Введение
В работах А.В. Глотова приводятся данные, что иммунные нарушения у пациентов с недифференцированной дисплазией соединительной ткани (НДСТ) дебютируют следующими синдромами: вторичный (48,9%), аутоиммунный (8,7%) и аллергический иммунодефицит [1].
Известно, что в структуре рецепторов CD3+-лимфоцитов содержится коллаген [2, с. 82–87]. По мнению И.Ю. Ильиной, нарушения обмена коллагена при НДСТ обязательно отражаются на состоянии мембран и перегородок иммунных клеток, которые относятся к соединительной ткани (СТ) [3].
Дисфункция эндотелия, выявляемая при НДСТ, приводит к нарушению агрегации тромбоцитов, дефектам ряда адгезивных молекул, повышенной продукции циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), иммуноглобулинов (Ig) Е и А, нарушениям процессов фагоцитоза [4, 5].
Имеются данные, что пациенты с НДСТ имеют клеточный иммунодефицит, который проявляется достоверным уменьшением числа CD3+-лимфоцитов. Иммунодефицит, в свою очередь, приводит к развитию различных ассоциированных иммунопатологических состояний. Вместе с тем, у таких пациентов наблюдается очевидное увеличение продукции IgE, которое достигает максимума при аутоиммунных процессах, ассоциированных с НДСТ. Кроме этого, пациенты с НДСТ характеризуются снижением уровня IgA [6, с. 84].
Проявлениями синдрома иммунодефицита являются уменьшение возможностей T-лимфоцитов к дифференциации и недостаток лимфоцитов, синтезирующих CD3+- и CD4+-молекулы. При иммунодефицитных состояниях фагоцитарная активность нейтрофилов ослаблена, уменьшается концентрация ЦИК, снижается уровень IgA и повышается продукция IgE [6, с. 117].
В.М. Яковлев и соавторы, анализируя состояние иммунной системы у пациентов с НДСТ, обнаружили снижение уровня IgA в сыворотке крови, уменьшение количества Т-лимфоцитов и Т-хелперов, а также увеличение содержания IgG в сыворотке крови и рост числа клеток, которые синтезируют антигены главного комплекса гистологической совместимости человека (HLA-DR). У больных с пролапсом митрального клапана выявлено присутствие антител к фосфолипидам. При НДСТ обнаружено увеличение содержания в лейкоцитах периферической крови гликозаминогликанов, что связано, вероятнее всего, с дефектами процесса обмена составных частей СТ внутри клетки [7, с. 124–132].
В работе И.Ю. Ильиной с целью выявления нарушений в иммунном статусе были обследованы 68 женщин, средний возраст 56,8±1,3 года, при этом у 26 женщин (38,2%) были признаки НДСТ; контрольную группу составили 42 женщины без признаков НДСТ. Для оценки гуморального звена иммунитета определяли IgA, IgG, IgM, ЦИК, C3- и C4-компоненты комплемента. У пациентов с НДСТ наблюдались значимое повышение содержания IgE и уровня ЦИК в сыворотке крови, снижение уровня C3- и C4-компонентов комплемента, выявлены нарушения процессов опсонизации и фагоцитоза. Повышение содержания IgE автор исследования связала с нарушенным процессом распознавания соединительнотканных структур антигена, приводящим к постоянной стимуляции синтеза IgE, а повышение уровня ЦИК – с нарушением процессов их элиминации. Таким образом, пациенты с НДСТ имеют выраженные нарушения в гуморальном звене иммунитета и подвержены развитию аутоиммунных и аллергических заболеваний, что при отсутствии клинических проявлений требует мониторинга показателей иммунного статуса [3].
По мнению Г.И. Нечаевой и соавторов, НДСТ свидетельствует о нарушении иммунного гомеостаза и может являться фоном для развития иммунокомплексного воспаления при ювенильном ревматоидном артрите [8].
Ю.В. Кондусовой и соавторами установлены некоторые особенности протекания бронхиальной астмы у пациентов с НДСТ: 1) более ранний дебют заболевания с длительными периодами ухудшения; 2) дезадаптация (низкая толерантность к физическим нагрузкам, психологические нарушения); 3) наличие синдрома вегетативной дисфункции; 4) высокая концентрация IgE в сыворотке крови [9].
