Артериальная гипертония (АГ) является одним из наиболее распространенных сердечно-сосудистых заболеваний и важным фактором кардиоваскулярной смертности. В России значительная часть трудоспособного населения страдает АГ, которая все чаще встречается одновременно с дислипидемией [3]. Такое сочетание обусловливает структурно-функуциональные изменения клеток крови, повышая число обратимо и необратимо измененных их форм и усиливая их агрегационную активность, способствуя повышению риска развития тромботических осложнений [8,9].
В тоже время, количество работ, посвященных микрореологии клеток крови при АГ с дислипидемией не очень велико, получено не достаточно сведений о влиянии на нее гиполипидемических препаратов, принимать которые данная категория пациентов вынуждена длительное время. В этой связи представлялось целесообразным оценить влияние широко применяемого в России статина (аторвастатина) на микрореологические свойства клеток красной крови.
Цель работы - исследовать возможности влияния ингибитора гидрокси-метилглутарил коэнзим А-редуктазы - аторвастатина на микрореологические свойства эритроцитов у больных АГ с дислипидемией.
Материалы и методы исследования
Под наблюдением находились 33 больных АГ 1-2 степени с дислипидемией IIб типа, риск 3 (критерии ДАГ3 (2008), среднего возраста (52,8±1,7года). Группу контроля составили 26 здоровых людей аналогичного возраста.
Содержание общего холестерина (ХС) и триглицеридов (ТГ) оценивали энзиматическим колориметрическим методом набором фирмы „Витал Диагностикум". ХС ЛПВП определяли набором фирмы „Ольвекс Диагностикум" энзиматическим колориметрическим методом.
Общие липиды оценивали набором фирмы „Эрба-Рус". Общие фосфолипиды (ОФЛ) сыворотки крови оценивали по содержанию в них фосфора [5], с последующим установлением соотношения в плазме ОХС/ОФЛ. Уровни ХС ЛПНП рассчитывали по Фридвальду. Содержание ХС ЛПОНП устанавливали по формуле (содержание ТГ/2,2). Полученные показатели общего ХС, ХС ЛПНП, ХС ЛПВП и ТГ рассматривали как нормальные, пограничные или высокие в соответствии с Российскими рекомендациями разработанными комитетом экспертов ВНОК, секция атеросклероза (2007) [4]: общий ХС выше 5,0 ммоль/л, ТГ выше 1,7 ммоль/л и ХС ЛПНП выше 3,0 ммоль/л, ХС ЛПВП менее 1,0 ммоль/л. Коэффициент атерогенности рассчитывался по формуле ХС ЛПНП/ХС ЛПВП. За норму принимались значения ниже 3.
Активность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в плазме оценивали по содержанию тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором фирмы «Агат-Мед» и ацилгидроперекисей (АГП) [2]. Для оценки антиокислительного потенциала жидкой части крови определяли ее антиокислительную активность [1].
В отмытых и ресуспендированных эритроцитах количественно оценены уровни ХС энзиматическим колориметрическим методом набором «Витал Диагностикум» и ОФЛ по содержанию в них фосфора [5] с последующим расчетом отношения ХС/ОФЛ.
Состояние внутриэритроцитарного ПОЛ определяли по концентрации малонового диальдегида (МДА) в реакции восстановления тиобарбитуровой кислоты в отмытых и ресуспендированных эритроцитах [6] и содержанию АГП [2]. Активность внутриэритроцитарных антиоксидантных ферментов устанавливали для каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) [10].
Количественная оценка содержания и соотношения патологических и нормальных форм эритроцитов проводилась с использованием световой фазово-контрастной микроскопии клеток. Производился расчет индекса трансформации (ИТ), индекса обратимой трансформации (ИОТ), индекса необратимой трансформации (ИНОТ), индекса обратимости (ИО)[7].
Агрегацию эритроцитов определяли с помощью светового микроскопа, путем подсчета в камере Горяева количества агрегатов эритроцитов, числа агрегированных и неагрегированных эритроцитов во взвеси отмытых эритроцитов в плазме крови с вычисление среднего размера агрегата (СРА), показателя агрегации (ПА), процента неагрегированных эритроцитов (ПНА) [7].
С целью коррекции дислипидемии всем больным назначался препарат аторвастатин 10 мг на ночь на фоне постоянного приема больными эналаприла 10мг 2 раза в сутки. Оценка клинических и лабораторных показателей проводилась в начале лечения, через 4, 16 и 52 недели терапии. Статистическая обработка полученных результатов велась t-критерием Стьюдента.
Результаты исследования
Терапия аторвастатином больных АГ с дислипидемией обеспечивала быструю оптимизацию показателей липидного спектра крови и ПОЛ плазмы (табл.1).
Таблица 1. Липидный спектр плазмы крови больных на фоне лечения аторвастатином
|
Параметры |
Аторвастатин, n=33,М±m |
Контроль, |
|||
|
исход |
4 нед. |
16 нед. |
52 нед. |
n=26,М±m |
|
|
ОХС, ммоль/л |
6,3±0,02 |
5,5±0,07 р1<0,01 |
4,6±0,06 р1<0,01 |
4,5±0,03 |
4,8±0,05 р<0,01 |
|
ХС ЛПВП, ммоль/л |
1,04±0,002 |
1,19±0,003 р1<0,01 |
1,63±0,005 р1<0,01 |
1,65±0,003 |
1,60 ±0,006 р<0,01 |
|
ХС ЛПНП, ммоль/л |
4,00±0,03 |
3,15±0,05 р1<0,01 |
2,19±0,04 р1<0,01 |
2,08±0,02 |
2,43±0,04 р<0,01 |
|
ХС ЛПОНП, ммоль/л |
1,30±0,003 |
1,16±0,003 р1<0,01 |
0,78±0,002 р1<0,01 |
0,77±0,004 |
0,77±0,005 р<0,01 |
|
ТГ, ммоль/л |
2,85±0,05 |
2,56±0,03 р1<0,01 |
1,71±0,05 р1<0,01 |
1,69±0,04 |
1,70 ±0,02 р<0,01 |
|
ОЛ, ммоль/л |
9,0±0,18 |
8,2±0,07 р1<0,01 |
5,6±0,05 р1<0,01 |
5,7±0,04 |
5,6 ±0,03 р<0,01 |
|
ОФЛ, ммоль/л |
1,54±0,04 |
2,04±0,06 р1<0,01 |
3,56±0,07 р1<0,01 |
3,56±0,04 |
3,54±0,09 р<0,01 |
|
ОХС/ОФЛ плазмы |
4,09±0,05 |
2,70±0,06 р1<0,01 |
1,29±0,03 р1<0,01 |
1,26±0,05 |
1,36±0,06 р<0,01 |
|
Коэффициент атерогенности плазмы |
3,85±0,05 |
2,65±0,04 р1<0,01 |
1,34±0,04 р1<0,01 |
1,26±0,04 |
1,52 ±0,05 р<0,01 |
|
АГП плазмы, Д233/1 мл |
3,21 ±0,04 |
2,76±0,03 р1<0,01 |
1,42±0,04 р1<0,01 |
1,43±0,05 |
1,42 ±0,09 р<0,01 |
|
ТБК плазмы, мкмоль/л. |
5,17±0,10 |
4,77±0,07 р1<0,01 |
3,56±0,03 р1<0,01 |
3,54±0,04 |
3,56 ±0,07 р<0,01 |
|
Антиокислитель-ный потенциал плазмы, % |
23,5±0,11 |
26,4±0,04 р1<0,01 |
32,9±0,10 р1<0,01 |
32,8±0,02 |
32,9±0,12 р<0,01 |
Условные обозначения: р - достоверность различий исходных значений и контроля, р1 - достоверность динамики показателей на фоне лечения. В последующих таблицах обозначения сходные.
Так, уже за 4 недели применения аторвастина проявления дислипидемии в крови и интенсивность ПОЛ плазмы значительно снизились, а к 16 неделям лечения данные показатели оказались сравнимы с таковыми в группе контроля. Продолжение лечения аторвастатином сохраняло достигнутую нормализацию липидного спектра и ПОЛ плазмы.
Положительные сдвиги липидного спектра плазмы крови на фоне аторвастатина во многом обеспечили изменения липидного состава мембран эритроцитов. Так, в результате 4-х недель лечения аторвастатином в мембранах красных кровяных телец было отмечено снижение уровня ХС с 1,31±0,005 мкмоль/1012 эр. до 1,25±0,009 мкмоль/1012 эр. и рост ОФЛ с 0,54±0,004 мкмоль/1012 эр. до 0,62 ±0,010 мкмоль/1012 эр. К 16 неделе терапии достигнута нормализация липидного состава мембран эритроцитов (ХС - 1,03±0,007 мкмоль/1012 эр., ОФЛ - 0,076±0,009 мкмоль/1012 эр. при градиенте в них ХС/ОФЛ 1,36±0,010). Продолжение лечения до 52 недель не влияло на достигнутые результаты.
