Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

ВЛИЯНИЕ МИЛДРОНАТА И АЦИЗОЛА НА ОСНОВНЫЕ ПРОЦЕССЫ МОЧЕОБРАЗОВАНИЯ И ЭКСКРЕЦИЮ ЭЛЕКТРОЛИТОВ У СИРИЙСКИХ ЗОЛОТИСТЫХ ХОМЯКОВ С МОДЕЛЬЮ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АМИЛОИДНОЙ НЕФРОПАТИИ

Кисиева З.А. 1 Брин В.Б. 1 Козырев К.М. 1
1 ГБОУ ВПО «Северо-Осетинская государственная медицинская академии Минздрава России»
Установлено, что одновременное интрагастральное введение ацизола и подкожное введение милдроната опытным животным с имеющейся амилоидной нефропатией, воспроизведенной однократным введением нативной овечьей плазмы с полным адъювантом Фрейнда, способствует восстановлению диуреза за счет повышения скорости клубочковой фильтрации, несмотря на увеличение процессов канальцевой реабсорбции воды относительно показателей группы животных с моделью амилоидоза. Экспериментальная терапия способствовала повышению натрийуреза, снижению калий- и кальцийуреза, а также резкому уменьшению протеинурии. Таким образом, результаты проведенного эксперимента позволяют сделать вывод, что одномоментное введение смеси ацизола и милдроната способствует нормализации процессов мочеобразования и морфологических характеристик нефрона в виде снижения количества амилоида в клубочках и в базальных мембранах канальцев.
протеинурия
функции почек
милдронат
ацизол
амилоидоз
1. Брин В.Б., Габуева А.А., Козырев К.М. Влияние янтарной кислоты и сульфидной минеральной воды «Редант-4» раздельно и в их сочетании на функционально-структурное состояние почек при моделировании генерализованного амилоидоза нефропатического типа. // Кубанский научный медицинский вестник. - 2010. - № 7 (121). – С. 33-37.
2. Брин В.Б., Козырев К.М., Пухова И.У. Функционально-морфологическая характеристика экспериментальной модели амилоидной нефропатии // Вестник новых медицинских технологий. – 2008. – Т. XV, № 3. - С. 34-35.
3. Габуева А.А., Брин В.Б., Козырев К.М. Влияние сульфидной минеральной воды «Редант-4Р» на функцион. состояние почек при нефропатическом типе генерализованного амилоидоза // Владикавказский медико-биологический вестник. - 2009-2010. - Т. IX. - С. 101-104.
4. Dammacco F. Amyloidosis: clinical picture, immunological and biomolecular features, treatment prospects // Ann. Ital. Med. Int. - 1991. - Vol. 6 (1 Pt 2). - P. 107-116.
5. Закс Т.В., Брин В.Б., Беликова А.Т., Козырев К.М. Патогистологическая характеристика экспериментального амилоидоза у золотистых сирийских хомяков. Влияние мелаксена // Вестник новых медицинских технологий. - 2012. - Т. 19. - № 3. - С. 151-154.
6. Закс Т.В., Брин В.Б., Козырев К.М., Соколовский Н.В. Патофизиологическая и гистоструктурная оценка модели кардиопатического типа экспериментального амилоидоза. Влияние мелаксена // Вестник новых медицинских технологий. - 2012. - № 4. - С. 149-152.
7. Заалишвили Т.В., Брин В.Б., Козырев К.М. Способы моделирования амилоидоза экспериментальных животных // Успехи современного естествознания. – 2005. – № 2. – С. 78-79.
8. Закс Т.В., Брин В.Б., Беликова А.Т., Козырев К.М. Патогистологическая характеристика экспериментального амилоидоза у золотистых сирийских хомяков. Влияние мелаксена // Вестник новых медицинских технологий [Тула]. - 2012. - Т. XIX, № 3. - С. 151-154.
Сое J.E., Ross M.J. Amyloidosis and female protein in the Syrian hamster. Concurrent regulation by sex hormones // J. Exp. Med. - 1990. - Apr. 1. -Vol. 171, N4. - P. 1257-1267.

