Цель исследования - изучить влияние выполненной операции при травме селезенки на изменения иммунного статуса в ближайшем и отдаленном послеоперационном периодах.
Материалы и методы. В работе проведен анализ изменений в иммунном статусе 201 пациента с закрытыми травмами селезенки в возрасте от 20 до 45 лет.
При травматических повреждениях селезенки в клинике выполнялись следующие операции: спленэктомия, спленэктомия с аутолиентрансплантацией и органосохраняющие операции (ОСО) с использованием лазерной техники. Аутолиентрансплантация использовалась у 89 пациентов в тех случаях, когда по различным причинам выполнить органосохраняющие операции не представлялось возможным. Во время операции после спленэктомии фрагменты селезенки размером 1,5 см3 имплантировали в ткань большого сальника, предварительно отмыв их от крови в физиологическом растворе и удалив остатки капсулы.
Подсчет лейкоцитов и тромбоцитов выполнялся в счетной камере Горяева. Для исследования производился забор 0,02 мл капиллярной крови, которая затем разбавлялась 0,4 мл уксусной кислоты. Окраска мазков осуществлялась с помощью метиленового синего. Обнаружение телец Howell - Iolly выполнялась с помощью люминесцентного микроскопа.
При изучении влияния выбранной операции на иммунный ответ организма определялись следующие показатели - субпопуляции Т- и В-лимфоцитов: количество в периферической крови лимфоцитов, несущих медиаторы CD3 (зрелые Т-лимфоциты); CD4 (Т-хелперы); CD8 (цитотоксические Т-клетки); CD16 (натуральные киллеры); CD20 (В-клетки), а также соотношение CD4 / CD8. Изучение названных показателей выполнялось с помощью проточной цитофлюрометрии с моноклональными антителами. Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводилось турбодидометрическим методом. Для этого исследования применяли 3,5 % раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 6000 Д (США) в фосфатном буфере (pH 8,4). Результаты учитывали на спектрометре СФ-46 при длине волны 450 нм и выражали в условных единицах. Состояние активности комплемента как фактора неспецифической защиты и связующего звена между иммунной системой и системой гемостаза определялось по классическому методу 50 % гемолиза (С1Н50) уровню С3-фракции, определяемого с помощью 50 % гемолиза с эритроцитами кролика (С31 Н50). Общее содержание IgG, M, A - по методу простой радиальной иммуннодиффузии по Mancini и соавторам [5], а также IgE, определяемый по методу ИФА.
Результаты и их обсуждение. При исследовании лейкограммы в динамике у больных, оперированных по поводу изолированной травмы селезенки, установлено, что в момент поступления количество лейкоцитов было повышено до 14,3 ± 0,6х1012/л у 115 человек (78,2 %). При этом значительных и достоверных изменений в лейкограмме у данных пациентов не отмечено. При исследовании показателей лейкограммы на первые послеоперационные сутки отмечено повышение количества лейкоцитов у оперированных больных всех групп. Кроме того, по сравнению с показателями группы сравнения отмечается статистически достоверное относительное повышение количества палочкоядерных и сегментоядерных форм нейтрофильных лейкоцитов (p<0,05). Другие виды лейкоцитов соответствуют физиологической норме. Помимо роста относительного количества лейкоцитов, отмечается повышение абсолютного количества различных видов лейкоцитов. Так, в группе здоровых людей количество палочкоядерных лейкоцитов составило 12х1010/л, в группе пациентов после спленэктомии - 67,8х1010/л, перенесших аутолиентрансплантацию - 96х1010/л. Следовательно, увеличение общего количества лейкоцитов и палочкоядерных форм нейтрофилов в ближайшем послеоперационном периоде можно связать с влиянием на организм операционной травмы. Изменения лейкограммы больных на третьи послеоперационные сутки были аналогичными по сравнению с первыми сутками. Исходя из этого можно предположить, что селезенка оказывает определенное влияние на развитие белого ростка костного мозга и ее удаление приводит к структурным изменениям в морфологическом составе лейкоцитов. Это подтверждается результатами, полученными на пятые послеоперационные сутки, когда в группе больных с сохраненной селезенкой отмечалось восстановление общего количества лейкоцитов крови, а также наблюдалось снижение числа палочкоядерных нейтрофилов. В то же время в группе больных с удаленной селезенкой сохранялся лейкоцитоз, ядерный нейтрофильный сдвиг влево и лимфоцитоз. У пациентов после аутолиентрансплантации зарегистрировано восстановление количества лейкоцитов в крови, но сохранялся ядерный нейтрофильный сдвиг влево. При анализе результатов, полученных на седьмые послеоперационные сутки, отмечено, что общее количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула в группе больных с сохраненной селезенкой соответствуют физиологической