Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

ВЗАИМОСВЯЗЬ МАРКЕРОВ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ И ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ С ВИРУСНОЙ НАГРУЗКОЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВИРУСНОМ ГЕПАТИТЕ С

Щекотова А.П. 1
1 Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера, г. Пермь
У 40 пациентов с хроническим гепатитом определяли маркеры дисфункции эндотелия, фиброза печени методом иммуноферментного анализа, оценивали уровень вирусной нагрузки. Вирусемия оказалась достоверно взаимосвязана с показателями повреждения эндотелия: чем выше уровень вирусной нагрузки, тем больше десквамация эндотелия и выработка васкулоэндотелиального фактора роста, который запускает процессы неоангиогенеза и способствует перестройке сосудистой архитектоники печени. Выявлены сильные взаимосвязи между вирусемией и маркерами фиброза печени: гиалуроновая кислота корррелирует с вирусной нагрузкой и соотношением аспарагиновая трансаминаза/аланиновая трансаминаза. Таким образом, чем выше уровень вирусной нагрузки, тем больше поражение эндотелия и активнее процессы выработки соединительной ткани в печени при хроническом вирусном гепатите С.
Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция
фиброз печени
вирусная нагрузка.
1. Звягинцева Т.Д., Гриднева С.В. Современные представления о сосудистом эндотелии в норме и при патологии желудочно-кишечного тракта // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2005. № 4. С. 6-12.
2. Петрищев Н.Н., Беркович О.А. Диагностическая ценность определения десквамированных эндотелиоцитов в крови. Клин. лаб. диагностика. 2001. №1. С. 50 - 52.
3. Berkes J. Clobal epidemiology of HCV infection // Curr. Hop. Rep. 2005. V. 4 (4). Р. 125 - 129.
4. Chevaliez S. Hepatitis C virus: virology, diagnosis and monogement of antivirol theraphy // World J. Gastroenterol. 2007. № 13 (17). P. 2461 - 2466.
5. Giannini E., Risso D., Botta F. Et al. Validity clinicalutility of the aspartate aminotransferase-alanine aminotransferase ratio in assessing disease severity and prognosis in patients with hepatitis C virus-related chronic liver disease // Arch. Intern. Med. 2003. 163. 218-224.
6. Gretch D. et al., 1994). Gretch D., Corey L., WilsonJ. et al. Acessment of hepatitis C virus RNA levels by quantitative competitive RNA polymerase chain reaction: high-titer viremia correlates with advanced stage of disease // J. Infect. Dis. 1994. V.I 69. P.1219-1225.
7. Saitou Y., Shiraki K., Yamanaka Y., et al. Noninvasive estimation of liver fibrosis and response to interferon therapy by a serum fibrogenesis marker, YKL-40, in patients with HCV-associated liver disease // World J Gastroenterol 2005;11(4):476-81.
8. Wynn А. Cellular and molecular mechanisms of fibrosis // J Pathol 2008. Vol. 21(4). Р. 199-210.
Введение. В индустриально развитых странах вирус гепатита С является причиной развития у 70 % больных хронического гепатита, противовирусное лечение оказывается не всегда  эффективно [3,4]. В патогенезе хронического вирусного гепатита С (ХГС) и прогрессировании его в цирроз печени большое значение имеет нарушение внутрипеченочной гемодинамики, что может быть связано с повреждением эндотелиальной выстилки печеночных синусоидов  непосредственно вирусом и развития эндотелиальной  дисфункции (ЭД) [1]. При воздействии вируса на эндотелий синусоидов печени способность эндотелиальных клеток освобождать релаксирующие факторы уменьшается, тогда, как образование сосудосуживающих факторов увеличивается, снижается барьерная функция эндотелия и повышается его проницаемость для провоспалительных цитокинов, нарушается биодоступность оксида азота (nitric oxide, NO) как одного из факторов противовирусной защиты. При тяжелом поражении эндотелия нарушается его целостность и в интиме появляются участки, лишенные эндотелиальной выстилки. Процессы прогрессирования поражения печени, в частности, неоангиогенез и фиброз в печени, в свою очередь, связаны с функциональной состоятельностью эндотелия [8]. Таким образом, эндотелий играет ключевую роль в патогенезе вирусных поражений печени.

Среди прямых лабораторных маркеров фиброза печени большой информативностью обладает гиалуроновая кислота (ГК) [7]. Непрямой рутинный тест - соотношение аспарарагиновая трансаминаза / аланиновая трансаминаза (АСТ/АЛТ) более 1 предполагает наличие цирроза. При инфекции вирусом гепатита С  соотношение более 1 имеет 100 % специфичность как позитивный предиктор для дифференциации пациентов с циррозом и без цирроза печени, чувствительность составляет 53,2 %, специфичность соотношения АСТ/АЛТ как негативного предиктора - 80,7 %. Хотя при алкогольной болезни печени еще до развития цирроза соотношение АСТ/АЛТ >1 [5]. Уровень вирусной нагрузки (ВН) является тестом оценки прогноза и мониторинга эффективности противовирусной терапии. О влиянии уровня ВН на прогнозирование течения заболевания существуют противоположные мнения, в некоторых исследованиях выявлено, что более высокий уровень виремии коррелирует с более серьезным повреждением печени [6].

