Известно, что пик патологии хронических воспалительных заболеваний верхних отделов пищеварительного тракта (ВОПТ) приходится на период полового созревания. Доказано, что именно начало пубертата, к которому следует отнести I - III стадии полового развития (СПР) ребенка, является критическим периодом в становлении физических и психосоциальных функций [1; 6]. При рассмотрении пубертата как критического периода онтогенеза, сопряженного с возрастными изменениями нейро-эндокринной системы в виде проявлений вегетативной и гормональной дисрегуляции, не исключена вероятность нарушения функционального состояния эндотелия как эндокринного органа с развитием эндотелиальной дисфункции и участием эндотелиальных факторов в формировании кислотозависимых заболеваний (КЗЗ). С одной стороны, эндотелий участвует практически во всех процессах, определяемых как гомеостаз, гемостаз и воспаление; с другой - это первый орган-мишень, наиболее рано реализующий многие звенья патогенеза разной патологии, в том числе заболеваний органов пищеварения [5; 8; 9]. Результаты изучения оксида азота (NO) и эндотелина-1 (Et-1) при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, в том числе ВОПТ, малочисленны и весьма противоречивы [3; 4; 7]. Существуют единичные работы по изучению динамики эндотелиальных факторов при КЗЗ, особенно в аспекте полового созревания детей, что определяет актуальность исследований в этом направлении [2].
Цель исследования: оценить изменения оксида азота и эндотелина-1 у детей с хронической эзофагогастродуоденальной патологией при переходе от I к III СПР.
Материалы и методы исследования. Обследовано 77детей, включенных в основную группу (ОГ) в возрасте от 8 до 15 лет, страдающих хроническим гастродуоденитом в сочетании с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью (ХГД+ГЭРБ) и находившихся на лечении в педиатрическом соматическом отделении городской больницы № 20 г. Ростова-на-Дону. Верификация диагноза проводилась с использованием эзофагогастродуоденоскопии (эндоскоп Olympus P-20) с выполнением биопсии слизистой оболочки желудка и пищевода. Оценка стадии полового развития осуществлялась по критериям Tanner J.M. [10]. У всех больных определялась I-III СПР. Группу контроля (ГК) составили 28 детей I-II групп здоровья, сопоставимых по возрасту, полу и СПР с общей клинической группой. Родители пациентов были ознакомлены с целью и дизайном работы, дали информированное согласие на участие их детей в исследовании и публикацию его результатов в открытой печати.
Исследование уровня Et-1в сыворотке крови проводилось методом иммуноферментного анализа наборами фирмы BIOMEDICAGRUPPE (Германия). Уровень метаболитов NO в сыворотке крови пациентов определяли колориметрическим методом, основанным на ферментативной конверсии нитратов в нитриты нитратредуктазой, которая идет с участием оксида азота. Определение проводили наборами фирмы R&D (США). Обследование детей осуществлялось в стандартизированных условиях, утром, натощак.
Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью пакетов программы StatisticaforWindows (версия 6.1) методами параметрической и непараметрической статистики (критерии Стьюдента, Манна - Уитни). Для анализа результатов исследования также применён метод дисперсионного анализа. С помощью F-критерия устанавливалось влияние фактора на признак. Данные представлены в виде абсолютных значений (N), %, средней величины (M), ошибки средней (m), медианы (Me), а также 25 и 75 квартиля [25 % -75 %]. Достоверным считали уровень значимости p≤0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Сопоставление содержания оксида азота в основной и контрольной группах выявило тенденцию к более низкому уровню NO у больных детей (10,97±0,56 и 14,54±2,44 мкмоль/л; 0,1>p>0,05), как у мальчиков, так и у девочек (F=1,98; p=0,10) (табл. 1).
