Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

ДИНАМИКА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ И ЛАБОРАТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У БОЛЬНЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКОЙ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ ТЯЖЕСТИ

Анисимова Т.А. 1 Карзакова Л.М. 1
1 ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени И. Н. Ульянова», Чебоксары, Россия
Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) – острая хантавирусная инфекция, широко распространенная на территории РФ. Целью настоящего исследования явилось изучение изменения иммунологических и лабораторно-инструментальных показателей у больных ГЛПС при различных формах тяжести болезни. Для изучения параметров клеточного и гуморального иммунитета у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом (ГЛПС) при различных степенях тяжести заболевания проведено иммунологическое обследование 30 пациентов, находившихся на стационарном лечении в БУ «ГБСМП» г. Чебоксары в 2011–2012 гг. Выяснено, что у больных ГЛПС с тяжелым течением инфекции больше в процесс вовлекается Т-клеточное звено иммунитета (снижение содержания CD4+, повышение количества CD8+), выявляется значительное снижение фагоцитарной активности нейтрофилов, наблюдается высокая готовность клеток к активационному апоптозу.
хантавирус
олигоурический период
иммунопатогенез
Т-лимфоциты
1. Иванис В. А. Клинико-иммунологические особенности геморрагической лихорадки с почечным синдромом при тяжелом течении с благоприятным и летальным исходами в Приморском крае / В. А. Иванис, И. Г. Максема, В. И. Афанасьева, Р. А. Слонова // Тихоокеанский медицинский журнал. – 2010. – №3. – С. 46-50.
2. Информационный бюллетень об инфекционной заболеваемости в Чувашской Республике за 2000–2010 гг. / Управление федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучию человека по Чувашской республике – Чувашии. –Чебоксары, 2011.
3. Киселева Л. М. Особенности клинического течения хантавирусной инфекции в некоторых регионах Приволжского федерального округа / Л. М. Киселева, Ю. П. Грузинцева // Инфекционные болезни. – 2010. – Т.8. – Прил. №1. – Материалы ΙΙ Ежегодного Конгресса по инфекционным болезням. – С. 143-144.
4. Морозов В. Г. Сравнительная клинико-лабораторная характеристика геморрагической лихорадки с почечным синдромом, вызываемой хантавирусными типами Пуумула и Добрава / В. Г. Морозов, В. И. Рощупкин, Г. П. Слюсарева [и др.] // Новые технологии в диагностике и лечении инфекционных болезней: Мат. VII Рос. съезда инфекц. – Н.Новгород, 2006. – С. 167.
5. Мурзабаева Р. Т. Система интерферона и иммунный статус у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом: aвтореф. дис. … д-ра мед. наук / Р. Т. Мурзабаева. – М., 2003. – 47 с.
6. Нафеев А. А. Эпидемическое проявление геморрагической лихорадки с почечным синдромом в регионе с активными природным очагами /А. А. Нафеев // Дезинфекционное дело. – 2008. – №1. – С. 43-45.
7. Фазлыева Р. М. Современные аспекты патогенеза геморрагической лихорадки с почечным синдромом / Р. М. Фазлыева, Х. Х. Ганцева, Г. Х. Мирсаева, Г. К. Макеева // Успехи современного естествознания. – 2009. – .№7. – С. 97-99.
8. Шакирова В. Г. Клинико-иммунологические особенности геморрагической лихорадки с почечным синдромом: автореферат дисс… канд. мед. наук / В. Г. Шакирова. – СПб., 2010. – 24 с.
9. Rasmuson J., Pourazar J., Linderholm M., Sandström T., Blomberg A., Ahlm C. Presence of activated airway T lymphocytes in human puumala hantavirus disease // Chest. – 2011 Sep. – 140(3). – С. 715-722.
10. Terajima M., Ennis F. A. T-cells and pathogenesis of hantavirus cardiopulmonary syndrome and hemorrhagic fever with renal syndrome // Viruses. – 2011. – Jul,3(7). – 1059-73.
Введение

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) - тяжелое природно- очаговое вирусное заболевание, широко распространенное в различных регионах Российской Федерации (РФ). Несмотря на несомненные успехи в области лабораторных и клинических исследований ГЛПС, данная проблема остается актуальной для практического здравоохранения во многих странах мира [3, 5, 6]. ГЛПС занимает первое место среди зоонозных природно-очаговых заболеваний в РФ, причем эпидемическая ситуация  в настоящее время оценивается как крайне неблагоприятная. Наиболее активные очаги заболевания расположены между Волгой и Уралом в республиках Башкортостан, Удмуртия, Татарстан, Марий Эл, Мордовия, Чувашия, а также в Самарской, Пензенской, Оренбургской, Ульяновской областях [3, 5, 7].