Введение. Заболеваемость амилоидозом составляет 8 случаев на миллион населения в год (Comenzo R.L., 2007). Чаще всего поражаются сердце и почки, однако у многих пациентов выявляются нарушения функций двух и более органов, так как в большинстве своем амилоидоз носит системный характер поражения органов мишеней, и без лечения большинство пациентов погибают в течение года.

Известны несколько способов лечения этой патологии, таких как метод аутологичной трансплантации, применяемый в гематологии, использование которого в свою очередь ограничено плохим соматическим статусом большинства пациентов, и даже при соблюдении правил отбора больных для проведения вышепредложенного метода, смертность достигает 20% (Sanchorawala et.al., 2004). Использование таких препаратов, как талидомид, леналидомид и бортезолиб, в лечении амилоидоза не привело к значительному улучшению результатов терапии (Dispenzieri et. al., 2003, 2007; Sanchorawala et. al., 2007; Wechalekar et al., 2008). Это объясняется в первую очередь их высокой токсичностью, а снижение дозы вело к снижению эффективности. Известны также исследования с применением мелаксена [2; 3], минеральной воды и янтарной кислоты [1; 4].

Таким образом, несмотря на многообразие применяемых препаратов и методов, используемых для лечения амилоидоза, разработка наиболее эффективных и экономически выгодных методов лечения все еще остается одной из актуальнейших задач в медицине.

Цель исследования

Изучение влияния одномоментного введения смеси милдроната и ацизола на морфо-функциональные показатели почек у сирийских золотистых хомяков с моделью экспериментальной амилоидной нефропатии.

Материалы и методы исследования

Работа проводилась на золотистых сирийских хомяках массой 100-120 г. Для опыта были выбраны половозрелые самцы c экспериментальным амилоидозом.

Сравнительный анализ исследованных показателей был проведен в 2 группах животных:

  • животные с экспериментальной амилоидной нефропатией,
  • животные с моделью экспериментальной амилоидной нефропатии, подвергнутые введению ацизола внутрижелудочно в дозе 30 мг/кг вместе с введением милдроната подкожно из расчета 10%-5 мг/кг массы тела животного.

Животные в течение эксперимента находились на стандартном пищевом рационе и имели свободный доступ к воде и пище в течение суток. Световой режим - естественный.

Модель амилоидоза воспроизводилась однократным введением нативной овечьей плазмы и полного адъюванта Фрейнда из расчета 0,2 мл в 5 точек инъекций. Ацизол внутрижелудочно и милдронат подкожно вводили через 2 месяца создания амилоидоза. По истечении 30 и 60 дней экспериментальной терапии исследовались функциональные и морфологические характеристики почек. Для изучения функций почек в условиях спонтанного диуреза животные на 30 и 60-й день эксперимента помещались в обменные клетки, где в течение 6 часов у них собиралась моча. Определялись:

  • объем диуреза;
  • скорость клубочковой фильтрации по клиренсу эндогенного креатинина, и рассчитывалась канальцевая реабсорбция воды;
  • содержание калия и натрия, методом пламенной фотометрии, с помощью пламенного фотометра ФПА-2;
  • концентрация кальция на спектрометре СФ-26, с использованием набора «Кальций» ООО «Агат-Мед» (г. Москва, Россия).
  • концентрация общего белка определялась спектрофотометрически (СФ-26), с помощью реактива Фоллина.

Показатели электролито- и водовыделительной функций почек. Таблица 1.

 

Стат. показатель

Диурез,

мл/час/ 100

СКФ,

м/час

100

Реаб-

Сорбция,

%

Ек

ENa

ЕСа

Фз Ca, мкмоль

/час/ 100

Фз Na, мкмоль

/час/ 100

Фз K,

мкмоль /час/ 100

R Ca

R Na

Белок,

мг/мл

Фон

М ± m

0,15

 

±0,005

21,02

 

±0,739

99,30

 

±0,024

6,37

 

±0,194

11,18

 

±0,585

0,49

 

±0,053

32,10

 

±1,251

2705,32

 

±99,12

91,19

 

±4,24

99,49

 

±0,140

99,58

 

±0,018

0,88

 

±0,02

Амилоидная

М ± m

0,11

 

± 0,004

11,66

 

± 1,400

99,05

 

± 0,030

7,33

 

± 0,324

5,85

 

± 0,417

0,73

 

± 0,078

14,15

 