Имеются работы, свидетельствующие о более длительном (>7 дней) течении острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) у пациентов с НДСТ в сравнении с лицами без НДСТ, поэтому НДСТ можно считать отягощенным фоном при ОРВИ. Пациентов с НДСТ следует отнести в группу повышенного риска возникновения аллергических и аутоиммунных заболеваний [10, с. 92–98].
Цель исследования
Изучить особенности клеточного и гуморального иммунитета у пациенток с недифференцированной дисплазией соединительной ткани в возрасте репродуктивной способности (период от достижения половой зрелости до менопаузы).
Материал и методы исследования
Показатели клеточного и гуморального иммунитета были изучены у 88 пациенток с НДСТ в возрасте репродуктивной способности, средний возраст 23,5±2,6 года. НДСТ диагностировали на основе результатов медицинского осмотра и обследований, используя общепринятые критерии [11, 12]. Контрольную группу составили 100 практически здоровых женщин без НДСТ в возрасте репродуктивной способности, средний возраст 24,8±2,4 года.
Иммунный статус – это совокупность количественных и функциональных показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени [13, с. 28]. Гуморальное звено иммунитета оценивали путем определения IgG (г/л), IgM (г/л), IgA (г/л), IgE (МЕ/мл), ЦИК (оптическая плотность, опт. пл.), C3- и C4-компонентов комплемента (мг/дл) методом радикальной иммунодиффузии в теле по G. Mancini (1970) с помощью иммунохимической системы «Immulite 2000» (Siemens Healthineers, Германия). Кроме того, эта иммунохимическая система применялась для измерения содержания интерлейкина-6 (ИЛ-6) и интерлейкина-10 (ИЛ-10) в сыворотке крови с использованием «сэндвич-методики» иммуноферментного анализа [2, с. 92–96].
В процессе иммунологического тестирования мы оценивали клеточное звено иммунитета. Чтобы определить CD-маркеры клеток, отвечающих за иммунный ответ, применяли метод фенотипирования клеток иммунной системы, в частности лимфоцитов. Чтобы оценить состояние клеточного звена иммунитета, анализировали, как на поверхности лимфоцитов представлены молекулы, которые позволяют отнести эти клетки к определенным типам лейкоцитов: в венозной крови определяли относительное и абсолютное число лимфоцитов, экспрессирующих антигены CD19 (маркер B-лимфоцитов), CD16 (маркер натуральных киллеров), CD3 (маркер T-лимфоцитов), CD4 (маркер хелперов/индукторов) и CD8 (маркер супрессорных/цитотоксических T-лимфоцитов). Число (относительное) каждой популяции клеток выражали в % от общего числа лимфоцитов, тогда как абсолютное – в х109 клеток/л. Иммунофенотипирование выполняли по двухплатформенной безотмывочной технологии, лимфоциты окрашивали с помощью меченых моноклональных антител («IOTest», Beckman Coulter, Inc., США), имеющих сродство к CD19-, CD16-, CD3- и CD4-, CD8-антигенам. Фиксация и лизис выполнялись с использованием комплекса «Partec Cylyse® Erythrocyte Lysing» (Sysmex Partec GmbH, Германия). Соотношение CD4+- и CD8+-клеток интерпретировали как иммунорегуляторный индекс [2, с. 182–188].
Для статистической обработки данных использовали программы «Numbers» от компании Apple Inc. (США) и «StatPlus:mac» от AnalystSoft Inc. (США). Чтобы определить, подчиняются ли выборки нормальному распределению, применяли критерий А.Н. Колмогорова.
Информация представлена в виде среднего значения (M) и стандартного отклонения (SD). Чтобы сравнить группы по числовым данным, применяли критерий Манна–Уитни; для анализа связи между нормально распределенными переменными использовали коэффициент корреляции Пирсона (r). Различия считали статистически значимыми при p<0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
В таблице 1 приведены показатели гуморального звена иммунитета у женщин в возрасте репродуктивной способности с НДСТ в сравнении с контрольной группой.
