Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,813

ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ В ПОРАЖЕННОЙ КОЖЕ БЕЛЫХ КРЫС С ДЕРМАТИТОМ ПРОСТЫМ РАЗДРАЖИТЕЛЬНЫМ КОНТАКТНЫМ ПРИ РАЗНЫХ МЕТОДАХ ЛЕЧЕНИЯ

Гребенникова С.В. 1 Макляков Ю.С. 1 Оксенюк О.С. 1 Калмыкова Ю.А. 1 Смирнова О.Б. 1
1 ФГБОУ ВО Ростовский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской федерации
Цель: оценить сравнительно в эксперименте на белых крысах с дерматитом простым раздражительным контактным влияние на состояние перекисного окисления липидов кожи препаратов, содержащих омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты, а также средств противовоспалительного действия. Материал и методы: у 71-й белой крысы вызывали дерматит простой раздражительный контактный и лечили разные группы животных Кремом «Витамин Ф99» жирным и Радевит мазью. Оценивали в коже содержание малонового диальдегида, активность супероксиддисмутазы и каталазы. Результаты: наиболее благоприятной оказалась динамика компонентов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы после лечения наружным средством, содержащим омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты в сравнении с таковым противовоспалительного действия. Заключение: показано преимущество влияния на перекисное окисление липидов кожи при экспериментальном дерматите простом раздражительном контактном у белых крыс наружного средства, содержащего омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты, относительно действия стандартной терапии.
дерматит простой раздражительный контактный
кожа
перекисное окисление липидов
полиненасыщенные жирные кислоты
1. Азам Н. Антиоксидантная активность лекарственных субстанций и биологически активных веществ/ Н. Азам, О.А. Горошко, В.П. Пахомова // Традиционная медицина. – 2009. – № 1. – С.35-38.
2. Барабой В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.Г. Голожин. – М., 2004. – 148 с.
3. Вторушина А.Н. Метод вольтамперометрии в определении антиоксидантных свойств некоторых биологически активных соединений: автореф. дис. … канд. хим. наук. – Томск, 2008. – 21 с.
4. Каркищенко Н.Н. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях / под ред. Н.Н. Каркищенко. – М., 2010. – 358 с.
5. Касихина Е.И. Цитопротективная терапия в комплексном лечении хронических воспалительных заболеваний кожи/ Е.И. Касихина // РМЖ дерматология. – 2015. – № 19. – С. 1146–1149.
6. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы /М.А. Королюк, Л.И. Иванова И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лабораторное дело. – 1988. – № 1. – С.16-18.
7. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты/ И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. – М., 1977. – С.66-68.
8. Чеснокова Н.П. О роли активации свободнорадикального окисления в структурной и функциональной дезорганизации биосистем в условиях патологии/ Н.П. Чеснокова, В.В. Моррисон, Е.Ф. Понукалина // Фундаментальные исследования. – 2009. – № 5. – С.122-130.
9. Шепелев А.П. Перекисное окисление липидов и система антиоксидантов в норме и при патологии / А.П. Шепелев, Л.А. Шовкун. – Ростов на Дону, 2012. – 363 с.
10. Amado A. Ирритантный контактный дерматит / A. Amado, J.S. Taylor, A. Sood //Дерматология Фицпатрика в клинической практике. – М., 2012. – Т.1. – С.430-437.
11. Mistra H.P. The role of superoxide anion in the autooxidation of epinephrine and simpl assay for superoxide dismutase /H.P. Mistra, I. Fridovich // J. Biol. Chem. – 1972. – Vol. 247. – № 10. – Р.3170-3175.

В литературе имеются многочисленные свидетельства того, что свободные радикалы являются одним из универсальных механизмов повреждения клетки. Перекисное окисление липидов (ПОЛ) рассматривается, с одной стороны, как необходимое звено метаболизма, обеспечивающее нормальную жизнедеятельность клеток, а с другой стороны, нарушение регуляции данного процесса, его замедление или ускорение является основой патогенеза многих заболеваний в том числе – кожных [1]. Активные формы кислорода и последующая интенсификация процесса ПОЛ, выступая в роли «первичного медиатора» стресса, являются одним из наиболее ранних регуляторных метаболитов, играющих важную роль в повреждении мембран клеток [2,3]. В связи с этим целесообразным рассматривается применение антиоксидантов в комплексной терапии и профилактике заболеваний кожи; существенное преимущество имеют лекарственные средства растительного и животного происхождения, содержащие в своем составе полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК) омега-3 и 6, которые в своей структуре имеют значительное количество двойных ненасыщенных связей [9]. Пи-связи влияют на свободные радикалы, защищая организм от окислительного стресса [5,11].

