Введение
Одним из методов изучения механизмов, лежащих в основе ориентировочно-исследовательской деятельности организма, является наблюдение за лабораторными животными в тесте «открытое поле» [1, 3, 7]. Нередко авторы, работающие в этой области, отмечают половые особенности поведенческой активности животных [2, 3, 7, 9, 10], анализируют индивидуально-типологические черты поведения крыс в «открытом поле» [4, 5, 8]. Однако недостаточно ясным остается вопрос о соотношениях между половой принадлежностью особей и индивидуально-типологическими особенностями их ориентировочно-исследовательского поведения. В этой связи целью нашей работы стало выявление соотношений между половыми и типологическими особенностями поведенческой активности нелинейных крыс в тесте «открытое поле».
Материал и методы исследования
Эксперименты выполнены на 35 самцах и 32 самках нелинейных белых крыс 3,5–4 месячного возраста в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. № 755). Животные содержались в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и корму и были приручены. Опыты выполнены в весенне-летний период.
Исследование ориентировочно-исследовательского поведения (ОИП) выполняли по методике Буреш Я. И., Ломтевой Н. А. [1, 3]. Время экспозиции каждой особи в «открытом поле» составляло 2 минуты. Животные тестировались однократно. Крыса помещалась в центр «открытого поля». Фиксировали латентный период первого движения – ЛП1, подсчитывали число пересеченных периферических квадратов (ПК), центральных квадратов (ЦК), вертикальных стоек с опорой на бортик (периферические стойки – ПС), стоек без опоры на бортик (центральные стойки – ЦС), заглядываний в «норки», актов умывания или груминга, катышков помета или болюсов, количество которых расценивается как показатель эмоциональной реактивности [8] и тревожности [7]. После тестирования животное возвращалось в клетку, а поверхность поля тщательно отмывалась перед помещением следующей крысы.
Основная активность каждой особи определялась по формуле:
ОА = ПК+ЦК+ПС+ЦС, где
ОА – основная активность, шт.; ПК – число пересеченных периферических квадратов, шт.; ЦК – число пересеченных центральных квадратов, шт.; ПС – число периферических стоек, шт.; ЦС – число центральных стоек, шт.
Математический анализ данных проводили с использованием теста Манна – Уитни, ранжирования в программе Statistica 6.0. Значимыми считали различия при р<0,05.
Результаты исследований
Анализ параметров ОИП показал (табл. 1), что латентный период первого перемещения обследованных крыс был непродолжительным – в среднем 4,2±0,72 сек. Основными проявлениями ОИП были побежки (локомоции) по поверхности поля, оцениваемые по числу пересеченных квадратов. От общего числа проявлений ОИП они составляли до 66 %. Вертикальная активность в виде стоек (ЦС и ПС) составляла всего 10 %, а заглядывание в норки – 23 % от общей активности.
Таблица 1
Показатели ориентировочно-исследовательского поведения самцов и самок
нелинейных крыс в тесте «открытое поле» (М ± m)
Показатели ОИП |
Среднее по общей выборке, n = 67 |
Самцы, n = 35 |
Самки, n = 32 |
Латентный период первого перемещения, сек. |
4,2±0,72 |
3,5±0,61 |
4,9±1,37 |
Число пересеченных периферических квадратов, шт. |
18,2±0,87 |
16,3±1,07 |
20,3±1,32* |
Число пересеченных центральных квадратов, шт. |
2,2±0,26 |
1,9±0,35 |
2,5±0,41 |
Число периферических стоек, шт. |
3,1±0,21 |
2,7±0,22 |
3,6±0,36* |
Число центральных стоек, шт. |
0,5±0,10 |
0,3±0,10 |
0,7±0,17* |
Заглядывание в норки, шт. |
6,5±0,40 |
6,4±0,51 |
6,6±0,63 |
Груминг, шт. |
2,4±0,32 |
1,9±0,26 |
2,8±0,62 |
Болюсы, шт. |
0,6±0,20 |
1,0±0,36 |
0,2±0,10* |
Основная активность (ОА), шт. |
24,1±1,07 |
21,2±1,24 |
27,2±1,66** |
Примечание: p<0.05, p<0.01 – *, ** – по сравнению с самцами.
Животные двигались в основном по периферии «открытого поля», реже выходили в центральную его часть. Активность самцов и самок крыс на периферии «открытого поля» достигала 88,7 %, а в центре – только 11,2 % от общего числа двигательных проявлений.