± 0,841

1548,73

 

± 62,89

65,62

 

± 4,02

94,84

 

± 0,477

99,62

 

± 0,030

3,20

 

± 0,07

 

 

р

*)

*)

*)

*)

*)

*)

*)

*)

*)

*)

 

*)

30 дней лечения милдронат и ацизолом

М ± m

0,14

 

± 0,006

24,28

 

± 1,323

99,42

 

± 0,011

9,74

 

± 0,550

8,43

 

± 0,639

0,83

 

±0,094

39,83

 

± 2,119

3142,60

 

±173,211

122,55

 

± 7,404

97,93

 

±0,230

99,73

 

± 0,230

2,62

 

± 0,107

 

р

 

*) ; **)

*) ; **)

*) ; **)

*) ; **)

*) ; **)

 

*) ; **)

*) ; **)

*) ; **)

 

*) ; **)

60 дней лечения милдронат и ацизолом

М ± m

0,18

 

± 0,007

33,27

 

± 1,701

99,47

 

± 0,012

7,01

 

±0,471

15,51

 

± 0,773

0,48

 

±0,058

70,30

 

± 4,146

4147,53

 

±197,404

123,55

 

± 3,320

99,30

.

±0,091

99,62

 

 

± 0,011

1,61

 

 

± 0,071

 

р

*) ; **)

*) ; **)

*) ; **)

 

*) ; **)

 

*);**)

*) ; **)

*) ; **)

 

 

*) ; **)

*) р ≤0,05 достоверное увеличение относительно фона;

**) р ≤0,05 достоверное увеличение относительно амилоидных животных.

Концентрация электролитов в крови. Таблица 2.

 

Стат.

показатель

Концентрация Ca в плазме крови

Концентрация Na в плазме крови

Концентрация K в плазме крови

Фон

М ± m

2,29 ± 0,019

135,45 ± 0,450

4,55 ± 0,121

Амилоидная группа

М ± m

1,87 ± 0,080

139,76 ± 1,109

5,88 ± 0,161

р

*)

*)

*)

30 дней лечения

М ± m

2,55 ± 0,105

136,22 ± 1,516

5,32 ± 0,159

р

*) ; **)

 

*) ; **)

60 дней лечения

М ± m

3,26 ± 0,116

131,51 ± 1,587

5,95 ± 0,124

р

*) ; **)

 

*) ; **)

По истечении времени эксперимента (60 дней) животных забивали с использованием тиопентала натрия с целью исследования гистологического строения тканей. Для морфологических исследований образцы тканей почек фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, после чего подвергали заливке в парафин с последующим приготовлением срезов толщиной 7-8 микрон. Срезы окрашивались гематоксилином, эозином, конго красным. Изучение срезов проводилось в проходящем свете при помощи микроскопа Микмед-1 под увеличением 80x200x800 (рис. 1, 2).

Рис. 1. Морфологические изменения в почках, через 60 дней после однократного введения равнодолевой смеси нативной овечьей плазмы с полным адъювантом Фрейнда. Окраска конго красным, увеличение 80х200х400.

Конгофилия сосудистых клубочков (а) и базальных мембран канальцев (б).

Рис. 2. Влияние смеси милдронат и ацизола на морфологические изменения при амилоидозе почек на фоне однократного введения почек равнодолевой смеси нативной овечьей плазмы с полным адъювантом Фрейнда. Окраска конго красным, увеличение 80х200х400. Снижение количества конгофильного белка в сосудистых клубочках (а) и базальных мембранах канальцев (б).

Результаты и их обсуждение. Анализ результатов исследования у золотистых сирийских хомяков с экспериментальным амилоидозом почек, моделированным однократным введением равнодолевой смеси нативной овечьей плазмы и полного адъюванта Фрейнда, с последующим внутрижелудочным введеним ацизола и подкожным введением милдроната, показал достоверное корригирующее действие препаратов на показатели процессов мочеобразования, водо- и электровыделительную функцию почек. Так, у животных с моделью экспериментального амилоидоза относительно интактных животных отмечались: снижение объема диуреза, обусловленное уменьшением скорости клубочковой фильтрации, несмотря на снижение величины канальцевой реабсорбции; выраженная протеинурия; а также достоверное повышение калий- и кальцийуреза, что было обусловлено снижением реабсорбции этих катионов, несмотря на уменьшение их фильтрационного заряда. Отмечено значительное снижение экскреции натрия, и нарастание протеинурии, более чем в 2 раза. Как указано ранее, вышеперечисленные показатели свидетельствуют о развитии нефропатического типа экспериментального амилоидоза у животных. В качестве корригирующих средств нами были выбраны милдронат 10%-5мг/кг массы тела животного, вводимый подкожно, и ацизол 30 мг/кг массы животного, вводимый интрагастрально.