На территории РФ заболевания ГЛПС регистрируются с 1935 г., ежегодно  выявляется от 6 до 20 тыс. случаев болезни, возбудителями которой являются хантавирусы - Пуумала, Хантаан, Добрава, Сеул, Амур [5, 6]. Всего за 2010 г. на территории РФ зарегистрировано 4572 случая ГЛПС (показатель заболеваемости на 100 тыс. населения составил 3,22), из них на территории Приволжского Федерального Округа выявлено 3 564 случая, что составляет 77,9 % всей [2].

ГЛПС характеризуется многообразием клинических проявлений с возможностью атипичного течения, не позволяющих своевременно поставить диагноз на ранних стадиях заболевания [1, 4]. Хантавирус, являясь инициатором инфекционного процесса, активирует каскад клеточно-опосредованных иммунных реакций [1, 9, 10]. Однако вопросы иммунопатогенеза освещены в литературе недостаточно. Не разработаны информативные иммунологические лабораторные показатели для оценки степени тяжести заболевания. Недостаточность исследования иммунологических механизмов при ГЛПС диктует необходимость проведения дополнительных исследований в этом направлении.

Целью настоящего исследования явилось изучение изменения иммунологических и лабораторно-инструментальных показателей у больных ГЛПС при различной степени тяжести болезни.

Материалы и методы исследования. Проведено иммунологическое обследование 30 больных (средний возраст 36, 85±2,89 лет), находившихся на стационарном лечении в инфекционном отделении БУ «Городская больница скорой медицинской помощи» (г. Чебоксары) в 2011-2012 гг. с диагнозом «ГЛПС». Исследование проводилось дважды - при поступлении в олигурическом периоде и в период полиурии через 10-14 дней с момента госпитализации. Среди обследованных - 24 мужчины (80 %) и 6 женщин (20 %). Заболевание протекало в легкой форме у 5 больных (16,7 %), в средне-тяжелой - у 19 (63,3 %), в тяжелой - у 6 (20,0 %). В контрольную группу вошли 30 практически здоровых человека (добровольные доноры), в анамнезе у которых не было указаний на перенесенный ГЛПС, средний возраст составил 34, 25±1,8 лет, мужчин 23 (76,7 %), женщин 7 (23,3 %).

Объектом исследования служила периферическая кровь (ПК). Проводили иммунофенотипирование мононуклеарных клеток (МНК) ПК методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD20, CD25, CD95 («Сорбент», Москва), определение концентрации сывороточных IgM, IgG, IgA по Манчини, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) методом осаждения полиэтиленгликолем (ПЭГ-6000), изучение фагоцитарной активности нейтрофилов в латекс-тесте согласно стандартным методикам [8].

Для анализа использованы традиционные показатели описательной статистики: средняя арифметическая М и стандартное отклонение (SD). При сравнении двух выборок для оценки достоверности различий применяли t-критерий Стьюдента (р), для сопряженных групп - парный тест Стьюдента. Различия между выборками считали  достоверными при p < 0,05.

Результаты исследования. Большой практический интерес представляет сравнение иммунологических показателей в двух группах больных - в группе с тяжелым течением заболевания и в группе с легким и средне-тяжелым течением (табл. 1).

Таблица 1 Сравнительное изучение показателей иммунного ответа у больных с различной степенью тяжести ГЛПС

Показатели

Легкое и среднетяжелое течение ГЛПС (n=24)

Тяжелое течение ГЛПС (n=6)

р

М±SD

М±SD

I

II

I

II

I

II

Лейкоциты, абс

8,5±3,4

7,2±2,3

11,7±2,7

9,0±2,6

0,0324

0,1525

Нейтрофилы, %

67,3±8,4

58,1±10,5**

72,0±10,5

66,6±15,5

0,2964

0,1812

Лимфоциты, %

21,8±8,6

36,9±9,9***

22,0±4,3

27,6±12,9

0,9689

0,1065

CD3+-лимфоциты, %

53,6±8,1

54,6±6,3

53,4±11,7

52,8±12,7

0,9727

0,6743

CD4 +-лимфоциты, %

31,9±6,7

27,9±7,8

31,2±10,0

46,0±26,6

0,8569

0,0249

CD8 +-лимфоциты, %

24,7±5,2

28,1±5,8*

26,6±2,1

23,6±5,0

0,4275

0,1397

CD4+/CD8+

1,3±0,4

1,1±0,2*

1,2±0,3

1,4±0,1

0,3600

0,0103

IgА , г/л

3,7±2,7

2,4±1,0*

3,2±0,8

2,4±0,9

0,7390

0,9710

Фагоцитарное число

3,5±0,5

3,5±0,6

3,0±0,3

3,0±1,0

0,0082

0,1475

CD25+-лимфоциты, %

5,8±1,6

11,8±3,6***

4,6±0,9

13,6±4,4**

0,1204

0,3744

CD95+-лимфоциты, %

20,16,4

20,3±5,1

24,4±4,8

28,6±8,4

0,1753

0,0477

CD95+-лимфоциты, абс.