Таблица 1
Уровень оксида азота и эндотелина-1 в зависимости от фактора половой принадлежности
|
Эндотелиальные факторы |
Показатели |
Основная группа (N=77) |
Контрольная группа (N=28) |
Статистические критерии |
|||
|
Мальчики (N=42) (54,5%) |
Девочки (N=35) (45,5%) |
Мальчики (N=17) (60,7%) |
Девочки (N=11) (39,3%) |
F |
p |
||
|
Оксид азота (мкмоль/л) |
M±m |
10,82± 0,71 |
11,14± 0,91 |
13,04±1,89 |
16,85±5,59 |
1,98 |
0,10 |
|
Me |
9,73 |
10,21 |
11,76 |
13,58 |
|||
|
[25%-75%] |
8,44-12,50 |
7,73-11,76 |
7,40-13,62 |
8,18-19,56 |
|||
|
Эндотелин-1 (фмоль/мл) |
M±m |
0,45±0,06 |
0,71± 0,21 |
0,44±0,12 |
1,18±0,41 |
2,61 |
0,05 |
|
Me |
0,33 |
0,38 |
0,35 |
0,48 |
|||
|
[25%-75%] |
0,23-0,51 |
0,21-0,62 |
0,14-0,53 |
0,31-3,07 |
|||
Примечание: F - критерий Фишера; p - значимость различия.
Сравнение значений Et-1 у пациентов, страдающих КЗЗ, с данными контрольной группы выявило такую же тенденцию показателя, как и у NO, а именно: более низкое содержание Et-1 у детей основной группы в сравнении с группой контроля (0,56±0,10 и 0,73±0,18 фмоль/мл соответственно) (0,1>p>0,05). При рассмотрении зависимости Et-1 от фактора половой принадлежности установлено, что у девочек уровень эндотелина-1 выше, чем у мальчиков, как в основной группе, так и в группе контроля (F=2,61;p=0,05). Вместе с тем следует отметить, что этот показатель у больных девочек имел тенденцию к более низким значениям в сравнении с контролем (0,1>p>0,05). У мальчиков же основной группы не выявлено статистически значимых различий Et-1 в сравнении с контрольными значениями (p>0,05) (табл. 1).
Проведенное исследование изменений оксида азота у больных детей при переходе от I СПР к III СПР с учетом данных группы контроля выявило достоверную зависимость NO от динамики полового созревания (F=2,87; p=0,02) (табл. 2).
Таблица 2
Уровень оксида азота в зависимости от стадии полового развития
|
Эндотелиальные факторы |
Показатели |
Основная группа (N=77) |
Группа контроля (N=28) |
Статистические критерии |
|||||
|
I СПР (N=28) 36,4% |
II СПР (N=33) 42,9% |
IIIСПР (N=16) 20,7% |
I СПР (N=10) 35,7% |
II СПР (N=8) 28,6% |
IIIСПР (N=10) 35,7% |
F |
p |
||
|
Оксид азота (мкмоль/л) |
M±m |
10,96±0,91 |
*11,32± 0,95 |
10,26±1,04 |
10,93±7,76 |
21,57±7,76 |
12,51±2,10 |
2,87 |
0,02 |
|
Me |
10,10 |
9,91 |
10,03 |
11,03 |
13,60 |
12,51 |
|||
|
[25%-75%] |
7,72- 13,29 |
8,63- 11,94 |
7,70- 11,02 |
7,40-13,58 |
8,70-26,42 |
8,18-19,56 |
|||
Примечание: СПР - стадия полового развития; F - критерий Фишера; p - значимость различия; * - различия статистически значимы при сравнении основной группы и группы контроля во II СПР, p≤0,05.
Установлено, что во II СПР уровень оксида азота у пациентов основной группы был существенно ниже контрольных значений (11,32±0,95 и 21,51±7,76мкмоль/л соответственно, p=0,05) (табл. 2). Причем эта особенность изменений NO отмечалась как у мальчиков, так и у девочек (F=2,10; p=0,03) (табл. 3).