При этом на 30-й день введения вышеуказанных препаратов имело место увеличение объема диуреза относительно показателя амилоидных животных, обусловленное ускорением клубочковой фильтрации с одновременным повышением величины канальцевой реабсорбции, повышением кальций- и калийуреза, значительным нарастанием экскреции натрия, а также наблюдалось значительное снижение потери белка. В конце второго месяца, наблюдалось более выраженное восстановление объема диуреза, обусловленное повышением скорости клубочковой фильтрации более чем в 2,5 раза, несмотря на нарастание величины канальцевой реабсорбции. Снижение потерь белка было почти в 2 раза относительно показателя амилоидных животных. Имело место также достоверное повышение натрийуреза, снижение калий- и кальцийуреза, что было обусловлено снижением реабсорбции этих катионов, несмотря на уменьшение фильтрационного заряда калия, и увеличением фильтрационного заряда натрия и кальция. Перечисленные показатели приближались к показателям интактных животных. Таким образом, полученные данные свидетельствуют об эффективном корригирующем влиянии смеси милдроната и ацизола на показатели основных процессов мочеобразования и экскрецию электролитов у животных с имеющейся моделью амилоидной нефропатии.

При гистологическом исследовании почек животных группы № 2 была выявлена активная регенерация капилляров и эндотелия клубочков почек. Количество амилоида в клубочках и в базальных мембранах канальцев было существенно меньше.

В миокарде под влиянием милдроната и ацизола выявлены положительные гистоструктурные характеристики в виде уменьшения отложения амилоида в кардиомиоцитах, стенках кровеносных и лимфатических сосудов микроциркуляторного русла. Выявлено снижение дисциркуляторных процессов в виде уменьшения гиперемии, плазматического пропитывания, отека пространств межуточного вещества.

В печени - уменьшение конгофилии стенок центральных вен печеночных долек, уменьшение очагов паренхиматозной и жировой дистрофии гепатоцитов. Частичное восстановление органоспецифической цитоархитектоники в форме пролиферации гепатоцитов с крупными гиперхроматическими ядрами. Имеются участки активного формирования характерных печеночных балок с регенерацией внутридольковых печеночных протоков.

Таким образом, результаты проведенного эксперимента позволяют сделать вывод, что введение 10%-ного милдроната в дозе 5 мг/кг массы тела животного внутрижелудочно и ацизола из расчета 30 мг/кг подкожно, при амилоидозе, сформировавшемся спустя 2 месяца от момента однократного введения равнодолевой смеси нативной овечьей плазмы и полного адъюванта Фрейнда из расчета 0,2 мл в 5 точек инъекций, является эффективным способом коррекции гистоструктурных и функциональных показателей почек.

Рецензенты:

Джиоев И.Г., д.м.н., профессор, заведующий Центральной научно-исследовательской лабораторией ГБОУ ВПО «Северо-Осетинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Владикавказ.

Каде А.Х., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой общей и клинической патофизиологии Кубанского государственного медицинского университета, лауреат премии Правительства Российской Федерации, г. Краснодар.


Библиографическая ссылка

Кисиева З.А., Брин В.Б., Козырев К.М. ВЛИЯНИЕ МИЛДРОНАТА И АЦИЗОЛА НА ОСНОВНЫЕ ПРОЦЕССЫ МОЧЕОБРАЗОВАНИЯ И ЭКСКРЕЦИЮ ЭЛЕКТРОЛИТОВ У СИРИЙСКИХ ЗОЛОТИСТЫХ ХОМЯКОВ С МОДЕЛЬЮ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АМИЛОИДНОЙ НЕФРОПАТИИ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 2.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=12928 (дата обращения: 15.06.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074