Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

CHANGES OF THE IMMUNE STATUS AT PATIENTS WITH DAMAGES SPLEENS DEPENDING ON THE EXECUTED OPERATION

Maslyakov V.V. 1 Kirichuk V.F. 1 Gromov M.S. 1 Polyarov А.V. 1
1 The Saratov branch of the Samara medical institute «REAVIZ»
Studying of the immune status at patients after lien excision, autolientransplatacion and operations with lien conservation in the nearest and remote postoperative period is spent. As a result of research it is established that in the nearest postoperative period irrespective of the executed operation changes in a humoral link of system of immunity become perceptible. In a cellular link of system of immunity in the nearest postoperative period there is a reduction of quantity mature T-limfotsitov, T-helperov, T-killers. In the remote postoperative period in the immune status of the operated patients after excision of a lien concerning a lien trauma there are changes in the humoral link, concentration IgG expressed in depression and IgM, total of a complement and it С3- and С4-frakc. In turn, operations don´t cause changes in the immune status. In a cellular link of immunity depression of quantity mature T-limfotsitov, T-helperov and T-killers is registered. At the same time rising of quantity of T-cytotoxic lymphocytes, V-lymphocytes becomes perceptible. After autolientransplatacion the quantity mature T-limfotsitov, T-helperov decreases. Operations with lien conservation don´t lead to changes in a cellular link of system of immunity.
a spleen
the immune status
Введение. Повреждения селезенки встречаются в 20-40 % наблюдений [4]. Оперативное лечение разрыва селезенки выполняется на фоне острой кровопотери, и такие факторы, как неудобство анатомического расположения органа, сложности в гемостазе, привели к стереотипу в действиях большинства хирургов, выбирающих в 99 % наблюдений спленэктомию, что не отвечает требованиям современной хирургии [3]. После сообщения в 1952 г. King и Shumacher о фатальном постспленэктомическом сепсисе принятая доктрина, диктующая спленэктомию поврежденной селезенки, впервые подверглась критике. С этого момента расширилось изучение иммунологических и физиологических функций селезенки в свете постспленэктомических осложнений [1,2,3,4]. В настоящее время все клинические проявления, в той или иной мере связанные со спленэктомией, объединены в синдром постспленэктомического гипоспленизма [3,6]. Восприимчивость к инфекции в раннем послеоперационном периоде, по разным данным, проявляется развитием гнойно-воспалительных осложнений в 13-30 % наблюдений с летальностью 16-30 % [2,3,4]. Среди гнойно-воспалительных осложнений преобладают плевро-легочные, реже развиваются раневые и внутрибрюшные абсцессы [4]. В отдаленном периоде серьезную опасность представляет постспленэктомический сепсис - крайняя форма проявления инфекционного процесса с быстрым прогрессированием и высокой летальностью (50-70 %), а от возникновения первых симптомов до летального исхода проходит несколько часов [6]. С целью предотвращения подобных осложнений в настоящее время предложены различные виды органосохраняющих операций, а в случаях невозможности их применения - аутолиентрансплантация.

Цель исследования - изучить влияние выполненной операции при травме селезенки на изменения иммунного статуса в ближайшем и отдаленном послеоперационном периодах.

Материалы и методы. В работе проведен анализ изменений в иммунном статусе 201 пациента с закрытыми травмами селезенки в возрасте от 20 до 45 лет.

 При травматических повреждениях селезенки в клинике выполнялись следующие операции: спленэктомия, спленэктомия с аутолиентрансплантацией и органосохраняющие операции (ОСО) с использованием лазерной техники. Аутолиентрансплантация использовалась у 89 пациентов в тех случаях, когда по различным причинам выполнить органосохраняющие операции не представлялось возможным. Во время операции после спленэктомии фрагменты селезенки размером 1,5 см3 имплантировали в ткань большого сальника, предварительно отмыв их от крови в физиологическом растворе и удалив остатки капсулы.

Подсчет лейкоцитов и тромбоцитов выполнялся в счетной камере Горяева. Для исследования производился забор 0,02 мл капиллярной крови, которая затем разбавлялась  0,4 мл уксусной кислоты. Окраска мазков осуществлялась с помощью метиленового синего. Обнаружение телец Howell - Iolly выполнялась с помощью люминесцентного микроскопа.