Таблица 1
Показатели гуморального звена иммунитета у женщин с НДСТ в возрасте репродуктивной способности и контрольной группы (M±SD)
|
Показатель |
НДСТ (n=88) |
Контроль (n=100) |
c2; df = 1; p |
|
IgG, г/л |
13,56±1,14 |
11,28±1,12 |
5,67; 0,02* |
|
IgM, г/л |
1,62±0,08 |
2,68±0,06 |
10,14; 0,001* |
|
IgA, г/л |
1,79±0,16 |
3,82±0,17 |
10,16; 0,001* |
|
IgE, МЕ/мл |
164,24±5,12 |
104,86±4,23 |
10,21; 0,001* |
|
ЦИК, опт. пл. |
236,22±4,46 |
129,64±3,94 |
10,24; 0,001* |
|
C3C, мг/дл |
79,86±1,84 |
156,54±2,16 |
10,22; 0,001* |
|
C4C, мг/дл |
18,79±2,23 |
29,52±1,17 |
5,69; 0,02* |
|
Примечание: * – статистически значимые различия (p<0,05). |
|||
В таблице 2 приведены показатели содержания ИЛ-6 и ИЛ-10 в сыворотке крови у женщин в возрасте репродуктивной способности с НДСТ в сравнении с контрольной группой.
Таблица 2
Показатели содержания ИЛ-6 и ИЛ-10 у женщин с НДСТ в возрасте репродуктивной способности и контрольной группы (M±SD)
|
Показатель |
НДСТ (n=88) |
Контроль (n=100) |
c2; df = 1; p |
|
ИЛ-6, пг/мл |
6,38±1,14 |
6,34±1,26 |
0,66; 0,42 |
|
ИЛ-10, пг/мл |
15,64±0,19 |
10,12±0,16 |
10,32; 0,001* |
|
Примечание: * – статистически значимые различия (p<0,05). |
|||
Из таблицы 1 видно, что у пациенток с НДСТ в возрасте репродуктивной способности средние уровни IgM (в 1,65 раза, p<0,001) и IgA (в 2,13 раза, p<0,001) в сыворотке крови были значимо ниже, чем в контрольной группе, при этом уровень IgG у пациенток с НДСТ был значимо выше (в 1,65 раза, p<0,02) по сравнению с контрольной группой.
Антитела «острого периода иммунного ответа» – это IgM, которые вырабатываются плазматическими клетками при первой встрече с определенным возбудителем болезни, а IgA традиционно обеспечивают «локальный» иммунитет. Снижение концентрации IgM и IgA у пациенток с НДСТ может свидетельствовать о недостаточности гуморального и местного иммунитета.
В то же время увеличение концентрации IgG в сыворотке крови у пациенток репродуктивного возраста с НДСТ может говорить о неполном излечении либо о переходе инфекции в хроническую форму, поскольку IgG являются антителами «вторичного иммунного ответа», который реализуется в результате контакта с привычным антигеном.
Примерно каждая третья пациентка с НДСТ (n=34, 39%), принявшая участие в настоящем исследовании, жаловалась на частые и длительно протекающие ОРВИ, что имеет значение для вынашивания беременности. Наблюдение авторов дополняет имеющиеся в литературе данные о частых воспалительных заболеваниях верхних дыхательных путей, проблемах с миндалинами, бронхитах, пневмониях, бронхиальной астме и дерматитах у пациенток с НДСТ и свидетельствует об имеющемся иммунодефиците.
В группе пациенток с НДСТ было выявлено значимое повышение уровня IgE (в 1,57 раза, p<0,001) в сравнении с контрольной группой. Вероятно, это связано с нарушением процессов идентификации антигена, а именно структур соединительной ткани, что, в свою очередь, приводит к перманентной активации систем, ответственных за синтез IgE [14, с. 140–152].
Из таблицы 1 также видно, что у пациенток с НДСТ в возрасте репродуктивной способности отмечалось значимое снижение средних уровней C3C (в 1,96 раза, р<0,001) и C4C (в 1,57 раза, р<0,02) в сравнении с контрольной группой, при этом концентрация ЦИК у пациенток с НДСТ была значимо выше (в 1,82 раза, р<0,001) в сравнении с контрольной группой. Авторы считают, что повышение уровня ЦИК связано с нарушением процессов их элиминации. Снижение уровней C3- и C4-компонентов комплемента может нарушать процессы опсонизации и фагоцитоза [15, с. 66–73].
