строение железы зависело от типа ее секреции (рис. 1).
Рис. 1. Структуры поднижнечелюстной слюнной железы: 1 - ацинус; 2 - выводные протоки; слева - серозный отдел, справа - слизистый отдел; увеличение - 100; окраска - гематоксилин-эозин.
Поднижнечелюстные железы крыс, в отличие от человеческих, состояли из двух структурных отделов, четко разделенных соединительнотканной перегородкой, и были представлены разными типами слюнных желез. Больший отдел (примерно ¾), в котором были обнаружены многочисленные и хорошо развитые промежуточные и внутридольковые протоки, выстланные кубическим эпителием, был прокрашен в отличие от эпителия ацинусов эозинофильно и гомогенно, имел строение, типичное для сложной альвеолярно-трубчатой железы белкового (серозного) типа. Меньший по объему отдел, где внутридольковые протоки встречались в меньшем количестве, имел строение слизистой железы.
Взвешивание слюнной железы показало, что у животных опытной группы ее масса была достоверно (р<0,05) снижена (0,194±0,004 г% против 0,221±0,006 г% в контроле).
Объемы ядер эпителиальных клеток различных структур слюнной железы представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Объемы ядер (мкм3) в различных структурах слюнной железы (M±m)
|
Группа |
Серозный |
Слизистый |
||
|
ацинус |
проток |
ацинус |
проток |
|
|
контроль |
45,61±3,19 |
52,91±2,45 |
36,48±1,47 |
46,17±2,98 |
|
опыт |
34,22±4,53* |
38,95±3,25* |
26,79±2,15* |
27,36±1,71* |
* - различия достоверны (р<0,05).
Из представленных данных видно, что при увеличении языка наблюдалось уменьшение ядер эпителиальных клеток всех структур железы в сравнении с контролем (р<0,05).
Также на увеличение языка отреагировала и активность ферментов (табл. 2).
Таблица 2 - Активность ферментов в эпителиальных клетках различных структур слюнной железы (М+m)
|
ЩФ |
||||
|
Группа |
Серозный |
Слизистый |
||
|
ацинус |
проток |
ацинус |
проток |
|
|
контроль |
0,211±0,058 |
0,342±0,038 |
0,116±0,013 |
не определялся |
|
опыт |
0,115±0,024 |
0,257±0,011* |
0,124±0,018 |
не определялся |
|
НЭ |
||||
|
Группа |
Серозный |
Слизистый |
||
|
ацинус |
проток |
ацинус |
проток |
|
|
контроль |
0,056±0,011 |
0,183±0,019 |
0,044±0,006 |
0,156±0,010 |
|
опыт |
0,105±0,010* |
0,236±0,004* |
0,073±0,005* |
0,189±0,015 |
|
МАО |
||||
|
Группа |
Серозный |
Слизистый |
||
|
ацинус |
проток |
ацинус |
проток |
|
|
контроль |
0,018±0,002 |
0,028±0,003 |
0,011±0,002 |
0,026±0,001 |
|
опыт |
0,011±0,001* |
0,024±0,003 |
0,014±0,002 |
0,026±0,004 |
|
НАДН |
||||
|
Группа |
Серозный |
Слизистый |
||
|
ацинус |
проток |
ацинус |
проток |
|
|
контроль |
0,046±0,007 |
0,167±0,010 |
0,059±0,011 |
0,196±0,021 |
|
опыт |
0,072±0,005* |
0,200±0,016 |
0,116±0,011* |
0,250±0,003* |
* - различия достоверны (р<0,05).
Если активность ферментов ЩФ и МАО в клетках эпителия серозного отдела достоверно снижалась с 0,21±0,06 до 0,11±0,02 е.о.п. и 0,018±0,002 до 0,011±0,001 е.о.п. (р<0,05), то активность ферментов, участвующих в энергообмене НЭ и НАДН, увеличилась достоверно не только в серозном, но и в слизистом отделах.
Анализ показателей интенсивности биоаминов показал, что уровни их люминесценции, также как и коэффициенты их соотношений, существенно не изменились (р>0,05). Однако необходимо заметить, что данные показатели гепарина и гистамина при увеличении языка имели тенденцию к снижению, а катехоламинов и серотонина - к повышению.