Целью нашего исследования является сравнение показателей ПОЛ и антиоксидантной системы пораженной кожи крыс при экспериментальном дерматите простом раздражительном контактном (ДПРК) в процессе местного лечения с использованием средства, содержащего омега-3 и омега-6 ПНЖК (крем «Витамин F99» жирный), а также Радевит мази – противовоспалительной.

Материал и методы

Экспериментальное исследование выполнено с соблюдением Международных принципов Европейской конвенции о защите позвоночных животных с учетом норм и правил биомедицинской этики (с разрешения этического комитета РостГМУ – протокол № 16/13 от 14.11.2013 г.) [4]. Группа 1-я –20 крыс без ДПРК, 2-я группа – с ДПРК без лечения в течение 4-х дней (n 17), животных 3-й группы (n 17) лечили Радевит мазью (ежедневно – в течение 11 дней), в группу 4-ю вошли 17 животных – ежедневно смазывания очагов ДПРК кремом «Витамин Ф 99» жирный. Для профилактики пиодермии раз в 3 дня – смазывания Эритромициновой мазью.

Радевит мазь рекомендована для лечения дерматитов контактных, ее использовали в группе 3-й. В 4-й группе лечения проводили ежедневными смазываниями очагов ДПРК Кремом «Витамин Ф 99» жирным, действующим веществом, в котором является витамин F – источник незаменимых ПНЖК, эфиры омега-3 жирных кислот и др.

Из компонентов ПОЛ мы оценивали содержание малонового диальдегида (МДА) [7], антиоксидантную систему характеризовала активность супероксиддисмутазы (СОД) [11] и каталазы (КАТ) [6] гомогенатов пораженной кожи из очагов ДПРК.

Для уточнения сведений о состоянии ПОЛ и антиоксидантной системы в очагах поражения при ДПРК мы провели исследования параллельно при «выраженной ожоговой травме» – эксперимент 1 (металлическую пластину, использованную для ожога, нагревали на электрической плитке с закрытой спиралью при начальных проявлениях покраснения покрывающей спираль металлической части), а также при «умеренной ожоговой травме» – эксперимент 2 – разогретую металлическую пластину затем (до контакта с кожей животного) предварительно охлаждали до 120 градусов, помещая на 20 сек на металлическую основу комнатной температуры. За основу брали показатели «при выраженной ожоговой травме» – эксперимент 1.

Результаты и их обсуждение

Полученные при исследовании показатели представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Перекисное окисление кожи крыс при дерматите простом раздражительном контактном («выраженная ожоговая травма»)

Группы белых крыс

МДА

нмоль/г

СОД усл. ед./г

КАТ ЕД х 102 /г х мин

1 гр., «контрольные» белые крысы (n 20) без ДПРК

63,15 + 4,98

589,6+31,7

20,50+1,49

2 гр., сравнения – 4 дня после ожоговой травмы без лечения (здесь и далее n10)

147,9+ 8,5 *

453,0+48,0*

30,84+1,28*

3 гр., лечение – Радевит мазью (11 дн.)

164,1+12,1 *

470,1 +91,7

30,49+1,85 *

4 гр., лечение – Крем «Витамин Ф 99» жирный (11 дн.)

142,6 +14,6 *

597,6 +27,9 ;2*

33,92 + 1,12 *

Примечание. Существенные различия: с контрольной группой – *, с группой сравнения – без лечения 4 дня после ожоговой травмы – 2*.

Таблица 2

Перекисное окисление липидов кожи крыс при дерматите простом раздражительном контактном («умеренная ожоговая травма»)

Группы белых крыс

МДА

нмоль/г

СОД усл.ед./г

КАТ ЕД х 102 /г х мин

1 гр., «контрольные» белые крысы ( n 20) без ДПРК

63,15 + 4,98

589,6+31,7

20,50+1,49

2 гр., сравнения – 4 дня после ожоговой травмы без лечения (здесь и далее n 7)

107,4+11,2 *

468,2+69,4

33,78+1,70 *

3 гр., лечение – Радевит мазью (11 дн.)

113,2+24,6

531,6+95,1

30,92+1,03 *

4 гр., лечение – Крем «Витамин Ф 99» жирный (11 дн.)