норме. В группе больных после спленэктомии с аутолиентрансплантацией результаты были аналогичными на пятые сутки после операции. У пациентов после спленэктомии отмечаются физиологически нормальные показатели общего количества лейкоцитов, вместе с тем регистрируется палочкоядерный лейкоцитоз и лимфопения. Результаты исследований, наблюдаемые на десятые послеоперационные сутки, не отличались от аналогичных данных седьмых суток. Изменения в лейкоцитарной формуле оперированных больных не сопровождались развитием гнойно-септических осложнений. При анализе показателей лейкограммы в отдаленном послеоперационном периоде установлено, что у больных после органосохраняющих операций и аутолиентрансплантации изменений не отмечено. У пациентов после спленэктомии установлено статистически достоверное уменьшение числа моноцитов как по сравнению с физиологической нормой, так и с результатами, полученными в группе сравнения. Однако отмечено повышение количества палочкоядерных лимфоцитов и базофилов.
При изучении гуморального и клеточного иммунитета в ближайшем послеоперационном периоде установлено, что соответствующие показатели у больных после органосохраняющих операций на селезенке в первые послеоперационные сутки не отличались от данных, полученных у относительно здоровых людей. На третьи послеоперационные сутки у пациентов после органосохраняющих операций на поврежденной селезенке показатели гуморального звена системы иммунитета не изменялись и соответствовали полученным в группе сравнения. Однако отмечено статистически достоверное снижение как процентного, так и абсолютного содержания зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и натуральных киллеров (клеточное звено). Результаты гуморального и клеточного звеньев системы иммунитета на пятые послеоперационные сутки не отличались от полученных на третьи сутки. На седьмые послеоперационные сутки у пациентов после органосохраняющих операций отмечалось существенное снижение всех показателей клеточного звена системы иммунитета и некоторых показателей гуморального звена системы гемостаза, таких как общее количество комплемента, его С3- и С4-фракций. На десятые послеоперационные сутки показатели гуморального и клеточного звеньев системы иммунитета у пациентов после органосохраняющих операций на селезенке не отличались от данных, полученных на седьмые послеоперационные сутки. У пациентов после спленэктомии с аутолиентрансплантацией на первые послеоперационные сутки иммунный статус не претерпевал изменений по сравнению с группой относительно здоровых людей. На третьи послеоперационные сутки изменений в показателях гуморального звена системы иммунитета не выявлено (аналогичны результатам группы сравнения). Однако в показателях клеточного звена происходит статистически достоверное уменьшение, по сравнению с группой сравнения, количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-натуральных киллеров. На пятые послеоперационные сутки полученные результаты практически не отличались от результатов третьих суток. На седьмые послеоперационные сутки в гуморальном звене системы иммунитета отмечается статистически достоверное по сравнению с данными группы сравнения снижение показателей общего количества комплемента, его С3- и С4-фракций. Остальные показатели не отличались от соответствующих в группе сравнения. В показателях клеточного звена системы иммунитета выявлено статистически достоверное снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-натуральных киллеров. Показатели иммунного статуса пациентов анализируемой группы, полученные на десятые послеоперационные сутки, были идентичны результатам, полученным на седьмые послеоперационные сутки. В группе больных, перенесших спленэктомию, в первые послеоперационные сутки отсутствуют изменения как в клеточном, так и в гуморальном звеньях системы иммунного статуса. На третьи послеоперационные сутки показатели гуморального звена иммунитета также не претерпевают изменений. Однако зарегистрировано снижение абсолютного содержания зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и натуральных киллеров. На пятые послеоперационные сутки отмечаются изменения в гуморальном звене системы гемостаза, проявляющиеся в статистически достоверном снижении IgA, IgE, общего количества комплемента и его С3- и С4-фракций. Остальные показатели гуморального звена системы гемостаза соответствовали результатам, полученным в группе сравнения. В клеточном звене отмечается статистически достоверное снижение относительно группы сравнения зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-натуральных киллеров. Результаты исследования иммунного статуса пациентов после спленэктомии, полученные на седьмые и десятые послеоперационные сутки, были идентичны результатам, полученным на пятые послеоперационные сутки.