Наблюдаемые в железе морфофункциональные изменения, согласно данным литературы [5], можно рассматривать как процесс понижения секреторной функции и нарушение процессов прохождения веществ через клеточные мембраны. На изменение количества и вязкости секрета поднижнечелюстных желез могло оказать влияние и повышение уровня медиаторов симпатического отдела нервной системы, на фоне усиленного разрушения ацетилхолина [3].
При микроскопическом исследовании щитовидной железы было обнаружено, что ткань разбита на дольки, состоящие из различного размера округлых фолликулов, в просветах которых находился коллоид (рис. 2.).
Рис. 2. Диаметр ядер эпителия щитовидной железы: слева - контроль, справа - опыт; увеличение - 40; окраска - гемотоксилин-эозин.
В сравниваемых группах преобладали мелкие и средние фолликулы, выстланные кубическим или цилиндрическим эпителием. В отличие от контроля, у опытных животных чаще встречались крупные фолликулы, которые располагались преимущественно в периферических отделах железы. Причем коллоид в таких фолликулах, как правило, был гомогенным и прокрашивался интенсивно эозином.
Показатели, отражающие морфофункциональное состояние железы: высота эпителия, диаметры коллоида и фолликула, а также ФЭИ, достоверно не изменились. Однако у опытных животных наблюдалось (р>0,05) увеличение высоты эпителия и диаметра фолликула с одновременным снижением диаметра коллоида и ФЭИ (табл. 3).
Таблица 3 - Морфометрические показатели щитовидной железы (мкм)
|
Группа |
Высота эпителия |
Диаметр коллоида |
Диаметр фолликула |
ФЭИ |
|
контроль |
11,93±2,99 |
30,09±3,85 |
53,95±4,14 |
2,60±0,51 |
|
опыт |
17,34±1,44 |
28,16±6,64 |
62,83±5,00 |
1,86±0,26 |
По данным некоторых авторов [2; 6], данные изменения свидетельствуют о функциональном напряжении щитовидной железы.
На поперечных срезах, проходящих через центральную часть надпочечника у крыс контрольной и опытной групп, выявлена типичная гистологическая картина (рис. 3).
Рис. 3. Тотальный срез надпочечников: слева - контроль, справа - макроглоссия; увеличение - 40; окраска - гематоксилин-эозин.
Результаты исследований структур надпочечников представлены в табл. 4.
Таблица 4 - Морфометрические показатели коры надпочечников
|
Структура |
Объем ядер (мкм3) |
Ширина зон (мкм) |
||||
|
Зона
Группа |
Клубочковая |
Пучковая |
Сетчатая |
Клубочковая |
Пучковая |
Сетчатая |
|
контроль |
59,11±3,28 |
97,37±6,73 |
84,67±6,84 |
133,61±4,45 |
616,68±47,87 |
337,31±18,09 |
|
опыт |
36,05±2,72* |
56,91±4,29* |
53,59±4,04* |
185,28±16,19* |
621,62±90,74 |
325,33±38,60 |
* - различия достоверны (р<0,05).
Как следует из таблицы, у опытных животных объемы ядер всех зон коры уменьшались с одновременным расширением клубочковой зоны (р<0,05).
Таким образом, при экспериментальном увеличении языка во всех изучаемых эндо- и экзокринных органах произошли определенные морфофункциональные изменения. Учитывая результаты ранних исследований о взаимосвязях слюнной и щитовидной желез, размеров языка и функции нижнечелюстных слюнных желез, о патологии надпочечников, щитовидной железы и размеров языка [7; 8; 10], можно предположить, что любое хирургическое вмешательство на языке должно предусматривать возможные последствия в нарушении деятельности эндо- и экзокринных желез, а также органов иммунитета.
Рецензенты:
- Уруков Ю.Н., д.м.н., зав. кафедрой ортопедической стоматологии с курсом ортодонтии ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова», г. Чебоксары.
- Трубин В.В., к.м.н., д.м.н., зав. кафедрой ЧЛХ и стоматологии ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова», г. Чебоксары.
Работа получена 11.11.2011