Таблица 3
Уровень оксида азота (мкмоль/л) в зависимости от стадии полового развития и половой принадлежности
|
СПР |
Показатели |
Основная группа (N=77) |
Группа контроля (N=28) |
Статистические критерии |
||||
|
Мальчики (N=42) (54,5%) |
Девочки (N=35) (45,5%) |
Мальчики (N=17) (60,7%) |
Девочки (N=11) (39,3%) |
F |
p |
|||
|
IСПР (N=28-ОГ; N=10-ГК) |
M±m |
10,48±0,82 |
11,53±1,75 |
11,26±1,61 |
9,63±3,95 |
2,10 |
0,03 |
|
|
Me |
9,92 |
10,28 |
11,03 |
9,63 |
||||
|
[25%-75%] |
8,44-13,58 |
6,96-12,12 |
7,40-14,48 |
5,68-13,58 |
||||
|
II СПР (N=33-ОГ; N=8-ГК) |
M±m |
*11,61± 1,37 |
**10,89± 1,27 |
15,75± 5,67 |
31,26± 19,47 |
|||
|
Me |
9,54 |
10,28 |
13,58 |
15,34 |
||||
|
[25%-75%] |
8,81-12,12 |
8,44-11,02 |
8,96-13,62 |
8,44-70,00 |
||||
|
III СПР (N=16-ОГ; N=10-ГК) |
M±m |
9,59±1,00 |
10,93±1,88 |
13,21±3,25 |
12,05±2,98 |
|||
|
Me |
9,55 |
10,03 |
12,51 |
11,63 |
||||
|
[25%-75%] |
7,34-11,39 |
7,89-11,02 |
8,74-17,68 |
8,18-19,56 |
||||
Примечание: СПР - стадия полового развития; F - критерий Фишера; p - значимость различия; * - различия статистически значимы при сравнении мальчиков основной группы и группы контроля во II СПР, p≤0,05; ** - различия статистически значимы при сравнении девочек основной группы и группы контроля во II СПР, p≤0,05.
Установлено, что на фоне стабильных значений NO у детей с КЗЗ при переходе от I СПР к III СПР (10,96±0,91;10,26±1,04; 10,26±1,04мкмоль/л, p>0,05) Et-1 имел максимальный уровень во II СПР (p=0,03 при сравнении I и II СПР; p=0,04 при сравнении I и III СПР) (табл. 4).
Таблица 4
Уровень эндотелина-1 в зависимости от стадии полового развития
|
Эндотелиальные факторы |
Показатели |
Основная группа (N=77) |
Группа контроля (N=28) |
Статистические критерии |
|||||
|
I СПР (N=28) 36,4% |
II СПР (N=33) 42,9% |
IIIСПР (N=16) 20,7% |
I СПР (N=10) 35,7% |
II СПР (N=8) 28,6% |
IIIСПР (N=10) 35,7% |
F |
p |
||
|
Эндотелин-1 (фмоль/мл) |
M±m |
0,56± 0,07 |
*0,64± 0,23 |
**0,42±0,10 |
0,63± 0,28 |
0,52± 0,23 |
0,99 ±0,40 |
0,53 |
0,74 |
|
Me |
0,43 |
0,34 |
0,26 |
0,32 |
0,35 |
0,49 |
|||
|
[25%-75%] |
0,28- 0,74 |
0,19- 0,49 |
0,18- 0,45 |
0,15-0,58 |
0,19-0,45 |
0,35-0,56 |
|||
Примечание: СПР - стадия полового развития; F - критерий Фишера; p - значимость различия; * - различия статистически значимы при сравнении больных в I и II СПР, p≤0,05; ** - различия статистически значимы при сравнении больных в I и III СПР, p≤0,05.
Наибольший уровень Et-1 во II СПР определялся у девочек основной группы в сравнении с мальчиками (1,03±0,55 и 0,36±0,04фмоль/мл соответственно девочкам и мальчикам, p=0,05). Также следует отметить разнонаправленность изменений содержания Et-1 у девочек основной и контрольной групп во II и III СПР, а именно: максимальные значения показателя у больных определялись во II СПР (p=0,05), а у девочек из группы контроля - в III СПР (p=0,05) (табл. 5).