При изучении течения ближайшего послеоперационного периода у больных, оперированных на поврежденной селезенке, было зарегистрировано 49 (32,8 %) осложнений, причем самыми распространенными из них оказались плевро-легочные. Наиболее частым осложнением в этой группе оказалась пневмония. Кроме того, зарегистрированы случаи развития экссудативных плевритов на стороне поражения. В трех сравниваемых группах отмечены осложнения гнойно-септического характера: перитониты, абсцессы брюшной полости и нагноения послеоперационной раны, что, возможно, связано с проявлением иммунодепрессии. Возникновение перитонита во всех наблюдениях зависело от сопутствующих повреждений кишечника. В течение ближайшего послеоперационного периода трем пациентам выполнена релапаротомия. В двух наблюдениях через 3 и 5 часов после спленэктомии зарегистрировано кровотечение из перевязанных сосудов селезенки; в другом - через 10 часов выявлен ненадежный гемостаз после лазеркоагуляции раны в воротах органа. При экстренном повторном вмешательстве произведена спленэктомия. Среди прочих осложнений отмечено обострение хронического пиелонефрита у пациента, перенесшего спленэктомию. В раннем послеоперационном периоде у 126 (84,5 %) больных отмечено повышение температуры до 38-39 оС. При этом не наблюдалось какой-либо взаимосвязи с видом выполненной операции. Температурная реакция сохранялась в среднем 5-6 дней, затем самопроизвольно возвращалась к норме. Данное осложнение не оказывало заметного влияния на течение ближайшего послеоперационного периода. В настоящее время распространено мнение, что такую реакцию можно объяснить как развитием флеботромбоза в селезеночной вене, так и микротравмой хвоста поджелудочной железы или ушибом легкого с одноименной стороны. Мы полагаем, что это может быть связано с утратой селезенкой функции разрушения эритроцитов и в то же время массивным разрушением их в других органах ретикулоэндотелиальной системы. Из 149 оперированных пациентов с закрытыми повреждениями селезенки умерли 34 (22,8 %). Основной причиной летальных исходов у пострадавших был шок - 26 случаев (17,4 %). Среди других серьезных причин, приведших к летальным исходам, в 6 наблюдениях (4 %) следует отметить ЧМТ. Из осложнений, приведших к летальным исходам при закрытых повреждениях селезенки, можно отметить развившийся в послеоперационном периоде перитонит, ставший причиной смерти 4 пациентов (2,6 %) (в 3 наблюдениях после спленэктомии и в 1 - после лазеркоагуляции). Во всех случаях перитонит явился следствием сопутствующих повреждений кишечника. К смерти пациента после органосохраняющей операции привело не снижение иммунной защиты, а, по всей вероятности, врачебная ошибка.
В ходе исследования показателей иммунного статуса у больных после различных хирургических вмешательств в отдаленном послеоперационном периоде были получены следующие результаты. В группе пациентов после спленэктомии происходит статистически достоверное снижение (по отношению к группе сравнения) концентрации IgG и IgM, общего количества комплемента и его С3- и С4-фракций. В клеточном звене иммунитета зарегистрировано статистически достоверное снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечено повышение количества В-лимфоцитов. При анализе клинических данных установлено, что в группе пациентов с ранее удаленной селезенкой наблюдается развитие заболеваний, которые могут быть взаимосвязаны с изменениями в иммунном статусе: склонность к частым «простудным заболеваниям» - в 42,1 % наблюдений, вовлечение в патологический процесс легких и бронхов - в 42 %, склонность к гнойничковым заболеваниям кожи - в 12,2 %. После аутолиентрансплантации в отдаленном послеоперационном периоде (по отношению к группе сравнения) обнаружено снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов. Однако зарегистрированные различия показателей оказались статистически недостоверными. При анализе течения отдаленного послеоперационного периода у лиц, ранее перенесших аутолиентрансплантацию, установлена склонность к частым «простудным заболеваниям» в 6 % случаев, вовлечение в патологический процесс легких и бронхов - в 32 %, склонность к гнойничковым заболеваниям кожи - в 8 % наблюдений. Результаты исследования гуморального и клеточного звеньев системы иммунитета, полученные в группе пациентов, перенесших органосохраняющие вмешательства при травме селезенки, в отдаленном послеоперационном периоде практически не отличаются от аналогичных результатов группы сравнения (p>0,05). В то же время установлено, что в данной группе больных склонность к частым «простудным заболеваниям» отмечена в 3,3 % случаев, вовлечение в патологический процесс легких и бронхов - у 13,3 % пациентов, склонности к гнойничковым заболеваниям кожи у них не выявлено.
Таким образом, установлено, что селезенке принадлежит важная роль в иммунном статусе организма и ее удаление ведет к серьезным нарушениям в этой системе. Очевидна необходимость выполнения органосохраняющих операций при травме селезенки. При невозможности такого вмешательства предпочтительна аутолиентрансплантация, несмотря на то, что она не служит полноценной альтернативой органосохраняющей операции. Учитывая расстройства, выявленные в иммунном статусе пациентов после спленэктомии и приводящие к различным осложнениям, следует рекомендовать пожизненное диспансерное наблюдение оперированных у хирурга.
Выводы
- В ближайшем послеоперационном периоде независимо от выполненной операции отмечаются изменения в гуморальном звене системы иммунитета, проявляющиеся в снижении количества IgA, IgE, общего количества комплимента и его С3- и С4-фракций. В клеточном звене системы иммунитета в ближайшем послеоперационном периоде происходит уменьшение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-киллеров. Характер выполненной операции не влияет на выявленные изменения.
- В отдаленном послеоперационном периоде в иммунном статусе оперированных пациентов после спленэктомии по поводу травмы селезенки происходят изменения в гуморальном звене, выражающиеся в снижении концентрации IgG и IgM, общего количества комплемента и его С3- и С4-фракций. В свою очередь, органосохраняющие операции не вызывают изменений в иммунном статусе. В клеточном звене иммунитета зарегистрировано снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечается повышение количества Т-цитотоксических лимфоцитов, В-лимфоцитов. После аутолиентрансплантации снижается количество зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов. Органосохраняющие операции не приводят к изменениям в клеточном звене системы иммунитета.
- Изменения в иммунном статусе организма становятся причиной развития осложнений в отдаленном послеоперационном периоде после спленэктомии в 42,1 %, после аутолиентрансплантации в 13,3 %.
Рецензенты:
- Пучиньян Д. М., доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора по научной работе ФГБУ «Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии» Минздравсоцразвития России, г. Саратов.
- Елисеев Ю. Ю., доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой гигиены и экологии ГБОУ ВПО Саратовский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, г. Саратов.