Введение
Изучение изменений в органах, тканях и средах полости рта у лиц, страдающих опийной наркоманией, является одной из актуальных проблем стоматологии на современном этапе. Согласно данным ООН [7], число лиц, употребляющих наркотики, составляет 185 млн человек (3% населения земного шара). В последнее десятилетие стремительное развитие получили исследования, занимающиеся вопросами диагностики, лечения и реабилитации опиоидзависимых больных [4; 5]. Клинические проявления данного заболевания на тканевом, органном и системном уровнях организации удостоены должного внимания со стороны психиатров, наркологов, терапевтов и иммунологов [8-12; 15; 16]. Однако стоматологическая патология у данного контингента больных практически не изучена. Имеющиеся отдельные работы [1-3; 13; 14; 17-19] освещают лишь некоторые аспекты стоматологических расстройств у опиоидзависимых больных. Зачастую именно стоматологи сталкиваются с проявлениями данной патологии челюстно-лицевой области. Врачи-стоматологи, столкнувшись с данной проблемой, оказались неподготовленными к распознаванию и диагностике опийной наркомании из-за отсутствия систематизированных сведений о ее проявлении в органах полости рта [1-3].
В этой связи нами проведено исследование, целью которого явилось изучение на светооптическом уровне морфологических особенностей в структурах языка при введении малых доз опиоидного анальгетика.
Материалы и методы исследования
Материалом исследования явились половозрелые крысы - самцы линии Вистар массой 160 г, в возрасте 4,5-7,5 месяцев, всего 16 животных. Инъекции опиоидного анальгетика проводили внутримышечно, ежедневно 1 раз в сутки во временном промежутке от 10 до 11 часов утра. Первая подопытная группа в количестве 8 животных в течение 70 суток получала внутримышечно опиоидный анальгетик в следующих дозах: первые две недели - 0,212 мг / кг, от 2 до 4 недель - 0,225 мг / кг, от 4 до 6 недель - 0,252 мг / кг, от 6 до 8 недель - 0,260 мг / кг, от 8 до 10 недель - 0,283 мг / кг, после чего был проведен забор материала для гистологического исследования. Вторая подопытная группа в количестве 8 животных в течение первых 70 суток получала препарат по аналогичной схеме с первой группой, а от 10-й до 12-й недели эксперимента доза была увеличена до 0,3 мг / кг, после чего был проведен забор материала для гистологического исследования. Все животные содержались в условиях вивария и работа проводилась согласно «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных». Перед проведением забора биопсийного материала животное усыпляли при помощи внутрибрюшинного введения тиопентала (из расчета 25 мг / 1 кг), после чего проводили ампутацию языка для последующего гистологического исследования. Гистопрепараты готовили по общепринятой методике.
Результаты исследования
В результате исследования полученного материала в конце десятой недели эксперимента по изучению влияния малых доз опиоида нами обнаружены изменения в эпителиоцитах базального слоя языка, характеризующиеся конденсированным расположением хроматина в ядрах кератиноцитов базального слоя и отсутствием визуализированных ядрышек [рис. 1-3]. Кариолема образует многочисленные инвагинации. В цитоплазме кератиноцитов присутствуют многочисленные вакуоли. Митохондрии просветленные, кристы в них деструктурированные, пространства между кристами расширены. Однако наряду с дистрофически измененными в кератиноцитах, в базальном слое обнаруживаются их гипертрофированные формы. Ядра в таких клетках увеличены в размерах, кариолема содержит многочисленные инвагинации, что значительно увеличивает их длину и протяженность. Эухроматин занимает большую часть ядра, а гетерохроматин в виде тонкой полоски находится на его периферии. В ядрах гипертрофированных кератиноцитов базального слоя эпителия расположены хорошо структурированные ядрышки (как правило, одно-два), а в их цитоплазме находятся митохондрии с признаками гиперплазии. Наличие в цитоплазме многочисленных «почек» свидетельствует об активации процессов образования митохондрий. В клетках остистого слоя выражены деструктивные изменения с конденсированным ядерным хроматином и просветленными и расширенными перинуклеарными пространствами. В цитоплазме присутствовали многочисленные вакуоли. Митохондрии гипертрофированные, матрикс в них просветленный, кристы разрушены. Базальная мембрана, отделяющая эпителиоциты от соединительной ткани, не однородна. Вблизи очагов деструкции базальной мембраны основное вещество и коллагеновые волокна дезорганизованы. В цитоплазме активированных макрофагов размещены многочисленные лизосомы и фагосомы. Гипертрофированные и гиперплазированные митохондрии в них с просветленным матриксом и с уменьшенным количеством крист, часть из которых деструктурирована. У крыс, которым вводили опиоид десять недель, в соединительной ткани собственной пластинки слизистой оболочки языка обнаружены деструктивно измененные фибробласты, активированные макрофаги и тканевые базофилы. Часто присутствовали контакты макрофагов с лимфоцитами, что указывает на активацию местного иммунитета на данном этапе наблюдения. Дополнительно наблюдали умеренный отек осевых цилиндров периферийных нервных волокон. В миосимпластах мышечных волокон тела языка присутствовали участки пересокращенных саркомеров, актиновые филаменты которых очагово деструктурированы, канальцы саркоплазматического ретикулума расширены. Гиперплазия и гипертрофия митохондрий более выражена, чем в предыдущем сроке наблюдения. Часть митохондрий отечная с просветленным матриксом и деструктурированными кристами.