Таблица 5
Уровень эндотелина-1 (фмоль/мл) в зависимости от стадии полового развития и половой принадлежности
|
СПР |
Показатели |
Основная группа (N=77) |
Группа контроля (N=28) |
Статистические критерии |
|||
|
Мальчики (N=42) (54,5%) |
Девочки (N=35) (45,5%) |
Мальчики (N=17) (60,7%) |
Девочки (N=11) (39,3%) |
F |
p |
||
|
I СПР (N=28) |
M±m |
0,54± 0,12 |
**0,58± 0,08 |
0,37± 0,09 |
1,69± 1,38 |
0,535 |
0,749 |
|
Me |
0,32 |
0,55 |
0,32 |
1,69 |
|||
|
[25%-75%] |
0,24-0,66 |
0,41-0,74 |
0,14-0,56 |
0,31-3,07 |
|||
|
II СПР (N=33) |
M±m |
*0,36± 0,04 |
***1,03± 0,55 |
0,63±0,38 |
0,34± 0,05 |
||
|
Me |
0,35
|
0,25
|
0,38
|
0,32
|
|||
|
[25%-75%] |
0,25- 0,50 |
0,14- 0,40 |
0,11- 0,46 |
0,27- 0,43 |
|||
|
III СПР (N=16) |
M±m |
0,46±0,17
|
****0,38 ±0,11 |
0,36±0,09 |
1,42±0,63 |
||
|
Me |
0,20 |
0,33 |
0,37 |
0,51 |
|||
|
[25%-75%] |
0,16-0,72 |
0,20-0,40 |
0,25-0,47 |
0,48-3,29 |
|||
Примечание: СПР - стадия полового развития; F - критерий Фишера; p - значимость различия; * - различия статистически значимы при сравнении больных мальчиков и девочек во II СПР, p≤0,05; ** - различия статистически значимы при сравнении больных девочек в I и II СПР, p≤0,05; *** - различия статистически значимы при сравнении больных девочек с контрольными значениями во II СПР, p≤0,05; **** - различия статистически значимы при сравнении больных девочек с контрольными значениями во III СПР, p≤0,05.
Таким образом, анализ результатов выявил ряд существенных фактов. Во-первых, доказана общая тенденция к снижению уровня NO и Et-1 у больных с хроническим гастродуоденитом в сочетании с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью в сравнении с контролем, что свидетельствует об участии эндотелиальных факторов в формировании хронической эзофагогастродуоденальной патологии. Во-вторых, установлена разнонаправленность изменений NO и Et-1 во II СПР в виде пониженных значений оксида азота и повышенных уровней эндотелина-1. Полученные результаты, по-видимому, отражают состояние определенной «уязвимости» детей, находящихся во II СПР, в аспекте возможного формирования более тяжелых морфологических вариантов заболевания, учитывая известные данные об агрессивно-протективных эффектах NO и Et-1 на желудочно-кишечный тракт [8]. В-третьих, установлено, что во II СПР изменения Et-1 в отличие от NO зависели от фактора половой принадлежности. Данное обстоятельство, вероятно, связано с особенностями процессов полового созревания у мальчиков и девочек и сопряженными с ним изменениями гормональной ситуации, приводящими к гетерохронному характеру развития эндокринной системы, в том числе и эндотелия как эндокринного органа.
Выводы
- 1. Установлена зависимость изменений уровня NO и Et-1 у детей с КЗЗ в сравнении с группой контроля от стадий полового созревания и фактора половой принадлежности, что указывает на определённое участие эндотелиальных факторов в формировании хронической воспалительной патологии ВОПТ на этапе становления пубертата.
- 2. Наиболее существенные проявления эндотелиальной дисфункции обнаружены у больных детей во II СПР, что может быть расценено как фактор риска формирования более тяжелых морфологических вариантов патологии именно в этот период становления пубертата.
Рецензенты:
Афонин Александр Алексеевич, д.м.н., профессор, зам. директора по научной работе, ФГБУ «РНИИАП» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону.
Кравченко Лариса Вахтанговна, д.м.н., ведущий научный сотрудник отдела педиатрии, ФГБУ «РНИИАП» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону.