Между тем, хотя в последние годы и установлено, что липопротеины оказывают регуляторные эффекты на иммунный ответ и метаболизм клеток [2], изменяют продукцию цитокинов [6], однако многие вопросы взаимосвязи показателей, характеризующих липидтранспортную и иммунную системы при дисфункции щитовидной железы, требуют более детального изучения.
Цель работы. Изучить взаимосвязь липидтранспортной и иммунной систем организма в норме и при впервые выявленной гипофункции щитовидной железы.
Материал и методы исследования. Соблюдая этические принципы, предъявленные Хельсинкской декларацией всемирной медицинской ассоциации, было обследовано 115 мужчин в возрасте от 20 до 50 лет, разделенных на 2 группы: 1 - контрольная, включающая 60 здоровых мужчин и 2 - основная - 55 человек с впервые выявленной гипофункцией щитовидной железы.
В исследованиях использовалась гепаринизированная кровь (20 ЕД/мл крови). Субпопуляционный анализ лимфоцитов проводили методом иммунофлюоресценции, с применением панели моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD20+, CD25+ фирмы «Сорбент» (г. Москва). По полученным данным рассчитывали иммунорегуляторный индекс (ИРИ) [3].
Содержание в периферической крови IL-1α, TNF-α, IFN-γ определяли иммуноферментным методом с использованием тест-систем CytElisa Human IL-1α, CytElisa Human IFN-γ (США) и альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ (г. Новосибирск).
Изучение спонтанной и стимулированной пирогеналом функционально-метаболической активности нейтрофилов проводили методом восстановления нитросинего тетразолия нейтрофилами (НСТ-тест). Рассчитывали индекс стимуляции. Фагоцитарную активность макрофагов изучали по способности клеток поглощать полистероловый латекс [3].
Общий холестерин и содержание триглицеридов определяли унифицированными методами, а холестерин липопротеинов высокой и низкой плотности в сыворотке крови - методом избирательной преципитации фракций липопротеинов. Концентрацию холестерина очень низкой плотности рассчитывали по формуле: ТГ/2,181, где ТГ - триглицериды. Для оценки соотношения атерогенных и антиатерогенных липопротеинов использовали холестериновый коэффициент атерогенности [5].
При обработке полученных результатов использовали метод биологической статистики с использованием компьютерной прикладной программы Statistica 6,0, Biostat 2008 Professional и Microsoft Exsell Professional, с расчетом показателей Манна-Уитни и Спирмена Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимался равным 0,05 [7].
Результаты исследования и их обсуждение. При обследовании мужчин с впервые выявленной гипофункцией щитовидной железы (табл. 1) было выявлено повышение ОХС в 1,3 раза (р<0,001), а ТГ - в 1,8 раза (р<0,001). При этом уровень ЛПВП снижался на 19,7% (р<0,001), содержание ЛПНП повышалось на 37,2% (р<0,001), а уровень ЛПОНП - на 76,8% (р<0,001). Что касается коэффициента атерогенности, то у лиц с дисфункцией щитовидной железы данный показатель превышал величины здоровых мужчин на 59,3% (р<0,001).
Таблица 1 - Показатели липидтранспортной системы в норме и у лиц с впервые выявленной гипофункцией щитовидной железы Me [LQ; HQ]
|
Показатель |
Группы обследованных |
|
|
Контрольная (n = 60) |
Основная (n = 55) |
|
|
ХС (ммоль/л) |
4,98 [4,54; 5,46] |
6,49 [6,04; 6,98]* |
|
ТГ (ммоль/л) |
1,2 [1,02; 1,42] |
2,16 [1,83; 2,49]* |
|
ЛПВП (ммоль/л) |
1,22 [1,07; 1,36] |
0,98 [0,84; 1,18]* |
|
ЛПНП (ммоль/л) |
3,31 [2,86; 3,58] |
4,54 [4,08; 5,04]* |
|
ЛПОНП (ммоль/л) |
0,56 [0,47; 0,65] |
0,99 [0,84; 1,15]* |
|
Коэффициент атерогенности (ед.) |
2,7 [2,2; 3,1] |
4,3 [3,7; 5,6]* |
* - р<0,05 по отношению к контрольной группе;
n - количество обследованных в группе.
Необходимо отметить, что липидтранспортная система вносит существенный вклад в физико-химическое состояние клеточных мембран, в том числе и мембран клеток, участвующих в иммунных реакциях [1]. Подтверждением этому служат, с одной стороны, данные иммунограммы (табл. 2), а с другой - полученные нами результаты, касающиеся взаимосвязи между показателями, характеризующими липидтранспортную систему и иммунную резистентность организма у лиц с впервые выявленной гипофункцией щитовидной железы.