При изучении влияния выбранной операции на иммунный ответ организма определялись следующие показатели - субпопуляции Т- и В-лимфоцитов: количество в периферической крови лимфоцитов, несущих медиаторы CD3 (зрелые Т-лимфоциты); CD4 (Т-хелперы); CD8 (цитотоксические Т-клетки); CD16 (натуральные киллеры); CD20 (В-клетки), а также соотношение CD4 / CD8. Изучение названных показателей выполнялось с помощью проточной цитофлюрометрии с моноклональными антителами. Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводилось турбодидометрическим методом. Для этого исследования применяли 3,5 % раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 6000 Д (США) в фосфатном буфере (pH 8,4). Результаты учитывали на спектрометре СФ-46 при длине волны 450 нм и выражали в условных единицах. Состояние активности комплемента как фактора неспецифической защиты и связующего звена между иммунной системой и системой гемостаза определялось по классическому методу 50 % гемолиза (С1Н50) уровню С3-фракции, определяемого с помощью 50 % гемолиза с эритроцитами кролика (С31 Н50). Общее содержание IgG, M, A - по методу простой радиальной иммуннодиффузии по Mancini и соавторам [5], а также IgE, определяемый по методу ИФА.

Результаты и их обсуждение. При исследовании лейкограммы в динамике у больных, оперированных по поводу изолированной травмы селезенки, установлено, что в момент поступления количество лейкоцитов было повышено до 14,3 ± 0,6х1012/л у 115 человек (78,2 %). При этом значительных и достоверных изменений в лейкограмме у данных пациентов не отмечено. При исследовании показателей лейкограммы на первые послеоперационные сутки отмечено повышение количества лейкоцитов у оперированных больных всех групп. Кроме того, по сравнению с показателями группы сравнения отмечается статистически достоверное относительное повышение количества палочкоядерных и сегментоядерных форм нейтрофильных лейкоцитов (p<0,05). Другие виды лейкоцитов соответствуют физиологической норме. Помимо роста относительного количества лейкоцитов, отмечается повышение абсолютного количества различных видов лейкоцитов. Так, в группе здоровых людей количество палочкоядерных лейкоцитов составило 12х1010/л, в группе пациентов после спленэктомии - 67,8х1010/л, перенесших аутолиентрансплантацию - 96х1010/л. Следовательно, увеличение общего количества лейкоцитов и палочкоядерных форм нейтрофилов в ближайшем послеоперационном периоде можно связать с влиянием на организм операционной травмы. Изменения лейкограммы больных на третьи послеоперационные сутки были аналогичными по сравнению с первыми сутками. Исходя из этого можно предположить, что селезенка оказывает определенное влияние на развитие белого ростка костного мозга и ее удаление приводит к структурным изменениям в морфологическом составе лейкоцитов. Это подтверждается результатами, полученными на пятые послеоперационные сутки, когда в группе больных с сохраненной селезенкой отмечалось восстановление общего количества лейкоцитов крови, а также наблюдалось снижение числа палочкоядерных нейтрофилов. В то же время в группе больных с удаленной селезенкой сохранялся лейкоцитоз, ядерный нейтрофильный сдвиг влево и лимфоцитоз. У пациентов после аутолиентрансплантации зарегистрировано восстановление количества лейкоцитов в крови, но сохранялся ядерный нейтрофильный сдвиг влево. При анализе результатов, полученных на седьмые послеоперационные сутки, отмечено, что общее количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула в группе больных с сохраненной селезенкой соответствуют физиологической норме. В группе больных после спленэктомии с аутолиентрансплантацией результаты были аналогичными на пятые сутки после операции. У пациентов после спленэктомии отмечаются физиологически нормальные показатели общего количества лейкоцитов, вместе с тем регистрируется палочкоядерный лейкоцитоз и лимфопения. Результаты исследований, наблюдаемые на десятые послеоперационные сутки, не отличались от аналогичных данных седьмых суток. Изменения в лейкоцитарной формуле оперированных больных не сопровождались развитием гнойно-септических осложнений. При анализе показателей лейкограммы в отдаленном послеоперационном периоде установлено, что у больных после органосохраняющих операций и аутолиентрансплантации изменений не отмечено. У пациентов после спленэктомии установлено статистически достоверное уменьшение числа моноцитов как по сравнению с физиологической нормой, так и с результатами, полученными в группе сравнения. Однако отмечено повышение количества палочкоядерных лимфоцитов и базофилов.