Периоды груминга были довольно редкими и непродолжительными у особей обоих полов. Только 13 животных из всей выборки оставили на поле болюсы, что свидетельствовало о довольно низком уровне тревожности, поскольку все они были хорошо приручены до начала эксперимента.
Согласно табл. 1, самки, в отличие от самцов, пересекали больше периферических квадратов, чаще делали стойки на периферии и в центре поля. При этом они давали значительно меньше болюсов, чем самцы (р<0,05). Соответственно, средние величины ОА самок были выше, чем у самцов, на 28 % (р<0,01). То есть самки проявляли в среднем бóльшую двигательную активность в «открытом поле» по сравнению с самцами.
Определив пределы варьирования параметров ОИП самцов и самок, мы обнаружили, что в обеих группах пределы варьирования показателей идентичны. Так, число ПК изменялось у самцов в диапазоне от 4 до 33 шт., у самок – от 3 до 31 шт.; основная активность у самцов варьировала в пределах 8–43 проявления, у самок – 7–46 проявлений и т. д.
Учитывая это, мы проанализировали группы на предмет выявления типов ориентировочно-исследовательской активности среди обследованных крыс. Ранжирование особей было проведено по их основной активности (ОА), которая складывалась из суммы числа пересеченных периферических и центральных квадратов, периферических и центральных стоек.
В результате ранжирования было выделено 3 группы крыс с различной ОА: низкой – Низкая ОА (< 20 проявлений), средней – Средняя ОА (от 20 до 29 проявлений), высокой – Высокая ОА (от 30 и более проявлений). Численный состав и показатели ОИП в этих группах представлены в табл. 2, из которой видно, что суммарное число пересеченных квадратов и стоек у крыс с низкой ОА почти в 2 раза ниже, чем у крыс с высокой ОА.
Таблица 2
Показатели ОИП самцов и самок крыс с различным типом основной активности в тесте «открытое поле»(M±m)
Показатели ОИП |
Самцы (n= 35) |
Самки (n= 32) |
||||
Низкая ОА |
Средняя ОА |
Высокая ОА |
Низкая ОА |
Средняя ОА |
Высокая ОА |
|
ОА, шт |
15,0±0,8### |
23,8±0,8 |
33,8±2,5###,^^^ |
11,6±1,8 ### |
24,6±0,8 |
35,1±1,4 ###,^^^ |
ПК, шт |
10,7±0,8### |
19,3±0,7 |
25,6±2,4 ##,^^^ |
7,2±1,4 ### |
18,6±0,8 |
26,6±1,0 ###,^^^ |
ЦК, шт |
1,1±0,3 |
2,1±0,6 |
4,0±1,2 ^^ |
2,2±0,7 |
2,0±0,4 |
3,1±0,8 |
ПС, шт |
3,0±0,3 |
2,1±0,4 |
3,4±0,6 |
2,2±0,2 |
2,9±0,4 |
4,7±0,6 ^ |
ЦС, шт |
0,2±0,1 |
0,3±0,2 |
0,8±0,4 |
0,0±0,0
|
1,1±0,3 □ |
0,7±0,2 |
Норки, шт |
4,8±0,7 ## |
8,0±0,8 |
6,8±1,1 |
5,0±1,0 |
5,8±1,1 |
7,8±0,9 |
Примечание. p<0.05, p<0.01, p<0.001 – *, **, *** – по сравнению с низкой ОА; #, ##, ### – по сравнению со средней ОА; p<0.05, -□ по сравнению с самцами аналогичной группы.
Рис. 1. Соотношение особей с низкой, средней и высокой основной активностью в открытом поле среди самцов и самок нелинейных крыс
Анализ результатов выявил, что среди самцов высока доля особей с низкой ОА – 46 %, в то время как особей с высокой ОА всего 14 % (рис. 1). Среди самок, напротив, меньшинство (16 %) проявляют низкую ориентировочно-исследовательскую активность, большая часть животных демонстрирует высокую и среднюю ОА (43 % и 41 % соответственно).
Рис. 2. Соотношение самцов и самок в группах, выделенных на основе низкой, средней и высокой основной активности особей в открытом поле
Также нами проанализирована численность и половая структура групп, сформированных на основе типов ориентировочно-исследовательской активности крыс (рис. 2). Обнаружилось, что самая многочисленная группа объединила животных со средним уровнем ОА (27 особей или 40 % от всех обследованных крыс). Численность крайних типологических групп (с низкой и высокой ОА) была примерно одинакова (соответственно 21 и 19 особей, или 31 % и 28 % от общего числа животных).