139,6 +16,3 *

682,2+44,7; 2*

29,90 + 1,80 *

Примечание. Различия существенны: с контрольной группой – *, с группой сравнения – без лечения 4 дня после ожоговой травмы – 2*.

Оценивая показатели ПОЛ в коже, мы получили определенные закономерности, проявлявшиеся весьма отчетливо. По МДА – его содержание после 4-х дней после ожоговой травмы резко нарастало при «выраженной ожоговой травме» (147,9 + 8,5 нмоль/г – в 2,3 раза; Р < 0,01). Различия между этими показателями экспериментов 1 и 2 с превалированием 1-го – в 1,4 раза ( Р < 0,05). Аналогично превалирование было отмечено по 3-й группе в 1,4 раза (тенденция) и по 4-й группе в 1, 2 раза (тенденция). Совершенно ясную динамику по всем 3-м группам в обоих вариантах проявила КАТ пораженной кожи. Она оказалась достоверно повышенной при обоих вариантах эксперимента во всех 3-х группах. При «выраженной ожоговой травме» (1-й вариант эксперимента) во 2-й группе – 30,84+ 1,28 ЕД х 102 /г х мин (в 1,5 раза; Р < 0,001), в 3-й группе – 30,49 +1,85 ЕД х 102 /г х мин ( в 1,5 раза; Р < 0,001) , в 4-й группе – 33,92 + 1,12 ЕД х 102 /г х мин (в 1,7 раза; Р < 0,001). Соответственно, при умеренной ожоговой травме (2-й вариант эксперимента) во 2-й группе – 33,78+1,70 ЕД х 102 /г х мин (в 1,7 раза; Р < 0,001), в 3-й группе – 30,92+1,03 ЕД х 102 /г х мин (в 1,5 раза ; Р < 0,001), в 4-й группе – 29,90 +1,80 ЕД х 102 /г х мин (в 1,5 раза; Р < 0,001).

Значительно менее определенно при обоих вариантах эксперимента проявляется СОД. Удалось, тем не менее, отметить при этом две позиции. Относительно 2-й группы (4 дня после ожоговой травмы без лечения) при 1-м варианте эксперимента («выраженная ожоговая травма») активность СОД составила 453,0 +48,0 усл. ед./г, будучи сниженной (Р < 0,05) в 1,3 раза, а при 2-м варианте эксперимента во 2-й группе – 468,2 + 69,4 усл.ед/г – тенденция к снижению в 1,3 раза. Тем самым в ситуации повышенного содержания МДА кожи при 1-м варианте эксперимента во 2-й группе (147,9 +8,5 нмоль/г, в 2,3 раза; Р < 0,001) и при 2-м варианте эксперимента во 2-й группе (107,4+11,2 нмоль/г, в 1,7 раза; Р < 0,01) в обоих вариантах эксперимента в 2-х группах по показателям МДА и СОД отмечена декомпенсация системы (оксидативный стресс), а по КАТ выявлены начальные признаки компенсации этой системы.

Вторая позиция, относительно активности СОД пораженной кожи у экспериментальных белых крыс с ДПРК, которую нам удалось отметить, заключается в следующем. В обоих вариантах эксперимента активность СОД в 4-й группе по сравнению со 2-й группой 597,6+27,9 усл. ед./г и 453,0 +48,0 усл. ед./г, а также 682,2 +44,7 усл. ед./г и 468,2 +69,4 усл. Ед./г – выше в 1,3 раза (Р < 0,05) и выше в 1,5 раза (Р < 0,05). Таким образом выявлена существенная компенсация антиоксидантной системы за счет возрастания активности СОД в 4-й группе экспериментальных животных, то есть леченных Кремом «Витамин Ф 99» жирным в сочетании с повышенной активностью КАТ пораженной кожи в 1-м варианте эксперимента до 33,92 +1,12 ЕД х 102/г х мин (в 1,7 раза; Р < 0,001) и во 2-м варианте эксперимента – до 29,90 +1,80 ЕД х 102/г х мин (в 1,5 раза; Р < 0,001). Это существенные и значительные компенсаторные звенья в условиях прежде отмечавшегося оксидативного стресса. Подобной благоприятной динамики не наблюдалось в 3-й группе животных, леченных Радевит мазью. Удалось показать преимущество в отношении влияния на декомпенсированное состояние ПОЛ и антиоксидантной системы при экспериментальном ДПРК наружного средства, содержащего омега-3 и омега-6 ПНЖК (Крем «Витамин Ф 99» жирный), по сравнению с (Радевит мазь).

