Введение. Скрытый (субклинический) эндометрит - endometritis latentus –разновидность хронического катарального эндометрита, при котором регистрируются обильные выделения из половых органов слизи, иногда с примесью хлопьев и прожилок гноя, только во время течки [7]. Это гиперпластическое, реже атрофическое воспаление матки, с периодическим обострением, которое приводит к необратимым морфологическим изменениям в матке и постоянному бесплодию [8]. Вместе с тем вопросам этиологии, патогенеза, гистоморфологии и цитологии гениталий у коров при скрытом (субклиническом) течении эндометрита в специальной литературе посвящены немногие работы [1-6].
Целью настоящей работы является оценка патоморфологического состояния матки и влагалища у коров при скрытом эндометрите.
Материал и методы. Объектом исследований служили коровы черно-пестрой и красной степной породы, в возрасте 3-6 лет, с признаками скрытого эндометрита.
Для гистологических исследований использовали пробы матки (n=5) от коров с клиническими признаками патологии репродуктивной системы, полученные при убое на мясоперерабатывающем холдинге «Компур» и пробы слизистой оболочки матки (n=5) и влагалища (n=5), полученные биотомом от коров в условиях хозяйства. Гистологический материал фиксировали в 4%-ном забуференном растворе формальдегида, заключали в парафин, депарафинированные срезы окрашивали гематоксилином и эозином.
Для цитологических исследований отбирали пробы вагинальной (n=10) и цервикальной (n=10) слизи при помощи сконструированного нами устройства для получения содержимого матки у коров на основе цитощетки (приоритет № 2013102059/13 (002724) от 16.01.2013 г.). Из проб готовили мазки, которые высушивали на воздухе в течение 10-15 минут, фиксировали 96%-ным этиловым спиртом, окрашивали по Романовскому-Гимзе. Подсчитывали 200-500 соматических клеток, затем выводили цитологические критерии: индекс созревания, эозинофильный и кариопикнотический индекс. Микроскопию, морфометрию и микрофотографирование гистопрепаратов и мазков проводили с помощью микроскопа К. Zeiss AXIO Imager A1.
Собственные исследования. При клиническом исследовании коров наблюдали небольшую отечность вульвы, выделение полужидкой слизи, которая при визуальном осмотре была слегка мутной или с наличием хлопьев и прожилок гноя. Слизистая оболочка преддверия и влагалища гиперемирована, отечная, влажная; влагалищная часть шейки матки увеличена, ярко-розового цвета, цервикальный канал приоткрыт. При ректальном исследовании отмечали пониженную ригидность или гипотонию матки, утолщение стенок и слабую сплюснутость ее рогов. Яичники часто в состоянии гипофункции, иногда регистрировали персистенцию или гипоплазию желтого тела.
При послеубойном осмотре матка немного увеличена, розового с желтоватым оттенком цвета, дряблой консистенции, стенки утолщены. В полости матки иногда небольшое количество экссудата, поверхность эндометрия светло-розовая, тусклая. Яичники, как правило, уменьшены в размерах, с гладкой или мелкобугристой поверхностью дряблой или, напротив, плотной консистенции (рис. 1).
Рис. 1. Матка и яичники коровы 4 лет, красной степной породы при скрытом эндометрите: 1 – матка; 2 – яичники.
При гистологическом исследовании установлено, что в слизистой оболочке (228,27±19,50 нм) матки коров с симптомами скрытого эндометрита эпителий, выстилающий эндометрий, почти полностью десквамирован. На сохранившихся участках эпителий призматический, без апикальной каемки. В субэпителиальных участках поверхностного слоя эндометрия регистрировали отечность (рис. 2).
Рис. 2. Десквамация эпителия эндометрия матки коровы 4 лет красной степной породы при скрытом эндометрите: 1 - фрагмент эпителия; 2 – отек и инфильтрация подэпителиального слоя; 3 - переполненные мелкие сосуды. Гематоксилин-эозин. Увел. 100
В маточных железах, выстланных преимущественно высоким призматическим эпителием (19,89±0,96 нм), отмечали признаки атрофических изменений, сопровождающихся уменьшением их диаметра (43,13±1,14 нм) и просвета. Вокруг кровеносных сосудов и устьев маточных желез отмечали разрастание фиброцитов и фибробластов и образование коллагеновых волокон, наличие нейтрофилов и большого количества лимфоцитов.
В базальном слое, имеющем неодинаковую ширину, маточные железы также небольшого диаметра (56,63±2,03 нм), некоторые из них имеют расширенную фундальную часть (92,46±3,35 нм). Выстилающий эпителий низкий призматический (14,15±0,79 нм), в отдельных железах многорядный, в просветах гомогенный секрет. Между маточными железами и кровеносными сосудами наблюдали разрастание плотной соединительной ткани.
В циркулярном (204,53±18,06 нм) и продольном (304,49±26,64 нм) мышечном слое отмечали плотное расположение миоцитов. Толщина межмышечного слоя значительна (525,16±13,39 нм) за счет разрастания волокнистой соединительной ткани, стенки сосудов гипертрофированы.
Периметрий (от 14 до 94,32 нм) отличала структурная однородность, умеренное наполнение сосудов. Под периметрием часто регистрировали лимфатические сосуды, мелкие вены и артерии. В кровеносных сосудах всех слоев матки и на поверхности эндометрия обнаруживали отдельные нейтрофилы.
Эпителий слизистой оболочки влагалища коров при скрытом эндометрите неодинаковой толщины. Поверхностный эпителий местами полностью десквамирован. В базальной мембране наблюдали синусоидно расширенные венозные и лимфатические капилляры. Клетки базального слоя имели вытянутую веретенообразную форму, располагались перпендикулярно базальной мембране и в некоторых участках внедрялись в нее. Толщина промежуточного и поверхностного слоев эпителия в разных участках слизистой оболочки отличалась. Промежуточные и поверхностные клетки в состоянии вакуольной дистрофии (рис. 3).
