Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

Новая коронавирусная инфекция COVID-19, стремительно ворвавшись в нашу жизнь, перевернула представление людей о стабильности и уверенности в завтрашнем дне. Несмотря на выздоровление, после перенесенной коронавирусной инфекции у больных сохраняются различные нарушения со стороны сердечно-сосудистой, дыхательной, свертывающей, нервной систем [1; 2]. В реабилитации пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции COVID-19 практическое здравоохранение столкнулось со множеством проблем, несмотря на постоянно обновляемые рекомендации по лечению и профилактике новой коронавирусной инфекции [3-5]. В первую очередь это коснулось нарушений со стороны иммунологического статуса, так как в начале эпидемии коронавирусной инфекции отмечалось неконтролируемое применение системных глюкокортикостероидов, которое привело к изменениям иммунологической реактивности у пациентов, сохраняющимся даже через месяцы после выздоровления [6; 7]. Все это привело к необходимости поиска эффективных немедикаментозных способов реабилитации пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции. Одним из таких методов является адаптация к гипоксии в курсе нормобарической интервальной гипокситерапии (ИГТ), которая применяется в лечении различных хронических заболеваний [8; 9]. Учитывая системное воздействие гипокситерапии на организм и активацию компенсаторно-адаптационных механизмов со стороны сердечно-сосудистой, дыхательной, кроветворной систем [10-12], было решено использовать нормобарическую интервальную гипокситерапию для улучшения иммунологической реактивности пациентов после коронавирусной инфекции.

Цель исследования: выявить влияние нормобарической интервальной гипокситерапии на иммунологический статус пациентов с перенесенной коронавирусной инфекцией COVID-19 средней степени тяжести.

Материал и методы исследования. Обследование и интервальную гипокситерапию пациенты получили на базе Университетской клиники Кабардино-Балкарского государственного университета им. Х.М. Бербекова. В исследование были включены 85 пациентов 45-59 лет после перенесенной коронавирусной инфекции средней степени тяжести (через 30 дней после выздоровления). При КТ-исследовании выявлялись признаки поражения легочной ткани КТ-1. Контрольная группа состояла из сопоставимых по возрасту и полу практически здоровых лиц (70 лиц 45-59 лет), не переболевших коронавирусной инфекцией. Группа сравнения была представлена 60 пациентами после коронавирусной инфекции COVID-19, которые прошли стандартную реабилитацию после коронавирусной инфекции COVID-19 без интервальной гипокситерапии.

Определение количества лимфоцитов проводилось методом проточной цитофлуориметрии на аппарате XN-9000, Sysmex (Япония), иммуноглобулинов А, М, G методом иммунотурбидиметрии на аппарате Cobas 6000, Roche Diagnostics (Швейцария), содержание иммуноглобулинов Е и цитокинов (IL-1β, IL -2, IL -4, IL -6, IL -8, IL -10, TNF-α,) в крови электрохемилюминесцентным иммуноанализом на аппарате Cobas 6000, Roche Diagnostics (Швейцария).

Гипоксическое воздействие осуществляли при помощи установки для гипокситерапии «Гипо-Окси» фирмы Oxyterra (Россия), которая генерировала гипоксическую смесь с различным содержанием кислорода. Гипокситерапия проводилась в режиме гипокси-гипероксия, включающем чередование 5-минутных гипоксических воздействий с 5-минутными гипероксическими (30% О2). Всем больным для определения индивидуальной чувствительности к гипоксии и переносимости гипоксических смесей проводился гипоксический тест, после которого подбиралось оптимальное содержание кислорода в гипоксической смеси, определялась длительность гипоксических воздействий и количество процедур. Обычно курс гипокситерапии составлял 15 дней.