В группе со средней ориентировочно-исследовательской активностью самцы и самки встречались почти в равных соотношениях (52 % и 48 % соответственно) (рис. 2). Группу с низкой ОА преимущественно сформировали самцы, которых в её составе оказалось 76 %, самок – 24 %. Напротив, среди крыс с высокой ОА в основном встречались самки – 74 %, самцов было значительно меньше – 26 %.
Обсуждение результатов
Анализ показателей ОИП обследованных нами крыс подтверждает аналогичные данные других авторов [3, 6, 7, 8]. На основании полученных результатов мы можем согласиться с мнением ученых, выявивших половые особенности поведения крыс в открытом поле [2, 7, 9, 10]. Согласно существенной разнице средних, самки проявляют большую горизонтальную и вертикальную подвижность при меньшем числе актов груминга и болюсов. Однако пределы варьирования параметров ОИП в группах самцов и самок почти совпадают. Выяснению причины половых различий способствовал анализ типологических особенностей поведения крыс.
Многие авторы отмечают, что ОИП животных носит выраженные индивидуально-типологические черты [4, 5, 8]. По нашим наблюдениям, хорошо прирученные животные в течение 2 мин тестирования в основном демонстрируют горизонтальные локомоции, заглядывания в норки, реже – стойки. Поэтому определение типологических особенностей поведения мы сочли целесообразным провести именно по параметрам двигательной и исследовательской активности, которые использовали для расчета основной активности – ОА. Ранжирование крыс выявило особей с низкой, средней и высокой ОА в открытом поле.
Оценив соотношения между половой принадлежностью и типами активности крыс, мы выяснили, что среди самцов чаще встречаются особи с низкой и средней активностью, а среди самок – особи с высокой и средней активностью. Следовательно, различия между группами самцов и самок по ряду параметров ОИП определяются частотой встречаемости в них особей с различными типами ориентировочно-исследовательской активности, то есть типологической структурой выборок.
Тот факт, что среди самок преобладают особи с высокой и средней поведенческой активностью объясняется тем, что большая исследовательская активность самок даёт им преимущество в борьбе за выживание, воспитание детёнышей и сохранения вида в целом [2]. В значительной степени межполовые различия в поведении связаны с влиянием половых стероидов на центральные нейромедиаторные процессы и на дифференциацию мозга в раннем онтогенезе [3, 6, 9, 10].
Относительно локомоторной активности животных важно заметить, что её индивидуально-типологические особенности определяются типом нервной деятельности. Наши результаты согласуются с данными Е. Н. Чуян, О. И. Горной [8], которые выявили среди крыс особей с низкой, высокой и средней двигательной активностью, связав эти особенности поведения с профилем моторной асимметрии мозга.
Вместе с тем важно помнить, что носителем того или иного типа нервной деятельности является особь мужского либо женского пола. Если при исследовании вести отбор крыс только по типу поведенческой активности, то в группах с признаками низкой активности можно ожидать резкое доминирование самцов, а в группах с признаками высокой активности – доминирование самок.
Заключение. В тесте «открытое поле» ориентировочно-исследовательское поведение нелинейных крыс характеризуется высокой индивидуальной изменчивостью, границы которой у самцов и самок практически совпадают.
Определение типологических особенностей поведения крыс возможно проводить по параметрам двигательной и исследовательской активности, рассчитывая на их основе суммированный показатель основной активности.
Половые различия поведения крыс определяются частотой встречаемости среди самцов и самок особей с различными типами ориентировочно-исследовательской активности. Среди самцов преобладают особи с низкой и средней активностью, среди самок, наоборот – особи с высокой и средней активностью.
Среди крыс с низкой активностью доминируют самцы, среди крыс с высокой активностью – самки, и только в группе со средней активностью особи обоих полов встречаются в равных соотношениях. Это обстоятельство необходимо учитывать при проведении группировки крыс обоего пола по типу ориентировочно-исследовательской активности в тесте «открытое поле».
Рецензенты:
Котельников А. В., д.б.н., доцент кафедры гидробиологии и общей экологии, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет», г.Астрахань.
Семячкина-Глушковская О. В., д.б.н., профессор кафедры физиологии человека и животных ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный университет им. Н. Г. Чернышевского», г.Саратов.