Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

СОСТОЯНИЕ ФЕРРОКИНЕТИКИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПИЕЛОНЕФРИТЕ НА ФОНЕ БАКТЕРИУРИИ

Приходько М.А. 1 Гладилин Г.П. 1 Сенотова М.В. 2
1 ГБОУ ВПО «Саратовский Государственный медицинский университет им. В.И.Разумовского» Минздравсоцразвития России
2 НУЗ "Дорожная клиническая больница на ст.Саратов2 ОАО "РЖД"
Целью настоящего исследования явилось изучение микробиологического пейзажа мочи у больных хроническим пиелонефритом без нарушения функции почек и определение показателей эритропоэза, иммуногенеза и обмена железа на фоне бактериурии различной степени. Обследовано 139 пациентов с хроническим пиелонефритом. В 73,4% (102) случаев из мочи выделены микроорганизмы. На фоне бактериурии отмечалось достоверно значимое повышение (р<0,05, р<0,01) уровня цитокинов, гепсидина, ферритина, снижение (р<0,05, р<0,01) железа сыворотки и гемоглобина в сравнении с группой пациентов без бактериурии (статистическую значимость различий оценивали при помощи U-критерия Манна-Уитни). Таким образом, при хроническом пиелонефрите, в ответ на внедрение бактериальных агентов, создаются условия для развития анемии.
хронический пиелонефрит
бактериурия
цитокины
гепсидин
1. Авдеева М. Г. Молекулярные механизмы развития инфекционного процесса / М. Г. Авдеева, В. В. Лебедев, М. Г. Шубич // Клиническая лабораторная диагностика. - 2007. - №4. - С. 15-21.
2. Гмурман В. Е. Теория вероятностей и математическая статистика: Учебное пособие для вузов. - 9-е изд. - М.: Высшая школа, 2003. - 479 с.
3. Демихов В. Г. Роль гепсидина в патогенезе анемии хронических заболеваний / В. Г. Демихов, Е. Ф. Морщакова, А. Д. Павлов // Гематология и трансфузиология. - 2006. - Т. 51. № 5. - С. 31-34.
4. Истомина А. С. Инфекция мочевыводящих путей - современный взгляд на проблему / А. С. Истомина, Т. В. Жданова, А. В. Назаров // Уральский медицинский журнал. - 2008. - Т. 54. - №14. - С. 50-54.
5. Кунцевич Н. В. Гепсидин - гормон, регулирующий обмен железа / Н. В. Кунцевич, О. П. Шевченко // Лаборатория. - 2010. - № 3. - С. 8-10.
6. Маянский Н. А. Гепцидин: основной регулятор обмена железа и новый диагностический маркер / Н. А. Маянский, Е. Л. Семикина // Вопр. диагностики в педиатрии. - 2009. - Т. 1. - № 1. - С. 18-23.
7. Нуртдинова Г. М. Уровни провоспалительных цитокинов у больных хроническим пиелонефритом и их изменения при комплексной терапии с применением иммуномодулятора - ликопида : дис. ... канд. мед. наук : 14.00.05, 14.00.36 / Гузель Масхутовна Нуртдинова; Башкирский государственный медицинский университет. - Уфа, 2003. - 123 с.: ил. - Библиогр.: С.97-123 (251 назв.).
8. Сарычева Т. Г. Эритрон и почечная патология / Т. Г. Сарычева, Г. И. Козинец // Клиническая лабораторная диагностика. - 2001. - № 6. - С. 20-23.
9. Характеристика бактериурии у больных с инфекцией мочевыводящих путей, жителей различных регионов / Ю.В. Корочкина [и др.]. // Уральский медицинский журнал. - 2008. - Т.54. - №14. - С. 47-49.
10. Цветаева Н.В. Основы регуляции обмена железа / Н. В. Цветаева, А. А. Левина, Ю. И. Мамукова // Клиническая онкогематология. Фундаментальные исслед. и клиническая практика. - 2010. - Т. 3. - № 3. - С. 278-283.
Введение

На фоне неспецифического инфекционно-воспалительного процесса происходит накопление бактериальных липополисахаридов (ЛПС), цитокинов и свободных радикалов, оказывающих как прямое, так и опосредованное воздействие на  гомеостаз железа, процессы эритропоэза и продукцию эритропоэтина, создавая тем самым условия для развития  анемии хронических заболеваний [3].