При выполнении статистической обработки полученных результатов использовались электронные программы Microsoft Excel и статистические пакеты программ MedStat. Статистическая обработка результатов проводилась с использованием современных статистических методов. Анализ статистически значимых и незначимых различий средних показателей между различными выборками осуществлялся с применением t-критерия Стъюдента для парных измерений. Для оценки достоверности межгрупповых различий применялся непараметрический критерий Манна-Уитни. Все численные данные в виде среднего арифметического значения и стандартной ошибки среднего М±m, а при непараметрическом характере распределения величин – в виде медианы с указанием 25-го и 75-го квартилей [медиана (25й-75й – квартиль)]. Различия считались статистически достоверными при р< 0,05 [13].

Были соблюдены этические принципы, пациенты были информированы о методике проведения интервальной гипокситерапии, после чего было получено согласие на обследование и лечение.

Результаты исследования и их обсуждение. Проведенные исследования иммунологической реактивности позволили выявить изменения со стороны клеточного иммунитета, проявляющиеся в снижении количества Т-лимфоцитов CD3+, уровня Т-хелперов CD4+, Т-лимфоцитов CD8+, что привело к нарушению гуморального и клеточного звена иммунитета. Количество В-лимфоцитов не было достоверно изменено (табл. 1).

Таблица 1

Показатели иммунного статуса пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции [медиана (25% - 75% квартиль)]

Содержание в крови, %	Основная группа (n=85)	Контрольная группа (n=70)
Т-лимфоциты, CD 3+, %	48,6 (36,3-58,5)*	56,3 (48,2-61,5)
Т-лимфоциты CD 4+, %	31,4 (21,5-43,8)*	40,5 (31,5-50,2)
Т-лимфоциты CD 8+, %	11,7 (9,5-14,4)*	18,5 (15,8-25,3)
В-лимфоциты CD 22+, %	19,6 (12,7-24,2)	18,1 (12,6-25,9)
ИРИ (усл. ед.)	2,71 (2,45-2,91)	2,13 (1,95-2,42)
IgA, г/л	0,88 (0,67-0,98)	1,06 (0,42-1,21)
IgM, г/л	1,16 (0,65-2,57)*	1,75 (1,06-1,96)
IgG, г/л	6,31 (5,71-9,55)*	8,52 (6,74-13,36)
IgE, МЕ/л	97,43 (78,7-121,5)*	64,64 (43,86-73,75)
ЦИК (усл. ед.)	99,57 (86,4-116,5)*	91,2 (82,4-99,5)

* - p<0,05 - достоверные отличия с показателями контрольной группы.

Отмечалось достоверное (р<0,01) снижение уровня иммуноглобулинов A, М, G. Снижение уровня иммуноглобулинов А привело к подавлению резистентности к различным инфекциям.

Полученные результаты исследования содержания иммуноглобулинов Е заключались в достоверном (р<0,05) увеличении содержания общего иммуноглобулина Е, что свидетельствовало о повышенной сенсибилизации пациентов. Отмечалось достоверное (р<0,05) возрастание циркулирующих иммунных комплексов и иммунорегуляторного индекса.

Снижение содержания Т-лимфоцитов CD3+, Т-хелперов СD4+, уровня иммуноглобулинов А и увеличение содержания иммуноглобулинов Е и циркулирующих иммунных комплексов привело к изменению иммунологического статуса у пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции.

При изучении цитокинового профиля крови у пациентов после коронавирусной инфекции было выявлено его изменение, также свидетельствующее о сохранении воспалительного процесса (табл. 2)

Таблица 2

Цитокиновый профиль крови у пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции (M±m)

Показатель	Основная группа (n=85)	Контрольная группа (n=70)
IL-1β, пг/мл	8,75±0,27*	5,23±0,45
IL-2, пг/мл	5,74±0,09*	3,15±0,11
IL-4, пг/мл	2,04±0,37*	3,6±0,41
IL-6, пг/мл	6,71±0,10*	2,32±0,19
IL-8, пг/мл	7,63±0,25*	5,85±0,34
IL-10, пг/мл	4,03±0,16*	8,14±0,16
TNF-α, пг/мл	14,73±0,41*	9,15±0,71

* - p<0,05 - достоверные отличия с показателями контрольной группы.

