Продукты органического синтеза составляют значительную часть арсенала лекарственных средств современной медицины. Несмотря на значительное число лекарственных средств, использующихся в медицинской практике, а это более 20 тысяч наименований, постоянно ведется поиск более эффективных и безопасных. В значительной степени это относится к группам лекарственных средств, использующихся для лечения сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний [7]. В этом плане представляют интерес научные исследования, проводимые в Пермской государственной фармацевтической академии [4], направленные на поиск потенциальных лекарственных средств для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. В частности, одно из полученных соединений (2-метиланилид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты нитрат) на стадии скрининговых исследований показало выраженное антиаритмическое действие. Так, в сравнении со структурным аналогом лидокаином, антиаритмический индекс нового биологически активного соединения (БАС) в 9 раз выше при меньшей в 1,6 раза токсичности.
Исследование нового БАС в качестве потенциального лекарственного средства помимо разработки эффективных способов оценки качества на стадии доклинических испытаний включает установление стабильности и сроков годности.
Изучение вышеуказанных нормативных требований необходимо для установления времени, в течение которого вещество сохраняет неизменными физические, химические, биологические свойства, т.е. удовлетворяет всем требованиям нормативной документации. Обоснование установленного срока годности субстанции включается в раздел регистрационного досье, касающегося способов оценки качества.
Целью настоящего исследования является установление срока годности и стабильности БАС из группы анилидов замещенных карбоновых кислот – потенциального лекарственного средства с выраженным антиаритмическим действием.
Материалы и методы исследования
Субстанция мономекаина – 2-метиланилид-N,N-диэтиламиноэтановой кислоты нитрат. Эксперименты проведены на 5 сериях БАС, полученных в лабораторных условиях по методике [1]. Все образцы БАС предварительно проанализированы в соответствии с требованиями проекта ФС, разработанного автором.
ИК спектры получены на ИК Фурье спектрометре ALPHA-T в виде диска с калия бромидом в соотношении 1:200 мг.
Температура плавления соединения определена на приборе SMP3 (BarIowor Id Scientific).
Термостат ТСвЛ-80.
УФ спектры получены на спектрометре PerkinElmerLambda 45.
Использованы титрованные растворы, реактивы, растворители, индикаторы, соответствующие требованиям ГФ XII изд. [5]. Потенциометрическое титрование проводили с помощью автоматического титратора Titrolineeasy, снабженного магнитной мешалкой и комбинированным электродом. Методики испытания на подлинность и количественного определения, разработаны ранее авторами [2].
Результаты исследования и их обсуждение
При установлении сроков годности руководствовались требованиями ОФС 42-0075-07 ГФ XII [5] и Временной инструкции И-42-2-82 [3]. Согласно указанным документам установление стабильности возможно с использованием следующих способов:
- испытание в условиях долгосрочного хранения;
- испытание в условиях «ускоренного старения» согласно Временной инструкции И 42-2-82.
Метод «ускоренного старения», основанный на законе Вант-Гоффа, устанавливает зависимость между сроком годности вещества и температурой хранения экспериментальной серии субстанции:
tэ – температура экспериментального хранения,
tхр – температура хранения,
А – температурный коэффициент скорости химической реакции при увеличении температуры на 10 ºС (принят равным 2) [6].
Исследования проводили на 3-х сериях субстанции мономекаина (050713, 080813, 170314) при температуре экспериментального хранения, равной 60 ºС. Образцы помещали в склянки темного стекла с притертыми пробками. Контроль качества проводили через временные промежутки (11,5 дней), эквивалентные 6 месяцам хранения в естественных условиях по показателям, приведенным в табл. 1.
Таблица 1
Нормы качества субстанции мономекаина, контролируемые при установлении срока годности
Показатели |
Методы |
Нормы |
Описание |
Органолептический ГФ XII, ч. I, с.17, 484 |
Белый кристаллический порошок без запаха |
Температура плавления |
ГФ XII, ч. I, с. 29 |
137 – 139 °С |
Подлинность |
Инфракрасная спектрометрия ГФ XII, ч. I, с. 62-65 |
ИК спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра Мономекаина |
Ультрафиолетовая спектрофотометрия ГФ XII, ч. I, с. 56-61 ОФС 42-0042-07 |
УФ спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в спирте этиловом 96 % в области 220–350 нм должен иметь максимум поглощения при 244±1 нм |
|
Химические реакции ГФ XII, ч. II ОФС 42-0085-08 |
Образование азокрасителя после кислотного гидролиза – осадок оранжево-красного цвета (амидная группа) |
|
С дифениламином – синее окрашивание (нитрат-ион) |
||
Количественное содержание |
Ацидиметрическое титрование в неводной среде ОФС 42-0080-08 |
Содержание ЛС не менее 99,0 % С13Н20N2O • НNO3 в пересчете на сухое вещество |
Результаты эксперимента (табл. 2) показали, что субстанция мономекаина остается стабильной в течение 69 суток экспериментального хранения, что соответствует 1104 суткам хранения в естественных условиях, рассчитанных по правилу Вант-Гоффа:коэффициент соответствия.