Взаимосвязь маркеров ЭД и фиброза печени с уровнем ВН при ХГС практически не изучена.

Цель исследования - оценить взаимосвязи маркеров состояния эндотелия, фиброза печени и уровня вирусемии у больных с ХГС.

Материалы и методы. Обследовано 40 пациентов с ХГС в фазе реактивации, мужчин было 58 %, женщин - 42 %.  Критерии исключения - заболевания и состояния, сопровождающиеся выраженной ЭД: сердечно-сосудистые заболевания (атеросклероз, ИБС, артериальная гипертензия, аритмии, инсульты в анамнезе), сахарный диабет, бронхиальная астма, онкологические заболевания, беременность. Средний возраст больных ХГС составил 38,8±14,5 лет. Контрольная группа состояла из 15 практически здоровых лиц, не имеющих в анамнезе заболеваний печени, возраст - 32,8±8,3 года.

Помимо общеклинического и инструментального обследования (УЗИ), определения серологических маркеров ХГС (анти - HCV Jg G и М), проведено исследование уровня ВН методом ПЦР in real time (HCV - РНК) у 28 больных (Rotor Gene, Австралия).  По генотипам вируса пациенты в группе больных ХГС распределились следующим образом: 50 % пациентов имели 1b генотип HCV, у 17 % больных - 3а генотип, 11 % больных имели сочетание 1а и 1b генотипа, у 11 % пациентов - сочетание 1b и 3а генотипов, у 11 % - 2 генотип. Изучались тесты оценки функционального состояния эндотелия в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (ИФА): общий NO (SYSTEMS, США), эндотелин-1 (endothelin-1, Et-1) (BIOMEDICA CRUPPE, США), васкулоэндотелиальный фактор роста (vascular endothelial growth factor, VEGF) (Вектор-Бест, г. Новосибирск). Проводили подсчет количества десквамированных эндотелиоцитов (ДЭЦ) в плазме крови по методу Hladovec, 1978 г. [2]. Определяли ГК в сыворотке крови с помощью набора ВСМ Diagnostics (США) методом ИФА.       

Результаты обработаны при помощи пакета программ Statistica 6.0 Microsoft и Office Excell 2003. Статистическую обработку данных проводили методом вариационной статистики с применением t-критерия Стъюдента. Для описания полученных количественных признаков, имеющих нормальное распределение, использовалось среднее арифметическое (М) ± одно среднее квадратичное стандартное отклонение (σ). Для корреляционного анализа применялся расчет средних величин показателей корреляционных отношений для количественных признаков по Пирсону (r). Связь между показателями оценивалась как сильная при r > 0,7, средней силы - при r от 0,3 до 0,7, слабая - при r < 0,3. Различия между выборками считались статистически достоверными при значении для р < 0,05.

Результаты исследования и обсуждение. У обследованных пациентов были выявлены признаки поражения эндотелия по всем исследованным маркерам. Лабораторные показатели функционального состояния эндотелия и маркеров фиброза при ХГС представлены в таблице №1. При ХГС выявлено снижение по сравнению со здоровыми концентрации в крови высокоспецифичного маркера эндотелиальной дисфункции - NO (р=0,001), увеличение Et-1 (р<0,001), что указывает на дисбаланс вазоактивных соединений и нарушение кровообращения в печени. Повышены показатели ДЭЦ (р<0,001) и VEGF  (р=0,01), относящиеся собственно к маркерам повреждения эндотелия, что свидетельствует о слущивании эндотелиоцитов и неоангиогенезе, активатором которого является VEGF.

Таблица 1 Маркеры функционального состояния эндотелия и фиброза печени у больных ХГС

Показатели

Контрольная группа (n=15)

 ХГС

(n=40)

p

NO, мкмоль/л

29,43±3,34

18,7 ± 3,02

0,001

Et-1, фмоль/л

0,3±0,13

0,62±0,20

<0,001

ДЭЦ, 104

3,02±1,21

7,3 ± 4,0

<0,001

VEGF, пг/мл

158,7±72,8

249,5±94,5

0,01

ГК, нг/мл

17,8±17,0

70,38±52,8

0,02

АСТ/АЛТ

0,8±0,12

0,83±0,4

0,1

Примечание: р - значимость различий в сравниваемых группах.  

Между исследованными маркерами ЭД:  NO, Et-1, VEGF и ДЭЦ выявлены достоверные взаимосвязи, что свидетельствует о системном повреждении эндотелия при ХГС (табл. 2).

  Таблица 2 Взаимосвязи маркеров ЭД при ХГС

Исследуемые

показатели

ХГС (n=40)

r

p

NO и Et-1

- 0,91

0,00001

NO и ДЭЦ

- 0,57

0,003

Et-1 и ДЭЦ

0,76

0,00004

ДЭЦ и VEGF

0,61

0,015

Примечание: r - взаимосвязь показателей в группе больных ХГС; р - значимость корреляции показателей.