Гепсидин - гормоноподобный пептид, регулирующий обмен железа, впервые был обнаружен и описан в 2001 году как антибактериальный пептид, способный повреждать мембрану бактерий. Впоследствии установлено, что гепсидин, являясь отрицательным регулятором абсорбции железа в кишечнике и его мобилизации из депо, оказывает тем самым основной биологический эффект, направленный на снижение железа в циркуляции [10]. Один из механизмов, приводящий к увеличению синтеза гепсидина и не зависящий от концентрации железа и активности эритропоэза, связан с воспалением и инфекцией. Бактериальные ЛПС и цитокины, воздействуя на синтез гепсидина, создают условия для перераспределения железа из циркуляции в депо и ограничения его доступности для микроорганизмов [5].

Пиелонефрит - неспецифический инфекционно-воспалительный процесс в тубулоинтестициальной зоне и чашечно-лоханочной системе почки. В этиологической структуре заболевания преобладают грамотрицательные бактерии семейства Enterobacteriaciae, имеющие общую структурную мембранную единицу в виде ЛПС, являющихся мощным активатором синтеза провоспалительных цитокинов [7]. Грамположительные микроорганизмы также имеют биологически активные молекулы клеточной стенки в виде  пептидогликана, липотейхоевой кислоты, липопептидов, инициирующих воспалительный ответ и выработку цитокинов макрофагами [1]. Пиелонефрит сопровождается выраженными нарушениями цитокиновой сети и всех звеньев клеточного и гуморального иммунитета, что рассматривается как одно из условий персистенции бактерий и хронизации заболевания [7]. При этом цитокиновая активация синтеза гепсидина и накопление железа в энтероцитах, макрофагах и гепатоцитах при бактериальных инфекциях может привести к  развитию анемии [5]. Хронизация воспаления, в свою очередь, способствует  формированию и закреплению порочного круга дизрегуляции обмена железа и утяжелению анемии [6]. Изучение метаболизма железа при хроническом пиелонефрите (ХрПН) с использованием современных лабораторных тестов представляет особый интерес, поскольку анемия при этом заболевании может развиться на фоне достаточной функции почек и свидетельствовать о тяжести процесса [8].

 Цель работы

Оценка микробиологического пейзажа мочи у больных ХрПН и изменений показателей иммуногенеза и обмена железа при бактериурии.

Материалы и методы

Нами обследовано 139 больных ХрПН, с длительностью заболевания от 1 года до 5 лет,  без нарушения функции почек, в возрасте от 20 до 45 лет, средний возраст составил 34,4(5,1) года. Из них 78 пациентов (56,1 %) находились в фазе активного воспаления, 61 (43,9 %) - в фазе ремиссии. Основная масса пациентов была представлена женщинами - 104 человека (74,8 %), мужчин - 35 (25,2 %).

Обследование пациентов в фазе обострения заболевания проводилось в стационаре НУЗ «Дорожная клиническая больница на станции Саратов-2 ОАО «РЖД», в фазе ремиссии - в условиях поликлиники № 1 указанного лечебного  учреждения, при посещении пациентами врача-терапевта с целью диспансерного наблюдения.

Критериями исключения явились: уролитиаз, ХПН, сахарный диабет, обострение сопутствующих хронических заболеваний внутренних органов, злокачественные новообразования, беременность.

Диагноз ХрПН, фаза заболевания, локализация,  активность воспалительного процесса, функциональное состояние почек были верифицированы клиницистами, в соответствии с классификацией  Н. А. Лопаткина,  на основании общепринятых методов клинического обследования, включающие в себя анализ жалоб и анамнестических данных, проведение физикального, клинико-лабораторного и инструментальных (ультразвукового и рентгенологического) обследований.

Всем пациентам проведен комплекс специальных лабораторных исследований, направленный на оценку состояния эритропоэза - общий анализ крови; иммуногенеза - ИЛ-6, α-ФНО; феррокинетики - сывороточное железо (СЖ), ОЖСС, НТЖ, гепсидин (Гп). Бактериологическое исследование мочи и количественное определение степени бактериурии (числа микробных клеток в 1 мл мочи - КОЭ/мл) проводилось методом посева серийных разведений мочи на плотные питательные среды (5 % кровяной агар и агар хромогенный для уропатогенных бактерий, производства «Conda», Испания) в чашках Петри.

Общий анализ крови выполняли при помощи гематологического автоматического анализатора марки KX-21N (SYSMEX, Япония). Динамика биохимических показателей оценивалась с помощью программируемого фотометра марки CLIMA МС-15 (PALL, Испания), с использованием специальных наборов реагентов. Иммуноферментный анализ (ИФА) проводили на автоматическом иммуноферментном анализаторе марки Alisei Q.S. (SEAC, Италия), с использованием тест-систем производства ООО «Компания АлкорБио», г. Санкт-Петербург и ЗАО «Вектор-Бест», г. Новосибирск. Для определения гепсидина в сыворотке крови использовали специальный набор без экстракции (Hepsidin-25 human), разработанный группой компаний «BCM», США, Cat. No. S-1337, для анализа образцов человеческой или крысиной сыворотки.