Выявленное достоверное увеличение провоспалительных цитокинов (IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, TNF-α), на фоне статистически значимого (p<0,05) снижения концентрации противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10), способствовало поддержанию воспалительного процесса в бронхолегочной системе.

Содержание ферритина в крови у пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции составляло 128,42±3,63 мкг/л (у контрольной группы 75,83±2,38 мкг/л). Повышение ферритина в крови после перенесенной коронавирусной инфекции, по-видимому, было связано с увеличенным содержанием провоспалительных цитокинов, которые индуцировали секрецию ферритина, несмотря на период реконвалесценции, что еще раз подтверждало сохранение воспалительного процесса у пациентов после коронавирусной инфекции средней степени тяжести.

Большинство пациентов с коронавирусной инфекцией COVID-19 средней степени тяжести получали терапию глюкокортикоидами (32 мг дексаметазона в сутки) во время заболевания, что привело к нарушению иммунологической реактивности, выявленному при обследовании пациентов до курса гипокситерапии. Поэтому возникла идея использования интервальной гипокситерапии для нормализации иммунологического статуса пациентов после коронавирусной инфекции.

После интервальной гипокситерапии отмечалось достоверное (р<0,05) увеличение медианы общего количества Т-лимфоцитов CD3+ на 12,15±0,01%, Т-хелперов на 16,27±0,01% (р<0,05), Т-лимфоцитов CD8+ на 42,92±2,06%, В-лимфоцитов на 12,88±0,01%. В группе сравнения статистически значимых изменений выявлено не было (табл. 3).

Таблица 3

Иммунологические показатели у пациентов после интервальной гипокситерапии [медиана (25%-75% квартиль)]

* - p<0,05, ** - р<0,01 - достоверные отличия с показателями до курса гипокситерапии.

Об улучшении иммунного статуса свидетельствовала нормализация иммунорегуляторного индекса и достоверное (р<0,01) повышение уровня иммуноглобулинов А и G, что повышало устойчивость организма к повторному инфицированию. Статистически значимое (р<0,05) снижение иммуноглобулинов Е в крови свидетельствовало о снижении сенсибилизации организма.

После интервальной гипокситерапии отмечалось достоверное (р<0,05) снижение содержания провоспалительных цитокинов (IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8, TNF-α) и повышение противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10) в крови, что свидетельствовало об активации саногенетических механизмов и повышении противовоспалительной защиты. В группе сравнения достоверных изменений не наблюдалось (табл. 4).

Таблица 4

Цитокиновый профиль крови у пациентов после интервальной гипокситерапии (M±m)

* - p<0,05, ** - p<0,01 - достоверные отличия с показателями до лечения.

Курс гипокситерапии привел к снижению содержания ферритина в крови на 15,18±0,24%, что свидетельствовало об уменьшении воспалительного процесса в организме пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции.

Заключение. Интервальная гипокситерапия оказалась эффективным методом воздействия на иммунологическую реактивность пациентов после коронавирусной инфекции COVID-19. Достоверное увеличение содержания лимфоцитов различных популяций привело к нормализации клеточного и гуморального звена иммунитета. Снижение содержания иммуноглобулинов Е явилось важным результатом гипокситерапии и свидетельствовало об уменьшении сенсибилизации пациентов. На стихание воспалительного процесса в организме после коронавирусной инфекции указывала нормализация цитокинового профиля крови в результате снижения «ответа острой фазы». Повышение содержания противоспалительных интерлейкинов свидетельствовало об активации саногенетических механизмов, что, наряду с уменьшением содержания провоспалительных цитокинов, привело к подавлению воспалительного процесса. Результаты проведенных исследований могут служить основанием для использования интервальной нормобарической гипокситерапии в реабилитации пациентов после коронавирусной инфекции COVID-19.