При изучении гуморального и клеточного иммунитета в ближайшем послеоперационном периоде установлено, что соответствующие показатели у больных после органосохраняющих операций на селезенке в первые послеоперационные сутки не отличались от данных, полученных у относительно здоровых людей. На третьи послеоперационные сутки у пациентов после органосохраняющих операций на поврежденной селезенке показатели гуморального звена системы иммунитета не изменялись и соответствовали полученным в группе сравнения. Однако отмечено статистически достоверное снижение как процентного, так и абсолютного содержания зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и натуральных киллеров (клеточное звено). Результаты гуморального и клеточного звеньев системы иммунитета на пятые послеоперационные сутки не отличались от полученных на третьи сутки. На седьмые послеоперационные сутки у пациентов после органосохраняющих операций отмечалось существенное снижение всех показателей клеточного звена системы иммунитета и некоторых показателей гуморального звена системы гемостаза, таких как общее количество комплемента, его С3- и С4-фракций. На десятые послеоперационные сутки показатели гуморального и клеточного звеньев системы иммунитета у пациентов после органосохраняющих операций на селезенке не отличались от данных, полученных на седьмые послеоперационные сутки. У пациентов после спленэктомии с аутолиентрансплантацией на первые послеоперационные сутки иммунный статус не претерпевал изменений по сравнению с группой относительно здоровых людей. На третьи послеоперационные сутки изменений в показателях гуморального звена системы иммунитета не выявлено (аналогичны результатам группы сравнения). Однако в показателях клеточного звена происходит статистически достоверное уменьшение, по сравнению с группой сравнения, количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-натуральных киллеров. На пятые послеоперационные сутки полученные результаты практически не отличались от результатов третьих суток. На седьмые послеоперационные сутки в гуморальном звене системы иммунитета отмечается статистически достоверное по сравнению с данными группы сравнения снижение показателей общего количества комплемента, его С3- и С4-фракций. Остальные показатели не отличались от соответствующих в группе сравнения. В показателях клеточного звена системы иммунитета выявлено статистически достоверное снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-натуральных киллеров. Показатели иммунного статуса пациентов анализируемой группы, полученные на десятые послеоперационные сутки, были идентичны результатам, полученным на седьмые послеоперационные сутки. В группе больных, перенесших спленэктомию, в первые послеоперационные сутки отсутствуют изменения как в клеточном, так и в гуморальном звеньях системы иммунного статуса. На третьи послеоперационные сутки показатели гуморального звена иммунитета также не претерпевают изменений. Однако зарегистрировано снижение абсолютного содержания зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и натуральных киллеров. На пятые послеоперационные сутки отмечаются изменения в гуморальном звене системы гемостаза, проявляющиеся в статистически достоверном снижении IgA, IgE, общего количества комплемента и его С3- и С4-фракций. Остальные показатели гуморального звена системы гемостаза соответствовали результатам, полученным в группе сравнения. В клеточном звене отмечается статистически достоверное снижение относительно группы сравнения зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-натуральных киллеров. Результаты исследования иммунного статуса пациентов после спленэктомии, полученные на седьмые и десятые послеоперационные сутки, были идентичны результатам, полученным на пятые послеоперационные сутки.

При изучении течения ближайшего послеоперационного периода у больных, оперированных на поврежденной селезенке, было зарегистрировано 49 (32,8 %) осложнений, причем самыми распространенными из них оказались плевро-легочные. Наиболее частым осложнением в этой группе оказалась пневмония. Кроме того, зарегистрированы случаи развития экссудативных плевритов на стороне поражения. В трех сравниваемых группах отмечены осложнения гнойно-септического характера: перитониты, абсцессы брюшной полости и нагноения послеоперационной раны, что, возможно, связано с проявлением иммунодепрессии. Возникновение перитонита во всех наблюдениях зависело от сопутствующих повреждений кишечника. В течение ближайшего послеоперационного периода трем пациентам выполнена релапаротомия. В двух наблюдениях через 3 и 5 часов после спленэктомии зарегистрировано кровотечение из перевязанных сосудов селезенки; в другом - через 10 часов выявлен ненадежный гемостаз после лазеркоагуляции раны в воротах органа. При экстренном повторном вмешательстве произведена спленэктомия. Среди прочих осложнений отмечено обострение хронического пиелонефрита у пациента, перенесшего спленэктомию. В раннем послеоперационном периоде у 126 (84,5 %) больных отмечено повышение температуры до 38-39 оС. При этом не наблюдалось какой-либо взаимосвязи с видом выполненной операции. Температурная реакция сохранялась в среднем 5-6 дней, затем самопроизвольно возвращалась к норме. Данное осложнение не оказывало заметного влияния на течение ближайшего послеоперационного периода. В настоящее время распространено мнение, что такую реакцию можно объяснить как развитием флеботромбоза в селезеночной вене, так и микротравмой хвоста поджелудочной железы или ушибом легкого с одноименной стороны. Мы полагаем, что это может быть связано с утратой селезенкой функции разрушения эритроцитов и в то же время массивным разрушением их в других органах ретикулоэндотелиальной системы. Из 149 оперированных пациентов с закрытыми повреждениями селезенки умерли 34 (22,8 %). Основной причиной летальных исходов у пострадавших был шок - 26 случаев (17,4 %). Среди других серьезных причин, приведших к летальным исходам, в 6 наблюдениях (4 %) следует отметить ЧМТ. Из осложнений, приведших к летальным исходам при закрытых повреждениях селезенки, можно отметить развившийся в послеоперационном периоде перитонит, ставший причиной смерти 4 пациентов (2,6 %) (в 3 наблюдениях после спленэктомии и в 1 - после лазеркоагуляции). Во всех случаях перитонит явился следствием сопутствующих повреждений кишечника. К смерти пациента после органосохраняющей операции привело не снижение иммунной защиты, а, по всей вероятности, врачебная ошибка.