Таблица 2 - Показатели иммунной резистентности здоровых мужчин и лиц с гипофункцией щитовидной железы Me [LQ; HQ]
|
Показатель |
Группы обследованных |
|
|
Контрольная (n = 60) |
Основная (n = 55) |
|
|
CD3+ (%) |
59 [56; 64] |
46 [41; 50]* |
|
CD4+ (%) |
39 [35; 43] |
27 [25; 29]* |
|
CD8+ (%) |
21 [19; 24] |
17 [14,75; 19]* |
|
CD16+ (%) |
16 [15; 18] |
13 [11; 15]* |
|
CD20+ (%) |
17 [15; 19] |
27 [24; 30]* |
|
CD25+ (%) |
24 [21; 29] |
17 [14,75; 20]* |
|
ИРИ |
1,78 [1,63; 2] |
1,68 [1,44; 1,88]* |
|
IL-1α (pg/ml) |
13,11 [9,83; 14,73] |
6,23 [5,26; 7,63]* |
|
IFN-γ (pg/ml) |
117,46 [91,78; 131,19] |
74,7 [61,28; 95,33]* |
|
TNF-α (pg/ml) |
16,76 [13,56; 26,21] |
34,27 [26,22; 39,77]* |
|
IgA (мг/мл) |
1,68 [1,6; 1,89] |
1,28 [1,15; 1,47]* |
|
IgM (мг/мл) |
0,95 [0,88; 1,06] |
1,24 [1,19; 1,30]* |
|
IgG (мг/мл) |
8,04 [7,71; 8,96] |
13,58 [10,65; 15,03*] |
|
НСТ-спонтанный (%) |
5,0 [4,0; 7,0] |
15,0 [12,0; 17,0]* |
|
НСТ-стимулированный (%) |
23,0 [17,0; 32,0] |
28,0 [24,0; 33,0]* |
|
ИС |
4,6 [4,0; 5,2] |
1,92 [1,63; 2,27]* |
|
ФА (%) |
71,0 [62,0; 80,0] |
47,0 [42,75; 51,5]* |
|
ФЧ |
6,2 [5,1; 7,5] |
3,0 [2,7; 3,8]* |
* - р<0,05 по отношению к контрольной группе;
n - количество обследованных в группе.
Так, проведенный анализ субпопуляций лимфоцитов в основной группе (табл. 2) выявил снижение на 22% (р<0,001) CD3+-клеток, на 30,8% (р<0,001) - CD4+-лимфоцитов, CD8+-клеток - на 19,1% (р<0,001), CD16+-клеток - в 1,2 раза (р<0,001), CD25+-лимфоцитов - на 29,2% (р<0,001), а ИРИ - на 5,6% (р<0,02) по сравнению со здоровыми мужчинами.
Что касается В-лимфоцитов, то увеличение их содержания на 58,8% (р<0,001) сочеталось с повышением уровня иммуноглобулинов А, М и G (табл. 2).
При изучении цитокинового гомеостаза нами выявлено снижение содержания IL-1α у мужчин с дисфункцией щитовидной железы в 2,1 раза (р<0,001), IFN-γ - в 1,6 раза (р<0,001), а уровень TNF-α, напротив, повышался в 2 раза (р<0,001).
Что касается функционально-метаболической и фагоцитарной активности клеток, то в основной группе установлено повышение в 3 раза (р<0,001) способности клеток синтезировать свободные радикалы кислорода и уменьшение на 33,8% (р<0,001) поглотительной способности клеток.
В контрольной группе были установлены взаимосвязи между уровнем ТГ и CD4+-клетками (r = 0,28, p<0,05, рис. 1), липопротеинами высокой плотности и фагоцитарной активностью (r = 0,26, p<0,05), липопротеинами высокой плотности и IgG (r = -0,28, p<0,05), а также между липопротеинами очень низкой плотности и CD4+-лимфоцитами (r = 0,28, p<0,05), липопротеинами очень низкой плотности и CD8+-клетками (r = 0,26, p<0,05), коэффициентом атерогенности и IgM (r = -0,27, p<0,05).
Рис. 1. Зависимость уровня CD4+ от концентрации триглицеридов и липопротеинов очень низкой плотности в контрольной группе.
В основной группе установлены взаимосвязи между холестерином и фагоцитарным числом (r = -0,30, p<0,05), холестерином и IFN-γ (r = -0,27, p<0,05, рис. 2). Кроме того, была выявлена зависимость между холестерином и TNF-α (r = 0,27, p<0,05), а также между триглицеридами и IL-1α (r = -0,31, p<0,02), липопротеинами высокой плотности и CD4+-лимфоцитами (r = 0,29, p<0,05), липопротеинами высокой плотности и общим содержанием лейкоцитов (r = 0,36, p<0,01), липопротеинами высокой плотности и ИС (r = -0,35, p<0,01), между липопротеинами низкой плотности и эозинофилами (r = 0,28, p<0,05), липопротеинами низкой плотности и ИСЛЭ (r = -0,28, p<0,05), липопротеинами низкой плотности и фагоцитарной активностью клеток (r = -0,38, p<0,001), липопротеинами низкой плотности и фагоцитарным числом (r = -0,30, p<0,02), липопротеинами низкой плотности и TNF-α (r = 0,33, p<0,01), липопротеинами низкой плотности и IFN-γ (r = -0,34, p<0,01, рис. 2), липопротеинами очень низкой плотности и IL-1α (r = -0,30, p<0,02), коэффициентом атерогенности и общим содержанием лейкоцитов (r = -0,39, p<0,001, рис. 3), коэффициентом атерогенности и CD8+-лимфоцитами (r = -0,29, p<0,05, рис. 4), коэффициентом атерогенности и CD16+ -клетками (r = -0,30, p<0,05), коэффициентом атерогенности и фагоцитарной активностью лейкоцитов (r = -0,27, p<0,05).
Рис. 2. Зависимость уровня интерферона от содержания общего холестерина и липопротеинов низкой плотности при впервые выявленном гипотиреозе.
Рис. 3. Корреляционная зависимость между коэффициентом атерогенности и общим количеством лейкоцитов в основной группе.
Рис. 4. Зависимость уровня CD8+- клеток от коэффициента атерогенности в основной группе.
Таким образом, результаты настоящего исследования свидетельствуют о том, что при гипофункции щитовидной железы липидтранспортная система оказывает существенное влияние на функциональное состояние иммунной резистентности организма, что проявляется на клеточном и молекулярном уровнях ее организации.
Рецензенты:
- Зуева О.М., д.м.н., профессор кафедры безопасности жизнедеятельности, Омский государственный технический университет, г. Омск.
- Русаков В.В., д.м.н., профессор кафедры патофизиологии с курсом клинической патофизиологии, Омская государственная медицинская академия, г. Омск.