Рис. 1. Ультраструктура кератиноцитов остистого слоя (А) и зернистого слоя (Б) покровного эпителия слизистой оболочки языка крыс в конце десятой недели опиоидного воздействия. Электронограмма х 2000
1 - кариорексис, 2 – цитоплазма, 3 - ядро, 4 - деструктурированные митохондрии.
Рис. 2. Ультраструктура клеток Меркеля (А) и кератиноцитов остистого слоя (Б) покровного эпителия слизистой оболочки языка крыс в конце десятой недели опиоидного воздействия. Электронограмма х 2000.
1 - клетка Меркеля, 2 - диск Меркеля, 3 - кератиноциты остистого слоя,
4 - ядро, 5 - цитоплазма, 6 - деструктурированные митохондрии.
Рис. 3. Ультраструктура соединительной ткани слизистой оболочки языка крыс в конце десятой недели опиоидного воздействия. Электронограмма х 2000.
1 - фибробласты, 2 - коллагеновые волокна, 3 - нервные волокна, 4 - макрофаги, 5 - стенка венулы, 6 - периваскулярный отек интерстиция.
В результате забора экспериментального материала в конце двенадцатой недели воздействия опиоида мы обнаружили, что изменения в эпителиоцитах базального слоя аналогичны изменениям в предыдущем сроке наблюдения [рис. 4, 5]. Однако в клетках остистого слоя деструктивные изменения прогрессировали. Хроматин в ядрах конденсированный, перинуклеарные пространства просветленные и расширенные. В цитоплазме присутствуют многочисленные вакуоли. Митохондрии гипертрофированные, матрикс в них просветленный, кристы разрушены. Звенья гемомикроциркуляторного русла в слизистой оболочке языка характеризуются полнокровием. В просветах артериол обнаруживаются пристеночные тромбы. Стенки артериол утолщены за счет гиперплазии гладких миоцитов в средней оболочке. Просветы кровеносных капилляров в слизистой оболочке расширены и полнокровны, эндотелиоциты в их стенках набухшие. Базальная мембрана вокруг капилляров неоднородная, коллагеновые волокна в ней очагово деструктурированные. Просвет венул полнокровный, в них обнаруживаются ацидофильные лейкоциты, моноциты, тромбоциты и эритроциты. Часто встречаются процессы адгезии моноцитов к эндотелиоцитам и диапедез лейкоцитов через стенки венул. Соединительная ткань в периваскулярных пространствах отечна, в ней обнаруживаются многочисленные лимфоциты, гистиоциты, эозинофильные лейкоциты и единичные
Рис. 4. Ультраструктура слизистой оболочки языка крыс в конце двенадцатой недели опиоидного воздействия. Электронограмма х 2000.
1 - фибробласты, 2 - коллагеновые волокна, 3 - клетки Лангенгарса в соединительной ткани, 4 - активированные макрофаги, 5 - контакты макрофагов и лимфоцитов, 6 - перицеллюлярный отек интерстиция.
Рис. 5. Ультраструктура слизистой оболочки языка крыс в конце двенадцатой недели опиоидного воздействия. Электронограмма х 2000.
1 - фибробласты, 2 – макрофаги, 3 - коллагеновые волокна, 4 - перицеллюлярный отек интерстиция, 5 - отек эндоневрия в нервных волокнах.
тканевые базофилы. В периваскулярных пространствах присутствовали активированные макрофаги. В их цитоплазме расположены многочисленные фагосомы и макрофаги с лимфоцитами, что указывает на активацию местного иммунитета.
Выводы
1. В конце десятой недели воздействия опиоида присутствуют структурные изменения в составе покровного эпителия и базальной мембраны, соединительной ткани собственной пластинки слизистой оболочки языка. Наблюдаются изменения в строении его нервных и мышечных волокон. Данные электронно-микроскопических исследований свидетельствуют о запуске механизмов местного иммунитета.
2. В конце двенадцатой недели воздействия опиоида обнаруживаются более глубокие деструктивные изменения в клетках остистого слоя языка. Нарушается структура стенок в звеньях гемомикроциркуляторного русла. Наблюдаются явления адгезии тромбоцитов и моноцитов. В периваскулярных пространствах присутствуют активированные макрофаги и отек соединительной ткани.
Рецензенты:
Матещук-Вацеба Л.Р., д.м.н., профессор, профессор кафедры нормальной анатомии Львовского национального медицинского университета имени Данила Галицкого, г. Львов.
Жилякова Е.Т., д.фарм.н., профессор, заместитель директора ООО «Асклепий», г. Белгород.
Библиографическая ссылка
Онысько И.О., Кривко Ю.Я., Крикун Е.Н., Новиков О.О. УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ЯЗЫКЕ, ВЫЗВАННЫЕ ВОЗДЕЙСТВИЕМ МАЛЫХ ДОЗ ОПИОИДА (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 6. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=11166 (дата обращения: 28.03.2023).