0,4±0,2

0,5±0,2

0,5±0,06

0,4±0,03**

0,0436

0,0394

Примечания: I - значение показателя в олигоурическом периоде, II - значение показателя полиурическом периоде, р - достоверность различия между показателями групп больных с различной степенью тяжести ГЛПС, * - достоверность  различия показателей олигурического и полиурического периодов (р)  ˂ 0,05, ** - р ˂ 0,01, *** - р ˂ 0,001.

Большинство исходных значений изучаемых параметров, определенных в олигоурической стадии, не различались, за исключением  содержания в крови лейкоцитов, абсолютного числа нейтрофилов, фагоцитарного числа и абсолютного числа клеток с готовностью к активационному апоптозу (несущих Fas-рецептор апоптоза). При тяжелом течении инфекции содержание лейкоцитов, нейтрофилов, абсолютного числа клеток с рецептором апоптоза  было существенно больше, а фагоцитарное число меньше, по сравнению с группой больных с нетяжелым течением.  В процессе развития и смены периодов заболевания  в обеих группах происходило увеличение относительного и абсолютного числа CD25+-клеток. Кроме этого в группе с нетяжелым течением заболевания уменьшалось процентное и абсолютное число нейтрофилов, увеличивалось относительное содержание лимфоцитов и абсолютное число Т-лимфоцитов за счет цитотоксических Т-лимфоцитов, снижался уровень IgA. Особенностью группы с тяжелым течением явилась статистически значимая динамика абсолютного числа клеток с экспрессией Fas-рецептора в сторону уменьшения в полиурическом периоде.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что в динамике в процессе смены фаз заболевания в группе с нетяжелым течением процесса происходило изменение показателей клеточного механизма адаптивного иммунитета в сторону восстановления исходно сниженных показателей, а также снижение активации гуморальной составляющей адаптивного иммунного ответа, в то время как в группе с тяжелым течением заболевания все эти показатели оставались на уровнях, характерных для олигоурической стадии.  В результате различной  динамики изучаемых показателей в группах  появлялись новые различия  в значениях показателей полиурической стадии. В частности, у больных с тяжелым течением заболевания превышали соответствующие показатели в сравниваемой группе относительное  количество  хелперных клеток с фенотипом CD4 и  иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+. Напротив, абсолютное содержание  CD 95+-лимфоцитов  было меньше, чем в группе с нетяжелым течением.

Другие лабораторные показатели, имевшие  статистически значимые различия в зависимости от тяжести течения заболевания, сведены в табл. 2, из которой видно, что больные с тяжелым течением заболевания имели исходно повышенные значения  уровней  сегментоядерных нейтрофилов, креатинина и мочевины в ПК. В группе с нетяжелым течением инфекции в процессе смены олигоурического периода полиурическим происходило уменьшение числа сегментоядерных нейтрофилов, снижение уровней белка в моче, а также креатинина и мочевины в сыворотке крови. У больных с тяжелым течением заболевания  установлено динамическое изменение лишь в концентрации мочевины, снижавшейся в процессе смены фаз заболевания. В результате описанных сдвигов в значениях лабораторных показателей,  в полиурической стадии становился шире круг различий в группах с различной степенью тяжести заболевания. Так, у больных с тяжелой степенью ГЛПС оказались выше значения содержания сегментоядерных нейтрофилов, креатинина и мочевины в крови, а также белка в моче.  

Таблица 2 Статистически значимые различия  в лабораторных  показателях крови и мочи у больных с различной степенью тяжести ГЛПС

Показатели

Легкое и среднетяжелое течение ГЛПС(n=24)

Тяжелое течение ГЛПС(n=6)

p

М ± SD

М ± SD

Сегментоядерные нейтрофилы в крови, %

I

58,8 ± 6,0

62,2 ± 1,92

0,0324

II

52,4 ± 8,5**

64,0 ± 5,1

0,0018

Белок в моче, г/л 

I

0,3 ± 0,3

0,57 ± 1

0,3594

II

0,0 ± 0,0**

0,2 ± 0,2

0,0061

Креатинин в крови, мкмоль/л

I

140,1 ± 56,8

372,6 ± 278,5

0,0017

II

103,6 ± 28,1*

160,0 ± 108,5

0,0053

Мочевина в крови, ммоль/л

I

9,4 ± 3,6

20,9 ± 7,2

0,0000

II

7,3 ± 2,2*

11,5 ± 5,1*

0,0110

Примечания:  I - значение показателя в олигоурическом периоде, II - значение показателя в полиурическом периоде, * - достоверность различия показателей олигурического и полиурического периодов (р)  ˂ 0,05, ** - р ˂ 0,01, *** - р ˂ 0,001.