В результате лечения аторвастатином у больных АГ с дислипидемией выявлено выраженное ослабление активированного внутриэритроцитарного ПОЛ за счет усиления антиоксидантной защиты красных кровяных телец. Так, у пациентов к 16 неделе приема аторвастатина на фоне усиления активности каталазы и СОД (с 7600,0±15,5 МЕ/1012 эр. и 1577,0±2,34 МЕ/1012 эр. до 11199,0±15,4 МЕ/1012 эр. и 1989,0±7,48 МЕ/1012 эр. при контрольных значениях 11196,0±20,1 МЕ/1012 эр. и 1986,0±6,81 МЕ/1012 эр., соответственно) было достигнуто снижение в них АГП и МДА (с 4,54±0,12 Д233/1012 эр. до 3,07±0,18 Д233/1012 эр., и с 1,65±0,11 нмоль/1012эр. до 1,15±0,10 нмоль/1012эр., соответственно), оказавшись сравнимо с показателями группы контроля (3,08±0,11 Д233/1012 эр. и 1,14±0,04 нмоль/1012 эр., соответственно). Продолжение терапии аторвастатином сохранило данные показатели на достигнутом уровне.
Применение аторвастатина вызвало в крови больных АГ с дислипидемией увеличение содержания дискоцитов (табл.2). Уже через 16 недель лечения их содержание полностью нормализовалось (82,3±0,20%), сохраняясь до конца наблюдения (82,4±0,14%). При этом, суммарное количество обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов снижалось, стабильно достигнув значений группы контроля к 16 неделе (11,4±0,12% и 6,4±0,13%, соответственно). Найдено, что атровастатин способствовал понижению у пациентов ИТ, достигшего уровня контроля через 4 мес. лечения (0,27±0,014). Одновременно с этим у больных АГ с дислипидемией было выявлено уменьшение ИОТ, составившего к 16 недель терапии 0,14 ±0,015. Оптимизация количества циркулирующих в крови пациентов необратимо измененных эритроцитов на фоне терапии аторвастатина обеспечивало у них нормализацию ИНОТ к 16 неделе лечения (0,07±0,008), сочетаясь с увеличением ИО до 1,78±0,006%, вышедшим на уровень группы контроля.
В результате 16 недель примененной гиполипидемической терапии отмечено снижение суммы эритроцитов в агрегате и количества агрегатов при увеличении свободно лежащих эритроцитов до уровня группы контроля. При этом, СРА к 16 неделе терапии составил 4,6±0,05 клеток, ПА - 1,13±0,09, а ПНА достиг уровня 85,4±0,11%, сохраняя свои значения до конца наблюдения (табл.2).
Таблица 2. Цитоархитектоника и агрегация эритроцитов у больных, принимающих аторвастатин
|
Показатели |
Аторвастатин, n=33, M±m |
Контроль, n=26, M±m |
|||
|
исход |
4 нед. |
16 нед. |
52 нед. |
||
|
Дискоциты, % |
69,3±0,19 |
73,1±0,20 р1<0,05 |
82,3±0,20 р1<0,05 |
82,4±0,14 |
82,2±0,27 р<0,01 |
|
Обратимо изм. эритроциты, % |
18,0±0,23 |
16,5±0,14 р1<0,05 |
11,4±0,12 р1<0,01 |
11,3±0,20 |
11,4±0,20 р<0,01 |
|
Необратимо изм. эритроциты, % |
12,8±0,19 |
12,0±0,10 р1<0,05 |
6,4±0,13 р1<0,05 |
6,3±0,22 |
6,4±0,12 р<0,01 |
|
Индекс трансформации |
0,44±0,013 |
0,40±0,013 р1<0,05 |
0,27±0,014 р1<0,01 |
0,21±0,016 |
0,22±0,011 р<0,01 |
|
Индекс обратимой трансформации |
0,26±0,005 |
0,23±0,024 р1<0,05 |
0,14±0,015 р1<0,05 |
0,14±0,011 |
0,14±0,010 р<0,01 |
|
Индекс необратимой трансформации |
0,19±0,009 |
0,16±0,008 р1<0,05 |
0,07±0,008 р1<0,01 |
0,08±0,011 |
0,08±0,001 р<0,01 |
|
Индекс обратимости |
1,41±0,005 |
1,38±0,005 р1<0,05 |
1,78 ±0,006 р1<0,01 |
1,79±0,007 |
1,78±0,004 р<0,01 |
|
Сумма всех эритроцитов в агрегате |
69,0±0,10 |
62,7±0,05 р1<0,05 |
41,7±0,10 р1<0,01 |
41,8±0,07 |
41,9±0,10 р<0,01 |
|
Количество агрегатов |
13,1±0,14 |