Статистическую обработку данных осуществляли на персональном компьютере с использованием программы Statistika 6.0. Проводилось предварительное тестирование количественных данных на нормальность распределения с помощью критериев Колмогорова - Смирнова, ассиметрии и эксцесса. Ассиметрично распределенные вариационные ряды описывали при помощи медианы (Ме) и интерквартильной широты (интервал значений между 25-м и 75-м процентилем распределения).  При анализе непрерывных данных двух независимых выборок использовался  непараметрический U-критерий Манна - Уитни [2]. Различие считалось достоверным при двустороннем уровне значимости р<0,05, р<0,01.

Результаты и обсуждения

 Среди обследованных больных ХрПН бактериурия отмечалась у 73,4 % (102/139). В 26,6 % (37/139) случаев посев мочи роста не дал. В период обострения заболевания бактериурия наблюдалась у 82,1 % (64/78) больных, в 17,9 % (14/78) случаев возбудитель ИМП обнаружен не был. В период ремиссии - микроорганизмы были выделены из мочи в 62,3 % (38/61) случаев, у 37,7 % (23/61) пациентов моча оставалась стерильной.

 Из мочи от 102 пациентов выделены 116 штаммов различных микроорганизмов, причем в 86,3 % (88/102) случаев высевался один возбудитель, в 13,7 % (14/102) наблюдались микробные ассоциации. С большей частотой регистрировалось сочетание E.coli и Enterococcus spp. - 43 % (6/14).

 Основную долю среди выделенных микроорганизмов занимали грамотрицательные бактерии - 59,5 % (69/116), из них в основном E. Coli - 74 % (51/69), что подтверждает этиологическую значимость кишечной палочки для ИМП. Proteus mirabilis высевался в 10,3 % (12/116) случаев, и незначительная часть грамотрицательных бактерий была представлена Enterobacter spp. и Ps.aeruginosae - по 2,6 % (3/116) соответственно. Грампозитивная флора высевалась в 37 % (43/116) случаев, в том числе Enterococcus spp. 19 % (22/116), St. epiderm. 8,6 % (10/116), St.aureus 4,3(5/116), Streptococcus spp. 4,3 % (5/116), Corynebacterium spp. 0,9 % (1/116), что соответствует современным данным об увеличении роли грампозитивной микрофлоры в генезе ИМП [9]. В 3,5 % (4/116) случаев микрофлора мочи была  представлена грибами рода Candida, что также не противоречит данным аналогичных исследований и указывает на рост грибковых инфекций мочевыводящих путей [4].

Таким образом, микрофлора, выделенная нами в результате микробиологического исследования мочи больных ХрПН, отличается достаточным разнообразием аэробных бактерий и во многом согласуется с данными результатов подобных исследований [9].

По результатам определения степени бактериурии больные были распределены на пять групп. Первая группа 26,6 % (37/139) - это пациенты, у которых в моче не наблюдалось роста микрофлоры (контрольная группа). Вторая 20,7 % (29/139) - c бактериурией 103 КОЭ/мл, третья 15.8 % (22/139) - с 104 КОЭ/мл,  четвертая 18,7 % (26/139)  - с 105 КОЭ/мл, пятая 18,2 % (25/139) - с 106 КОЭ/мл.

Всем пациентам выполнены специальные исследования и определены статистически значимые различия показателей для каждой группы с бактериурией, в сравнении с группой пациентов без бактериурии.

Характер распределения, полученных нами данных, явился определяющим фактором при выборе и использовании вида средней и показателя разброса.

В таблице 1 приведены результаты специальных исследований, выполненных для 139 больных ХрПН.

Таблица 1. Показатели эритропоэза, иммуногенеза и феррокинетики у больных ХрПН на фоне бактериурии различной степени, Ме (25-й;75-й процентили)

Показатель

Роста нет

(контрольная группа)

(n=37)

Бактериурия

103 КОЭ/мл

(n=29)

Бактериурия

104 КОЭ/мл

(n=22)

Бактериурия

105 КОЭ/мл

(n=26)

Бактериурия

106 КОЭ/мл

(n=25)

HGB, г/л

133 (127;144)

130 (121;137)  ⃰  

126 (118;139)  ⃰  

125 (115;139)  ⃰  

123 (113;136) ⃰  

WBC, х109

6,0 (5,5;7,2)

6,9 (5,6;8,9)  ⃰  

7,1 (5,2;8,9) ⃰  

7,6 (5,6;8,5)  ⃰  

8,7 (8,0;9,7)  ⃰     

СЖ, мкмоль/л

18,6(15,2;20,2)

12,4 (10,8;14,6) ⃰  ⃰   

11,5 (8,8;15,1)  ⃰  ⃰   

10,2 (8,9;13,2) ⃰  ⃰   

9,9 (7,7;16,2) ⃰  ⃰   

ОЖСС,

мкмоль/л

56,2 (47,7;61,2)

49,7.(42,3;55,1)  ⃰  ⃰  

47,1(36,2;52,3) ⃰  ⃰  

47,4 (42,3;52,1) ⃰  ⃰   

47,5 (39,9;56,2) ⃰  ⃰  

НТЖ, %

32,4 (28,9;36,5)

24,6 (22,6;30,1)  ⃰  ⃰   

26,3 (22,8;33,3) ⃰  ⃰  

21,8 (19,3;31,0) ⃰  ⃰   

24,3 (17,7;29,3) ⃰  ⃰    

ИЛ-6, пг/мл

  5,3 (2,5;8,1) 

9,9 (5,6;42,3) ⃰

19,2 (5,2;80,9) ⃰  ⃰ 

23,7 (5,5;114,2) ⃰  ⃰  

24,7(5,8;110,2) ⃰  ⃰  

α-ФНО,пг/мл

5,6 (3,1;12,2)

8,9 (5,7;20,8) ⃰  

13,6 (6,8;86,9) ⃰  ⃰

29,8 (5,8;119,5) ⃰  ⃰  

48,2 (6,8;122) ⃰  ⃰  

Гп,пг/мл

190 (120;245)

280 (232;482) ⃰

364 (200;460) ⃰  ⃰  

389 (260;500) ⃰  ⃰  

412 (245;480) ⃰  ⃰  

Примечание - уровень значимости - ⃰  p<0,05, ⃰  ⃰  p<0,01 по сравнению с контрольной группой, двусторонний непараметрический U-критерий Манна - Уитни.

ИЛ-6 и α-ФНО являются главными провоспалительными цитокинами, которые продуцируются в ответ на бактериальную инфекцию [7]. У больных ХрПН на фоне микробной колонизации почечной ткани и выраженного воспалительного процесса (повышенное количество лейкоцитов, p<0,05)  наблюдается достоверно значимое повышение указанных цитокинов (p<0,05, p<0,01) по сравнению с группой пациентов, не имеющих бактериурию.

Уровень гепсидина изменяется параллельно колебаниям значений цитокинов - достоверно увеличивается (p<0,05, p<0,01) у больных с бактериурией, достигая максимальных значений в группе пациентов с бактериурией 105 - 106 КОЭ/мл. Гепсидин, как отрицательный регулятор обмена железа, увеличиваясь, приводит к уменьшению всасывания железа в кишечнике и, следовательно, способствует снижению концентрации гемоглобина [5]. У пациентов на фоне бактериурии различной степени отмечается достоверное снижение (p<0,05, p<0,01) биохимических маркеров феррокинетики - СЖ, ОЖСС, НТЖ и гемоглобина в сравнении с контрольной группой пациентов без бактериурии.

Выводы

Таким образом, обнаруженные нами изменения в уровне основных провоспалительных цитокинов, гепсидина, сывороточного железа и гемоглобина у больных ХрПН с сохраненной функцией почек свидетельствуют о нарушении регуляции иммуногенеза, гемопоэза и феррокинетики в ответ на внедрение бактериальных патогенов.

Рецензенты:

  • Пучиньян Д. М., д.м.н., профессор, заместитель директора по науке ФГУ «Саратовский НИИ травматологии и ортопедии» Минздравсоцразвития РФ, г. Саратов.
  • Луцевич И. Н., д.м.н., профессор, зав.кафедрой гигиены медико-профилактического факультета «Саратовского ГМУ им. В. И. Разумовского» Минздравсоцразвития РФ, г. Саратов.

Библиографическая ссылка

Приходько М.А., Гладилин Г.П., Сенотова М.В. СОСТОЯНИЕ ФЕРРОКИНЕТИКИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ПИЕЛОНЕФРИТЕ НА ФОНЕ БАКТЕРИУРИИ // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 4. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=6616 (дата обращения: 25.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074