За последние десятилетия предложено большое количество систем дентальных имплантатов и различных материалов для их производства [2, 3, 4]. В основном имплантаты представлены двухэтапными системами, что подразумевает под собой несколько элементов в готовой конструкции, а именно: имплантат, абатмент, фиксирующий винт (все три элемента в совокупности составляют так называемый узел сопряжения) и собственно коронку. В то же время при такой сложной конструкции создаются предпосылки для микробной контаминации внутренних структур имплантата во время клинического использования, что, в свою очередь, может приводить к инфекционно-воспалительным процессам в области имплантатов. Поэтому одним из основных требований к узлу сопряжения является его герметичность, так как условия, которые создаются в процессе эксплуатации и обслуживания имплантата, отличаются микробной агрессивностью [6]. Поэтому, даже если микроорганизм попадает внутрь имплантата, развитие вторичного инфицирования должно быть исключено. Это, в свою очередь, снижает риск развития воспалительных заболеваний, связанных с присутствием ортопедической конструкции с опорой на имплантаты в полости рта [4, 7].
Целью настоящего исследования явилось изучение герметичности конструкции «имплантат - абатмент - фиксирующий винт» в различных системах дентальных имплантатов, изготовленных из разных материалов.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
- 1. Разработка in vitro модели для изучения стерильности (инфицированности) стоматологических имплантатов in vitro.
- 2. Доказать стерильность стоматологических имплантатов ЛИКО, ЛИКО-М и НАНО-ЛИКО при экзогенном инфицировании in vitro.
- 3. Сравнение герметичности дентальных имплантатов ЛИКО, ЛИКО-М и НАНО-ЛИКО.
Материалы и методы исследований
Проводили исследование трех видов имплантатов: ЛИКО, ЛИКО-М и НАНО-ЛИКО. Проведено два типа исследований для взаимоконтроля. Исследования проводились в лаборатории микробиологии ФГУ ННИИТО Минздравсоцразвития РФ.
Для исследования брали по 10 образцов каждого наименования: имплантат, абатмент, винт крепления для всех видов систем ЛИКО, ЛИКО-М и наноструктурированного НАНО-ЛИКО.
Первая серия исследований
Предварительно проводилась стерилизация составных частей имплантатов и инструмента для их сборки (отвертки) в разобранном виде автоклавированием при 1 атм температура 135 оС в течение 30 минут. Сборку имплантатов проводили в условиях стерильного бокса с соблюдением правил асептики. Отверстие абатмента заклеивали стерильным парафином. Затем каждый имплантат в собранном виде помещали в стерильную посуду и добавляли сахарный бульон с микробной взвесью. Для инфицирования имплантатов использовали музейные культуры американской национальной коллекции: Staphylococcus aureus АТСС 25923 и Bacillus stearothermophilus АТСС 7953. Всё больше подтверждений находят факты, что золотистый стафилококк может быть важным инфекционным агентом в инициировании некоторых случаев периимплантита [6, 7]. Взвесь суточной культуры микроорганизмов готовили в стерильном физиологическом растворе по стандарту мутности ГИСК им. Л. А. Тарасевича, и в дозе 5х103 КОЕ /мл смешивали с сахарным бульоном в равных объемах. В полученную смесь помещали имплантаты на срок 1, 3, 10, 20 суток инкубирования, при температуре 37 оС, после чего имплантат извлекали стерильным пинцетом и помещали в стерильную посуду с 6 % раствором перекиси водорода на 30 минут для деконтаминации. Имплантаты ополаскивали в стерильном физиологическом растворе, раскручивали с помощью стерильной отвертки и выталкивали винт крепления абатмента в стерильную посуду с сахарным бульоном, используя стерильный стоматологический зонд, после чего термостатировали 24 часа при температуре 37 оС. Через сутки делали высев сахарного бульона на кровяной агар в чашках Петри с помощью микробиологической петли, далее чашки инкубировали 24 часа при температуре 37 оС, после чего регистрировали наличие или отсутствие роста микроорганизмов (таблица № 1). Каждый опыт повторялся не менее трех раз.