12,9±0,11 |
9,0±0,11 р1<0,05 |
9,1±0,06 |
9,0±0,06 р<0,01 |
|
Количество свободных эритроцитов |
152,9±2,48 |
164,3±1,79 р1<0,05 |
242,6±0,28 р1<0,01 |
242,1±0,40 |
240,0±0,23 р<0,01 |
|
Показатель агрегации |
1,34±0,10 |
1,28 ±0,13 р1<0,05 |
1,13±0,09 р1<0,01 |
1,13±0,07 |
1,13±0,15 р<0,01 |
|
Процент не агрегированных эритроцитов |
68,8±0,04 |
72,2±0,10 р1<0,05 |
85,4±0,11 р1<0,01 |
85,4±0,14 |
85,0±0,17 р<0,01 |
|
Средний размер агрегата, клеток |
5,3±0,05 |
4,9±0,07 |
4,6±0,05 р1<0,05 |
4,6±0,14 |
4,7±0,09 р<0,01 |
Таким образом, у больных АГ с дислипидемией на фоне терапии аторвастатином выявляется стойкая нормализация микрореологических свойств эритроцитов уже через 16 недель лечения.
Обсуждение
В виду того, что эритроциты составляют 98% от общего объема элементов крови, именно их изменения структурно-функциональных свойств неизбежно отражается на ее микрореологических особенностях. Одной из причин данных изменений является сочетание АГ с дислипидемией, которое приводит к липидному дисбалансу в мембранах красных кровяных телец [1]. Перегруженность холестерином на фоне выраженных гемодинамических нагрузок, сопровождаемая ослаблением антиоксидантной защиты эритроцитов и ростом в них активности ПОЛ, ухудшению микрореологических свойств красных кровяных телец. В проведенных исследованиях выявлено, что у больных АГ с дислипидемией отмечаются изменения цитоархитектонических свойств эритроцитов, заключающихся в снижении дискоцитов и нарастании обратимо и необратимо измененных форм, сочетаясь с ростом их способности к агрегатообразованию. Найденная динамика поверхностной геометрии эритроцитов неизбежно приводит к нарушению реологии крови, особенно в сосудах микроциркуляторного русла с тенденцией к тромбообразованию у данного контингента больных.
В работе установлено, что гиполипидемический препарат аторвастатин в короткие сроки способен стойко оптимизировать липидный состав плазмы и мембран эритроцитов. Применение аторвастатина усиливает антиоксидантную защиту плазмы крови и эритроцитов, ослабляя в них явления ПОЛ. Кроме того, аторвастатин способен за 4 месяца нормализовать цитоархитектонику эритроцитов со снижением содержания в кровотоке их активированных форм до уровня показателей группы контроля. Это во многом является основой ослабления до уровня контроля агрегационной способности эритроцитов, что само по себе минимизирует у таких больных риск тромбообразования.
Таким образом, применение аторвастатина у больных АГ с дислипидемией к 16 неделям терапии нормализует активность ПОЛ в мембранах эритроцитов, их цитоархитектонику и агрегационную активность, сохраняющиеся при продолжении приема препарата.
Выводы
- Терапия аторвастатином у больных артериальной гипертонией с дислипидемией в течение 16 недель стойко нормализует липидный состав и уровень ПОЛ в плазме и эритроцитах.
- Применение аторвастатина у больных с АГ и дислипидемией, в течение 16 недель выводит на уровень контроля цитоархитектонику и агрегационную способность эритроцитов, поддерживая их на достигнутом уровне при условии продолжения приема препарата.
Рецензенты:
Жукова Л.А., д.м.н., профессор, зав. кафедрой эндокринологии и диабетологии Курского государственного медицинского университета, г.Курск;
Громнацкий Н.И., д.м.н., профессор, профессор кафедры терапии №2 Курского государственного медицинского университета, г.Курск.