После 4-х дней течения воспалительной реакции кожи (2-я группа) с «выраженной ожоговой травмой» возрастало в пораженной коже содержание МДА в 2,3 раза (при «умеренной ожоговой травме» – в 1,7 раза). Превалирование 1-го показателя – в 1,4 раза. Причина – в различии выраженности ожоговой травмы. Показатели повышены в 3-й группе – в 2,6 раза, и в 4-й группе – в 2,3 раза. Активность КАТ пораженной кожи оказалась существенно повышенной при обоих вариантах эксперимента («выраженная ожоговая реакция» и «умеренная ожоговая реакция») во всех 3-х группах. При 1-м варианте во 2-й и 3-й группах – в 1,5 раза, в 4-й группе – в 1,7 раза и при 2-м варианте, соответственно – в 1,7 раза, в 1,5 раза, и в 1,5 раза. Повышение активности КАТ пораженной кожи должно быть расценено как компенсаторная реакция в связи с повышением содержания в ней МДА.

Мы оценили показатели ПОЛ и антиоксидантной системы пораженной кожи белых крыс при экспериментальном ДПРК в процессе наружного лечения с использованием содержащего омега-3 и омега-6 ПНЖК Крема «Витамин Ф 99» жирного, а также средства противовоспалительной активности (Радевит мазь).

Активность СОД пораженной кожи при обоих вариантах эксперимента проявилась менее определенно. Однако удалось выявить две закономерности. Относительно 2-й группы (4 дня после ожоговой травмы без лечения) при «выраженной ожоговой травме» она снижена в 1,3 раза, а при «умеренной ожоговой травме» – тенденция к снижению в 1,3 раза. В обоих вариантах эксперимента во 2-х группах по показателям МДА и СОД установлен оксидативный стресс; по показателям КАТ пораженной кожи выявляются признаки компенсации этих систем.

Удалось отметить вторую позицию в отношении СОД пораженной кожи. При обоих вариантах эксперимента в 4-х группах по сравнению со 2-ми группами соответственно активность СОД выше в 1,3 раза и выше в 1,5 раза. Так установлена компенсация антиоксидантной системы вследствие относительного возрастания активности СОД в 4-х группах (лечение – Крем «Витамин Ф 99» жирный) в дополнение к повышенной активности КАТ пораженной кожи в группе «выраженной ожоговой травмы» в 1,7 раза и во втором варианте эксперимента в 1,5 раза. В условиях прежде отмечавшегося оксидативного стресса это существенные звенья компенсации антиоксидантной защиты. Благоприятной динамики ведущих компонентов ПОЛ не наступало в 3-й группе (лечение Радевит мазью). Это сопоставление демонстрирует преимущество относительно влияния на декомпенсированное состояние ПОЛ и антиоксидантной системы наружным средством, содержащим омега-3 и омега-6 ПНЖК, в сравнении с таковым противовоспалительного действия – Радевит мазью. Кроме того, МДА в группах 2–4 существенно повышен в сочетании с усиленной активностью КАТ.

Заключение

Более эффективным в отношении состояния ПОЛ и антиоксидантной системы при экспериментальном ДПРК у белых крыс оказалось лечение Кремом «Витамин Ф 99» жирный. Результаты использования Крема «Витамин Ф 99» жирный (4-я группа) превосходили таковые в 3-й группе (Радевит мазь). При этом обосновано применение в лечении заболеваний кожи с воспалительным компонентом в патогенезе – при ДПРК, аллергическом контактном дерматите, атопическом дерматите, диффузном и очаговом нейродермите, псориазе, кожной форме пигментной крапивницы у детей наружных средств, содержащих омега-3 и 6 ПНЖК и антиоксиданты. Период их использования – от выраженного обострения до существенной стабилизации высыпаний со значительным ослаблением воспалительной реакции пораженной кожи (эритемы, отечности и инфильтрации кожи, а также зуда).


Библиографическая ссылка

Гребенникова С.В., Макляков Ю.С., Оксенюк О.С., Калмыкова Ю.А., Смирнова О.Б. ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ В ПОРАЖЕННОЙ КОЖЕ БЕЛЫХ КРЫС С ДЕРМАТИТОМ ПРОСТЫМ РАЗДРАЖИТЕЛЬНЫМ КОНТАКТНЫМ ПРИ РАЗНЫХ МЕТОДАХ ЛЕЧЕНИЯ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=25499 (дата обращения: 19.02.2020).


Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074