Таблица № 1
Результаты первой серии микробиологических исследований
Вид инфекта (время в сутках) |
ЛИКО (n=10) |
ЛИКО-М (n=10) |
НАНО-ЛИКО (n=10) |
Staphylococcus aureus АТСС 25923 (1 сутки) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Staphylococcus aureus АТСС 25923 (3 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Staphylococcus aureus АТСС 25923 (10 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Staphylococcus aureus АТСС 25923 (20 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Bacillus stearothermophilus АТСС 7953 (1сутки) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Bacillus stearothermophilus АТСС 7953 (3 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Bacillus stearothermophilus АТСС 7953 (10 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Bacillus stearothermophilus АТСС 7953 (20 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
n - количество исследуемых имплантатов в сборе.
Вторая серия исследований
Предварительно стерилизовали имплантат, абатмент, винт крепления, отвертку в автоклаве при 1 атм, температура 135 оС в течение 30 минут. Затем инфицировали винт крепления, используя для этого музейные культуры американской национальной коллекции: Staphylococcus aureus АТСС 25923 и Bacillus stearothermophilus АТСС 7953. Собирали имплантат с соблюдением правил асептики и проводили наружную деконтаминацию с 6 % раствором перекиси водорода в течение 30 минут. Исследуемые изделия помещали в сахарный бульон на 10 суток инкубирования при температуре 37 оС. Максимальный срок инкубирования - 10 суток, выбран на основании «Методических указаний по применению унифициорованных микробиологических методов исследования» (Приложение №1 к Приказу МЗ № 535). Через 10 суток делали высев сахарного бульона на кровяной агар в чашках Петри с помощью стерильной микробиологической петли. Чашки инкубировали в термостате при температуре 37 оС 24 часа, после чего регистрировали наличие или отсутствие роста микроорганизмов. (Таблица №2.) Каждый опыт повторялся не менее трех раз.
Таблица № 2
Результаты второй серии микробиологических исследований
Вид инфекта (время в сутках) |
ЛИКО (n=10) |
ЛИКО-М (n=10) |
НАНО-ЛИКО (n=10) |
Staphylococcus aureus АТСС 25923 (10 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
Bacillus stearothermophilus АТСС 7953 (10 суток) |
Роста нет |
Роста нет |
Роста нет |
n - количество исследуемых имплантатов в сборе.
Результаты и обсуждение
В результате проведенных исследований выявлено отсутствие роста тест-штаммов микроорганизмов в обеих сериях экспериментов. При инфицировании имплантата в собранном виде и последующей деконтаминации наружной поверхности имплантата ни в один из сроков наблюдения не обнаружено роста микроорганизмов. Максимальный срок инкубации имплантатов в 20 суток, с обоими видами микроорганизмов, позволяет сделать косвенный вывод о том, что данные виды конструкций являются герметичными, что препятствует микрофлоре полости рта проникать внутрь. При инфицировании же винта крепления во второй серии исследований также наблюдалось отсутствие роста микроорганизмов в течение 10 суток во всех испытуемых конструкциях, что также подтверждает их герметичность.
Вывод
Проведенное исследование показало герметичность систем имплантатов ЛИКО, ЛИКО-М и НАНО-ЛИКО, что в свою очередь исключает фактор вторичного инфицирования из-за присутствия ортопедических конструкций с опорой на имплантаты исследуемых систем в полости рта.
Рецензенты:
Чувилкин Владимир Иванович, доктор медицинских наук, профессор ГБОУ ВПО Московский государственный медико-стоматологический университет им. А. И. Евдокимова Минздравсоцразвития РФ, г. Москва.
Гординская Наталия Александровна, доктор медицинских наук, руководитель отделения лабораторной диагностики ФБГУ «ННИИТО» Минздравсоцразвития России, г. Н. Новгород.