На отдельных участках базальные клетки отсутствовали, а промежуточные и поверхностные представлены одним-двумя рядами, на других - промежуточный и поверхностный слои слизистой оболочки более выражены, клетки и ядра ориентированы параллельно базальной мембране. Среди клеток эпителия встречается небольшое количество лимфоцитов. На некоторых, прилегающих к эпителию, участках базальной мембраны имеются скопления макрофагов и лимфоцитов. Наблюдали участки, где в поверхностном и промежуточном слоях много лимфоцитов, зерна кератогиалина отсутствовали.
Рис. 3. Слизистая оболочка влагалища коровы 5 лет черно-пестрой породы при скрытом эндометрите: 1 - клетки поверхностного слоя; 2 – клетки промежуточного слоя; 3 – базальные клетки. Гематоксилин-эозин. Увел. 400.
В мазках из влагалища у коров при скрытом эндометрите преобладали промежуточные (37-66%) и базальные клетки (32-41%), которые располагались пластами, парабазальные - 2-6% и поверхностные 5-21%.
Рис. 4. Влагалищный мазок коровы 4 лет черно-пестрой породы при скрытом эндометрите: 1 – базальные клетки; 2 – вакуолизированные промежуточные; 3 – поверхностные; 4 – ядра нейтрофилов. Романовский - Гимза. Увел. 400.
Базальные клетки мелкие (8,45±0,32 нм), с интенсивно окрашенными базофильными ядрами (5,71±0,22 нм). Парабазальные – округлые, с четкими контурами, диаметром 12,37±0,38 нм с ядрами 7,56±0,23 нм. Во всех полях зрения обнаруживали большое количество вакуолизированных промежуточных и поверхностных клеток, а также их ядра без цитоплазмы, крупные многоядерные клетки, нейтрофилы и лимфоциты. Диаметр промежуточных клеток составлял 27,20±2,80 нм, а их ядер - 11,13±0,68 нм. Поверхностные клетки разнообразной формы, диаметром 37,19±2,93 нм, с мелкими пикнотическими ядрами (5,97±0,22 нм), но чаще без них. Эозинофильный и кариопикнотический индекс составлял 18-19% и 59-100% соответственно.
В мазках из влагалищной части шейки матки коров превалировали промежуточные (48-56%) и поверхностные (27-38%) клетки, базальные составляли 4-6%, парабазальные – 0-2%. В мазках обнаруживали большое количество кокков, нейтрофилы, лимфоциты и моноциты. В мазках коров, подвергнутых искусственному осеменению, при просмотре были обнаружены разрушающиеся спермии (рис. 5).
Рис. 5. Лизис спермиев в шейке матки коровы 5 лет черно-пестрой породы при скрытом эндометрите: 1 – базальные клетки; 2 – промежуточные; 3 – поверхностные; 4 – спермии; 5 – ядра нейтрофилов. Романовский - Гимза. Увел. 400.
Эозинофильный индекс составил 13-18%, а кариопикнотический - 80-86%.
Обсуждение результатов. При скрытом эндометрите патологические изменения регистрировали, прежде всего, в матке, где они характеризовались десквамацией эпителия эндометрия, отеком и инфильтрацией его поверхностного слоя, разрастанием соединительной ткани в эндометрии и в межмышечном слое, сужением просвета маточных желез и пролиферацией миометрия. Во влагалище слизистая оболочка истончена в результате интенсивной десквамации и дистрофии клеток поверхностного и промежуточного слоя; в толще эпителия большое количество макрофагов и лимфоцитов. Результаты цитологической диагностики совпадают с гистоморфологическими изменениями. При исследовании мазков из шейки матки обнаружены кокки, нейтрофилы и их ядра, лимфоциты и моноциты, а в мазках из влагалища - макрофаги, нейтрофилы и лимфоциты. В мазках из влагалища превалировали промежуточные и базальные клетки, а из шейки матки – промежуточные и поверхностные, зачастую вакуолизированные. Эозинофильный и кариопикнотический индексы, характеризующие эстрогенную насыщенность организма, противоречивы по значению: эозинофильный индекс низкий (не более 18-19%), а кариопикнотический высокий, иногда 100%, что указывает на дисфункцию яичников.
Заключение. Таким образом, при гистологическом и цитологическом исследовании матки и влагалища коров с симптомами скрытого эндометрита были установлены патоморфологические изменения, свидетельствующие о хроническом воспалительном процессе. В матке доминировали признаки атрофического катара, характеризующегося пролиферацией фибробластов и фиброцитов с образованием коллагеновых волокон, атрофией маточных желез, инфильтрацией эндометрия нейтрофилами и лимфоцитами. Для слизистой оболочки влагалища характерно преобладание десквамации и вакуольной дистрофии поверхностного и промежуточного слоя и инфильтрация мононуклеарами.
В мазках из шейки матки превалировали вакуолизированные промежуточные и поверхностные клетки, обнаружены кокки, нейтрофилы и их ядра, лимфоциты и моноциты, а в мазках из влагалища - промежуточные и базальные клетки, макрофаги, нейтрофилы и лимфоциты. Эозинофильный индекс был низким (от 13 до 19%), а кариопикнотический высоким, от 59 до 100%, что указывает на дисфункцию яичников.
Рецензенты:
Герунов Владимир Иванович, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий кафедрой анатомии, гистологии, физиологии и патологической анатомии ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина» Минсельхоза РФ, г. Омск.
Аракелян Петрос Карапетович, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий лабораторией Всероссийского научно-исследовательского института бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии), г. Омск.