Определенный интерес представляет изучение размеров почек, определенных при ультразвуковом исследовании (таб. 3). У больных с тяжелым течением заболевания были достоверно меньше показатели поперечного размера как правой, так и левой почки.

Таблица 3 Сравнительное изучение показателей ультразвукового исследования почек у больных с различной степенью тяжести ГЛПС в олигоурической стадии

Показатели

Легкое и среднетяжелое течение ГЛПС(n=24)

Тяжелое течение ГЛПС(n=6)

p

М±SD

М±SD

Толщина паренхимы, мм

21,3±4,6

24,4±3,8

0,1895

Длина правой почки, мм

115,9±35,5

89,8±61,4

0,2931

Поперечный размер правой  почки, мм

61,6±3,9

56,0±1,0

0,0321

Длина левой почки, мм

129,7±7,7

123,3±12,2

0,2614

Поперечный размер левой  почки, мм

63,1±2,6

48,7±23,6

0,0290

Обсуждение полученных результатов. Проведенные исследования функционального состояния иммунной системы позволяют сделать выводы о взаимосвязи между иммунологическими показателями и тяжестью инфекционного процесса. В ходе исследования выявлены иммунологические и лабораторные особенности тяжелого течения ГЛПС: значительное повышение, по сравнению с группой больных с нетяжелым течением ГЛПС, содержания   лейкоцитов, нейтрофилов в крови, при одинаково сниженных показателях CD4+, CD3+ - повышение уровня CD8 в олигоанурическом периоде, что подтверждается многими исследованиями [1, 8]. В процессе смен периодов при развитии полиурии тяжелое течение инфекции сопровождалось достоверным повышением показателей хелперных клеток с фенотипом CD4+ и  иммунорегуляторного индекса CD4+/CD8+, а абсолютное содержание  CD 95+-лимфоцитов  было меньше, чем в группе с нетяжелым течением.

В то же время ряд исследователей выявляет снижение всех исследуемых субпопуляций лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+, CD72+), причем наиболее выражены эти изменения в разгар заболевания и корреллируют с тяжестью течения, с тенденцией к восстановлению в период реконвалесценции [5]. Вероятно, отличия  в результатах исследований могут быть связаны с особенностями  течения ГЛПС, вызываемой различными серотипами вируса (Пуумала, Хантаан, Добрава, Сеул, Амур) [1, 3, 6] .

Выводы

  1. ГЛПС представляет собой иммуноопосредованную вирусную инфекцию.
  2. Тяжелое течение инфекции в олигурическом периоде сопровождается повышением содержания в крови лейкоцитов, нейтрофилов, абсолютного числа CD95+ - клеток и снижением фагоцитарного числа; в полиурическом периоде наблюдаются более высокие показатели CD4+ и  иммунорегуляторного индекса CD4+/CD8+, более выраженное снижение  абсолютного содержания  CD 95+-лимфоцитов по сравнению с группой с нетяжелым течением.
  3. Перестройка иммунной системы у больных в олигоанурическом периоде ГЛПС включает количественно-функциональную депрессию клеточного механизма адаптивного иммунитета, снижение фагоцитарной активности нейтрофилов и активацию гуморального звена иммунного ответа.
  4. Изменения в иммунном статусе, происходящие при смене олигурического периода  полиурическим, касаются преимущественно адаптивного иммунного ответа: активации клеточного механизма на фоне снижения активности гуморального звена.
  5. Особенностями иммунного статуса больных с тяжелым течением ГЛПС являются снижение фагоцитарной активности нейтрофилов и высокая готовность клеток к активационному апоптозу.

Рецензенты:

  • Марков Дмитрий Сергеевич, д.м.н., профессор, декан медицинского факультета, зав. кафедрой факультетской терапии медицинского факультета ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университете имени И. Н. Ульянова», г. Чебоксары.
  • Хаертынова Ильсияр Мансуровна,  д.м.н., профессор, зав. кафедрой инфекционных болезней Казанской государственной медицинской академии, г. Казань.

Библиографическая ссылка

Анисимова Т.А., Карзакова Л.М. ДИНАМИКА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ И ЛАБОРАТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У БОЛЬНЫХ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКОЙ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ ТЯЖЕСТИ // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 4. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=6857 (дата обращения: 25.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074