Отсюда срок годности , что составляет 3 года.
Температура хранения, позволяющая обеспечить установленный срок годности, составляет:
Максимально допустимая температура хранения равна:
Таким образом, в результате проведенных исследований методом «ускоренного старения» установлен срок годности и температурный режим хранения субстанции мономекаина.
Изучение стабильности мономекаина проводили также по способу долгосрочного хранения. Для этого мономекаин серий 141209 и 290110 хранили в сухом, защищенном от света месте в склянках оранжевого стекла с притертыми пробками при комнатной температуре. Контроль качества проводили по основным показателям, через промежутки времени, равные 1 году хранения. Проведенные исследования (табл. 3) показали, что стабильность субстанции мономекаина в условиях долгосрочного хранения сохраняется не менее 4-х лет. Таким образом, может быть установлен предварительный срок годности – 4 года.
Заключение
1. Найдено, что стабильность и срок годности исследуемого БАС, установленные методом «ускоренного старения» при температуре 60 ºС, составляют не менее 3-х лет, а температурный режим хранения – от 20 до 26 ºС. Испытания по исследованию стабильности продолжаются.
2. Установлено, что субстанция мономекаина в условиях долгосрочного хранения при комнатной температуре в защищенном от света месте составляет не менее 4-х лет.
3. На основании проведенных исследований в проект ФС на мономекаин субстанцию введен срок годности – 3 года.
Таблица 2
Результаты исследований по изучению стабильности субстанции Мономекаина методом «ускоренного старения»
Серия |
Срок хранения, сут |
Описание |
Подлинность |
Темпера-тура плавле-ния, ºС |
Количест- венное содержание, % |
|||
ИК-спектр |
УФ спектр |
Реакция образования азокрасителя |
Реакция с дифенил-амином |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
|
|
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок оранжево-красного цвета |
Синее окрашивание |
137 - 139 |
не менее 99,0 |
050713 |
0 |
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок оранжево-красного цвета |
Синее окрашивание |
138,2 |
99,99 |
11,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
137,6 |
99,83 |
|
23 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,6 |
99,87 |
|
34,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,4 |
99,83 |
|
46 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,1 |
99,95 |
|
57,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,9 |
99,76 |
|
69 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,8 |
99,70 |
|
80813 |
0 |
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок оранжево-красного цвета |
Синее окрашивание |
138,9 |
99,96 |
11,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,8 |
99,96 |
|
23 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,8 |
99,83 |
|
34,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
137,8 |
99,87 |
|
46 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,2 |
99,83 |
|
57,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,8 |
99,70 |
|
69 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,4 |
99,74 |
|
170314 |
0 |
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок оранжево-красного цвета |
Синее окрашивание |
137,7 |
99,90 |
11,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
137,9 |
99,83 |
|
23 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
137,9 |
99,80 |
|
|
34,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,6 |
99,90 |
46 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,4 |
99,90 |
|
57,5 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
137,3 |
99,71 |
|
69 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
137,4 |
99,69 |
Таблица 3
Результаты исследований по изучению стабильности субстанции Мономекаина в естественных условиях
Серия |
Срок хранения, лет |
Описание |
Подлинность |
Темпера-тура плавле-ния, ºС |
Количест-венное содержание, % |
|||
ИК-спектр |
УФ спектр |
Реакция образования азокрасителя |
Реакция с дифениламином |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
|
|
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок красно-оранжевого цвета |
Синее окрашивание |
137–139 |
не менее 99,0 |
141209 |
0 |
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок красно-оранжевого цвета |
Синее окрашивание |
138,2 |
99,81 |
1 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,2 |
99,78 |
|
2 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,1 |
99,73 |
|
3 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,0 |
99,69 |
|
4 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,0 |
99,65 |
|
290110 |
0 |
Белый кристаллический порошок без запаха |
Совпадение полос с рисунком спектра |
Максимум при 244±1 нм |
Осадок красно-оранжевого цвета |
Синее окрашивание |
139,0 |
99,87 |
1 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
139,0 |
99,81 |
|
2 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,9 |
99,78 |
|
3 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,8 |
99,75 |
|
4 |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
- // - |
138,7 |
99,73 |
Рецензенты:
Гейн В.Л., д.х.н., профессор, заведующий кафедрой общей и органической химии ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Пермь;
Алексеева И.В., д.фарм.н., доцент, профессор кафедры фармацевтической технологии ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Пермь.
Библиографическая ссылка
Чекрышкина Л.А., Бабикова Е.А., Слепова Н.В. ИЗУЧЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ И УСТАНОВЛЕНИЕ СРОКА ГОДНОСТИ СУБСТАНЦИИ МОНОМЕКАИНА // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 2-2. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=22374 (дата обращения: 08.02.2025).