Цель исследования
Изучить действие комбинированных антимикробных рецептур на полирезистентные бактерии и грибы in vitro.
Материал и методы исследования
В исследованиях использовали коллекцию полирезистентных клинических изолятов, хранившихся в лаборатории кафедры общей и военной эпидемиологии ГОУ ВПО «Самарский военно-медицинский институт МО РФ». Оценка размеров зон подавления роста различных условно-патогенных бактерий и грибов комбинированными антимикробными рецептурами определялась диско-диффузионным методом, руководствуясь общепринятыми методиками [3; 4], инструкциями производителей бумажных дисков. В качестве основы питательной среды применяли МПА, в состав которого вводили 0,00125% бриллиантового зеленого, либо 0,0025% метиленового синего (фуксина основного). После инокуляции поверхности агара на него накладывали бумажные диски, содержащие по 20 мг различных антимикробных препаратов (антибиотиков, фурагина и ципрофлоксацина). В контроле (с тем же инокулятом) питательная среда не содержала анилинового красителя. Культивирование проводили в течение одних суток. Статистическая обработка результатов исследований проводилась по методике В.И. Юнкерова [6].
Результаты исследования и их обсуждение
При испытании способа преодоления лекарственной устойчивости в отношении коринебактерий (таблица 1) установлено, что зоны подавления роста комбинациями антимикробных препаратов с анилиновыми красителями многократно превышали таковые в контроле. Отличия в долях подавляемых штаммов одним и тем же химиопрепаратом при сочетании с разными анилиновыми красителями оказались статистически недостоверными (р > 0,05). Та же закономерность выявлена при сравнении долей штаммов коринебактерий, рост которых ингибировался сочетанием одного и того же красителя с различными химиопрепаратами. Это свидетельствует об универсальности разработанного способа преодоления лекарственной устойчивости микробов. Несмотря на отсутствие статистически значимых отличий, наиболее эффективными оказались комбинации антимикробных препаратов с метиленовым синим (подавлялся рост 70-100% резистентных штаммов); в меньшей степени - с фуксином (подавлялся рост только 60-83% из них). У антибиотиков комбинирование эритромицина с метиленовым синим и бриллиантовым зеленым приводило к подавлению роста 100% исследованных штаммов коринебактерий, с гентамицином - 90%, а с доксициклином и ципрофлоксацином - всего 70 и 77-85% соответственно.
Таблица 1 - Активность комбинаций антимикробных препаратов с анилиновыми красителями в отношении Corynebacterium spp.
Антимикробный препарат |
n |
Результаты |
|||
контроль (без красителя) |
фуксин |
бриллианто-вый зеленый |
метилено-вый синий |
||
Левомицетин |
12 |
7,4±3,0 |
23,2±2,9 83 |
24,0±2,2 92 |
20,9±2,7 75 |
Эритромицин |
10 |
1,5±2,3 |
23,7±5,0 80 |
29,4±5,7 100 |
24,0±4,2 100 |
Доксициклин |
10 |
2,3±3,5 |
18,7±7,1 60 |
21,3±5,3 70 |
21,5±5,0 70 |
Гентамицин |
10 |
7,7±3,8 |
22,0 ±7,8 80 |
24,0±4,5 90 |
21,2 ±3,2 90 |
Ципрофлоксацин |
13 |
4,4±3,8 |
21,3±6,3 62 |
29,6±6,0 85 |
24,1±3,3 77 |
Фурагин |
14 |
6,1±3,8 |
31,4±7,7 70 |
27,5±4,4 86 |
27,0±5,0 87 |
Примечания.
|
Подобные данные получены при сравнительном анализе подавления роста золотистого и эпидермального стафилококков (таблицы 2 и 3).
Таблица 2 - Активность комбинаций антимикробных препаратов с анилиновыми красителями в отношении Staphylococcus aureus
Антимикробный препарат |
n |
Результаты |
|||
контроль (без красителя) |
фуксин |
бриллиантовый зеленый |
метиленовый синий |
||
Эритромицин |
13 |
2,1±2,5 |
33,8±8,6 67 |
25,9±2,9 92 |
22,2±1,5 92 |
Доксициклин |
14 |
3,0±2,9 |
37,3±16,3 57 |
25,5±3,6 86 |
19,5±2,1 86 |
Гентамицин |
14 |
4,2±3,0 |
28,1±6,2 67 |
24,3±2,2 93 |
21,4±1,6 93 |
Цефазолин |
8 |
8,4±6,0 |
28,0±4,6 88 |
24,6±2,8 88 |
21,1±2,7 88 |
Ципрофлоксацин |
13 |
5,0±3,5 |
30,2±8,3 62 |
29,0±4,4 85 |
22,3±2,2 69 |
Фурагин |
11 |
7,2±3,8 |
25,9±6,3 64 |
24,4±2,6 82 |
22,2±1,7 82 |
Примечания.