С учетом данных о высокой распространенности у пациенток с НДСТ хронических инфекций и возникающей вследствие этого стимуляции синтеза провоспалительных цитокинов авторы провели количественное определение содержания в сыворотке крови у женщин репродуктивного возраста провоспалительных цитокинов ИЛ-6 и ИЛ-10.
Как следует из данных, представленных в таблице 2, у пациенток репродуктивного возраста с НДСТ выявлено значимое повышение уровня ИЛ-10 (в 1,55 раза, p<0,001) в сыворотке крови в сравнении с контрольной группой, при этом содержание ИЛ-6 у пациенток с НДСТ и в контрольной группе значимо не различалось (p=0,42). Кроме этого, установлена обратная связь между содержанием ИЛ-10 в сыворотке крови и значением эндотелийзависимой вазодилатации плечевой артерии во время пробы с реактивной гиперемией (r = -0,38, p<0,001).
Повышение уровня ИЛ-10 у женщин репродуктивного возраста с НДСТ, вероятно, представляет собой приспособительный механизм, направленный на регуляцию нарушений иммунитета, которые приводят к подавлению воспаления мезенхимальной и инфекционной природы [3]. Безусловно, роль ИЛ-6 и ИЛ-10 в генезе определенных клинических проявлений у пациенток с НДСТ требует дальнейшего изучения.
При исследовании клеточного звена иммунитета значимых различий между пациентками с и без НДСТ не выявлено, при этом отмечены тенденции: 1) 57 пациенток с НДСТ (64,8%) имели тенденцию к уменьшению среднего содержания в крови CD16+-лимфоцитов: 0,142±0,02х109/л (в норме 0,15–0,6х109/л, p=0,32); 2) 30 пациенток с НДСТ (34,1%) имели тенденцию к повышению иммунорегуляторного индекса: 1,54±0,01 (в норме 1,0–1,5; p=0,44); 3) 39 пациенток с НДСТ (44,3%) имели тенденцию к повышению среднего содержания CD8+-лимфоцитов: 0,77±0,03х109/л (норма 0,3–0,7х109/л, p=0,34). Отмеченные тенденции говорят о существующем дисбалансе в клеточном звене иммунитета у данной категории пациентов. Выявленные особенности иммунного статуса позволяют отнести данную категорию пациентов в группу повышенного риска возникновения инфекционных, аллергических и аутоиммунных заболеваний.
Таким образом, авторами проведена сравнительная оценка показателей гуморального и клеточного иммунитета у женщин в возрасте репродуктивной способности с и без НДСТ: 1) в группе пациенток с НДСТ установлены снижение уровня IgМ и IgА, C3- и C4-компонентов комплемента и повышение уровня IgG и IgE, ЦИК и ИЛ-10; 2) при исследовании клеточного звена иммунитета значимых различий между сравниваемыми группами не выявлено. Полученные данные требуют индивидуального подхода к ведению женщин репродуктивного возраста с НДСТ.
Заключение
В данном исследовании продемонстрировано направление некоторых изменений клеточного звена иммунитета в группе молодых пациенток с НДСТ в сравнении с практически здоровыми женщинами.
Диагностированные нарушения говорят о существующем дисбалансе в клеточном звене иммунитета у данной категории пациенток. Выявленные особенности иммунного статуса, по-видимому, свидетельствуют в пользу первичного характера нарушений иммунитета у пациенток с НДСТ, что позволяет отнести данную категорию пациенток в группу повышенного риска возникновения инфекционных, аллергических и аутоиммунных заболеваний.
Значимое снижение средних уровней IgM и IgA, повышение концентрации IgG в сыворотке крови в группе НДСТ свидетельствуют о повышенной частоте перенесенных ОРВИ и высоком риске развития в дальнейшем аллергических и аутоиммунных процессов, в том числе с возможным вовлечением миокарда.
Необходимы комплексная оценка иммунного статуса у пациенток репродуктивного возраста с НДСТ и раннее назначение, при необходимости, патогенетической терапии. Своевременная коррекция нарушений показателей гуморального иммунитета у женщин репродуктивного возраста с НДСТ, вероятно, позволит предотвратить развитие у них аутоиммунных и аллергических заболеваний, что будет полезно для планирования беременности.