В ходе исследования показателей иммунного статуса у больных после различных хирургических вмешательств в отдаленном послеоперационном периоде были получены следующие результаты. В группе пациентов после спленэктомии происходит статистически достоверное снижение (по отношению к группе сравнения) концентрации IgG и IgM, общего количества комплемента и его С3- и С4-фракций. В клеточном звене иммунитета зарегистрировано статистически достоверное снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечено повышение количества В-лимфоцитов. При анализе клинических данных установлено, что в группе пациентов с ранее удаленной селезенкой наблюдается развитие заболеваний, которые могут быть взаимосвязаны с изменениями в иммунном статусе: склонность к частым «простудным заболеваниям» - в 42,1 % наблюдений, вовлечение в патологический процесс легких и бронхов - в 42 %, склонность к гнойничковым заболеваниям кожи - в 12,2 %. После аутолиентрансплантации в отдаленном послеоперационном периоде (по отношению к группе сравнения) обнаружено снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов. Однако зарегистрированные различия показателей оказались статистически недостоверными. При анализе течения отдаленного послеоперационного периода у лиц, ранее перенесших аутолиентрансплантацию, установлена склонность к частым «простудным заболеваниям» в   6 % случаев, вовлечение в патологический процесс легких и бронхов - в 32 %, склонность к гнойничковым заболеваниям кожи - в 8 % наблюдений. Результаты исследования гуморального и клеточного звеньев системы иммунитета, полученные в группе пациентов, перенесших органосохраняющие вмешательства при травме селезенки, в отдаленном послеоперационном периоде практически не отличаются от аналогичных результатов группы сравнения (p>0,05). В то же время установлено, что в данной группе больных склонность к частым «простудным заболеваниям» отмечена в 3,3 % случаев, вовлечение в патологический процесс легких и бронхов - у 13,3 % пациентов, склонности к гнойничковым заболеваниям кожи у них не выявлено.

Таким образом, установлено, что селезенке принадлежит важная роль в иммунном статусе организма и ее удаление ведет к серьезным нарушениям в этой системе. Очевидна необходимость выполнения органосохраняющих операций при травме селезенки. При невозможности такого вмешательства предпочтительна аутолиентрансплантация, несмотря на то, что она не служит полноценной альтернативой органосохраняющей операции. Учитывая расстройства, выявленные в иммунном статусе пациентов после спленэктомии и приводящие к различным осложнениям, следует рекомендовать пожизненное диспансерное наблюдение оперированных у хирурга.

Выводы

  1. В ближайшем послеоперационном периоде независимо от выполненной операции отмечаются изменения в гуморальном звене системы иммунитета, проявляющиеся в снижении количества IgA, IgE, общего количества комплимента и его С3- и С4-фракций. В клеточном звене системы иммунитета в ближайшем послеоперационном периоде происходит уменьшение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-киллеров. Характер выполненной операции не влияет на выявленные изменения.
  2. В отдаленном послеоперационном периоде в иммунном статусе оперированных пациентов после спленэктомии по поводу травмы селезенки происходят изменения в гуморальном звене, выражающиеся в снижении концентрации IgG и IgM, общего количества комплемента и его С3- и С4-фракций. В свою очередь, органосохраняющие операции не вызывают изменений в иммунном статусе. В клеточном звене иммунитета зарегистрировано снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечается повышение количества Т-цитотоксических лимфоцитов, В-лимфоцитов. После аутолиентрансплантации снижается количество зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов. Органосохраняющие операции не приводят к изменениям в клеточном звене системы иммунитета.
  3. Изменения в иммунном статусе организма становятся причиной развития осложнений в отдаленном послеоперационном периоде после спленэктомии в 42,1 %, после аутолиентрансплантации в 13,3 %.

Рецензенты:

  • Пучиньян Д. М., доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора по научной работе ФГБУ «Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии» Минздравсоцразвития России, г. Саратов.
  • Елисеев Ю. Ю., доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой гигиены и экологии ГБОУ ВПО Саратовский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, г. Саратов.