|
Таблица 3 - Активность комбинаций антимикробных препаратов с анилиновыми красителями в отношении Staphylococcus epidermidis
Антимикробный препарат |
n |
Результаты |
|||
контроль (без красителя) |
фуксин |
бриллиантовый зеленый |
метиленовый синий |
||
Левомицетин |
10 |
5,6±4,4 |
20,5±5,4 60 |
24,1±4,7 90 |
22,9±3,2 80 |
Эритромицин |
12 |
4,5±3,6 |
29,6±10,3 67 |
31,8±9,9 67 |
26,5±5,9 67 |
Доксициклин |
11 |
4,3±4,0 |
20,8±6,3 55 |
33,6±11,1 73 |
25,0±6,2 73 |
Гентамицин |
10 |
3,9±3,7 |
17,5±3,3 40 |
24,1±4,8 70 |
26,5±5,9 70 |
Цефазолин |
10 |
6,7±4,2 |
26,6±4,8 70 |
30,9±8,9 70 |
21,3±3,0 70 |
Ципрофлоксацин |
12 |
5,3±3,6 |
28,4±5,3 67 |
28,3±6,4 83 |
27,6±3,9 92 |
Фурагин |
11 |
5,0±3,9 |
20,7±3,2 82 |
32,8±6,7 73 |
28,3±3,6 73 |
Примечания.
|
Оценка эффективности способа преодоления лекарственной устойчивости применительно к энтеробактериям (клебсиелле, энтеробактерам) каких-либо закономерностей и тенденций при сравнении активности различных красителей установить не позволила (таблицы 4 и 5).
Таблица 4 - Активность комбинаций антимикробных препаратов с анилиновыми красителями в отношении Klebsiella pneumoniae
Антимикробный препарат |
n |
Результаты |
|||
контроль (без красителя) |
фуксин |
бриллиантовый зеленый |
метиленовый синий |
||
Доксициклин |
10 |
3,8±3,5 |
21,8±5,1 50 |
22,0±3,6 60 |
22,3±3,6 60 |
Цефазолин |
10 |
5,4±4,1 |
16,7±3,8 30 |
32,2±15,3 60 |
22,0±4,3 40 |
Ципрофлоксацин |
8 |
5,5±5,0 |
16,7±5,2 25 |
24,0±5,0 62 |
21,0±6,6 50 |
Фурагин |
9 |
6,6±4,8 |
20,0±4,5 44 |
22,6±6,0 56 |
22,0±5,2 56 |
Примечания.
|
Таблица 5 - Результаты оценки активности комбинаций антимикробных препаратов с анилиновыми красителями в отношении Enterobacter spp.
Антимикробный препарат |
n |
Результаты |
|||
контроль (без красителя) |
фуксин |
бриллиантовый зеленый |
метиленовый синий |
||
Доксициклин |
10 |
3,6±3,4 |
22,0±4,6 50 |
25,8±3,2 50 |
19,0±3,9 50 |
Гентамицин |
8 |
6,3±4,5 |
23, 24 25 |
21,0±4,3 50 |
19,8±3,5 50 |
Фурагин |
10 |
6,8±4,3 |
19, 24 20 |
22,8±2,7 40 |
22,0±4,7 40 |
Примечания.
|
Наиболее высокая эффективность достигнута в преодолении лекарственной устойчивости к доксициклину (50-60%), ципрофлоксацину (50-62%) с метиленовым синим и бриллиантовым зеленым.
При анализе результатов проведенных исследований обращала на себя внимание значительно более низкая эффективность преодоления лекарственной устойчивости грамотрицательных бактерий по сравнению с грамположительными. Эффективность преодоления резистентности к химиопрепаратам у грамположительных бактерий (коринебактерий и стафилококков) достоверно превышала таковую у грамотрицательных (клебсиеллы и энтеробактеров). Полученные нами данные соответствуют сведениям И.М. Романенко с соавт. [5] о том, что анилиновые красители действуют преимущественно на грамположительные микроорганизмы.
Применение метиленового синего и бриллиантового зеленого позволяло преодолеть резистентность к итраконазолу, кетоконазолу и флуконазолу у всех устойчивых к ним клинических изолятов Candida albicans, хранившихся в нашей коллекции (таблица 6).
Таблица 6 - Активность комбинаций антимикробных препаратов с анилиновыми красителями в отношении грибов Candida albicans
Антимикробный препарат |
n |
Результаты |
||
контроль (без красителя) |
метиленовый синий |
бриллиантовый зеленый |
||
Итраконазол |
6 |
7,7±6,4 |
21,3±5,0 100 |
22,3±2,9 100 |
Флуконазол |
11 |
4,9±3,8 |
21,5±2,6 100 |
22,2±2,2 100 |
Кетоконазол |
7 |
6,7±5,8 |
21,7±4,6 100 |
21,7±3,6 100 |
Примечания.
|
Выводы
Таким образом, получаемые результаты показали универсальность предлагаемого способа преодоления лекарственной устойчивости: эффективность комбинированных препаратов существенным образом не зависит от используемого антимикробного средства и красителя. Эффективность разработанного способа преодоления лекарственной устойчивости микробов для комбинаций антимикробных препаратов с бриллиантовым зеленым и метиленовым синим в отношении стафилококков и коринебактерий составила 67-100%, энтеробактерий - 40-62%, грибов Candida albicans - 100%.
Рецензенты:
- Кулагин О.Л., д.м.н., профессор, профессор кафедры фармакологии ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Минздрава», г. Самара.
- Жестков А.В., д.м.н., профессор, зав. кафедрой микробиологии ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Минздрава», г. Самара.
Работа получена 15.08.2011
Библиографическая ссылка
Абдалкин М.Е ИССЛЕДОВАНИЕ ДЕЙСТВИЯ НОВЫХ КОМБИНИРОВАННЫХ АНТИМИКРОБНЫХ РЕЦЕПТУР НА МИКРООРГАНИЗМЫ IN VITRO // Современные проблемы науки и образования. – 2011. – № 4. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=4715 (дата обращения: 23.03.2023).