Таким образом, при ХГС дисфункция и поражение эндотелия являются облигатным компонентом патогенеза вирусного поражения печени.

Показатели фиброза демонстрировали следующие изменения: концентрация ГК была достоверно повышена  при ХГС (р=0,02), коэффициент де Ритиса (соотношение АСТ/АЛТ) при ХГС не отличался от группы контроля (табл. 1). ГК является прямым высокоспецифичным маркером фиброза печени, в группе больных она повышена в среднем в 4 раза, что свидетельствует об активации фиброза при ХГС, рутинный тест    - соотношение АСТ/АЛТ оказался менее чувствительным маркером фиброза. У ряда пациентов с ХГС соотношение АСТ/АЛТ было выше 1, но в этих случаях нельзя исключить дополнительное, помимо вируса, влияние алкоголя на гепатоциты, так как почти 40 % пациентов употребляли спиртные напитки.

Уровень ВН у больных в 76 % был высокий и составил в среднем 8,9±2,06 *106  копий/мл (М±m), Ме - 5,3, min - 1, max - 45. У 24% ВН была низкой: от 1 до 2*106  копий/мл. При проведении корреляционного анализа  уровня ВН, маркеров функционального состояния эндотелия и фиброза печени выявлены следующие взаимосвязи показателей (табл. 3). Вирусемия достоверно коррелировала с показателями повреждения эндотелия, то есть, чем выше уровень ВН, тем больше десквамация эндотелия (р=0,045) и выработка VEGF (р=0,001), который в свою очередь запускает процессы неоангиогенеза и способствует перестройке сосудистой архитектоники печени. Взаимосвязей показателей NO и Et-1 с ВН выявить не удалось.     

Таблица 3 Взаимосвязь уровня ВН, показателей функционального состояния эндотелия и маркеров фиброза печени при ХГС

Показатели

ХГС (n=24)

r

p

ВН и NO

-0,29

0,2

ВН и Et-1

0,34

0,3

ВН и ДЭЦ

0,6

0,045

ВН и VEGF

0,9

0,001

ВН и ГК

0,99

0,0015

ВН и АСТ/АЛТ

0,93

0,007

ГК и NO

-0,85

0,01

ГК и Et-1  

0,74

0,02

ГК и VEGF

0,5

0,01

АСТ/АЛТ и NO  

0,44

0,03

АСТ/АЛТ и Et-1

0,9

0,004

АСТ/АЛТ и ДЭЦ

0,88

0,001

АСТ/АЛТ и VEGF

0,4

0,02

Примечание: r - взаимосвязь показателей; р - значимость корреляции показателей.

Выявлены сильные взаимосвязи между вирусемией и маркерами фиброза печени: уровень ВН достоверно корррелирует с ГК (р=0,0015) и соотношением АСТ/АЛТ (р=0,007). Таким образом, чем выше вирусная нагрузка, тем активнее запускаются процессы выработки рубцовой соединительной ткани в печени. Поражение эндотелия в этом процессе играет непосредственное участие, прежде всего, через Et-1, который активирует звездчатые клетки печени, вырабатывающие грубую соединительную ткань. Это подтверждается и достоверными взаимосвязями между маркерами фиброза и поражения эндотелия: отрицательной корреляцией ГК и NO и положительными взаимосвязями ГК с Et-1, VEGF. Аналогичные достоверные корреляции выявлены и при изучении взаимосвязей отношения АСТ/АЛТ и NO, Et-1, ДЭЦ, VEGF. Таким образом, поражение эндотелия при ХГС непосредственно участвует в патогенезе ХГС и прогрессировании поражения печени в виде развития фиброза при инфекции вирусом гепатита С.

 Выводы

  1. У больных ХГС имеет место дисфункция и повреждение эндотелия, что характеризуется снижением NO, повышением Et-1, ДЭЦ, VEGF, при этом маркеры ЭД тесно взаимосвязаны между собой.
  2. Показатели поражения эндотелия у пациентов с ХГС коррелируют с выраженностью фиброза в печени по концентрации ГК и соотношению АСТ/АЛТ.
  3. Степень повреждения эндотелия и фиброза печени при ХГС взаимосвязана с уровнем вирусемии.

Рецензенты:

  • Устинова О.Ю.,  д.м.н., профессор кафедры экологии человека и безопасности жизнедеятельности Пермского государственного национального исследовательского университета, г. Пермь.
  • Гейн С.В., д.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории биохимии развития микроорганизмов Института экологии и генетики микроорганизмов УРО РАН,  г. Пермь.

Библиографическая ссылка

Щекотова А.П. ВЗАИМОСВЯЗЬ МАРКЕРОВ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ И ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ С ВИРУСНОЙ НАГРУЗКОЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВИРУСНОМ ГЕПАТИТЕ С // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 1. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=5458 (дата обращения: 28.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074