Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

Хронический пародонтит является распространенной социально значимой проблемой, в случае отсутствия эффективного и своевременно начатого лечения он приводит к потере зубов и, как следствие, к снижению трудоспособности и качества жизни населения [1]. Данной патологией страдают около 85% населения России, при этом у 53% определяются начальные воспалительные процессы, у 12% – изменения средней и тяжелой степени тяжести [2, 3].

Развитие воспалительного процесса обусловлено колонизацией области пародонта грамотрицательными микроорганизмами, обладающими пародонтопатогенным потенциалом и оказывающими цитотоксическое действие за счет выработки большого количества ферментов, а также метаболитов [4]. Токсины бактерий способствуют активации макрофагов, являющихся продуцентами провоспалительных цитокинов (IL-1, IL-6, IL-8, TNF), матриксных металлопротеиназ, которые за счет их хемотаксического действия способствуют миграции нейтрофилов в ткани пародонта [5]. В результате накопления в пародонтальных тканях протеолитических ферментов (гиалуронидазы, коллагеназы) происходят деполимеризация межклеточного матрикса эпителия и соединительной ткани, лейкоцитарная инфильтрация тканей пародонта, расширение сосудов микроциркуляторного русла [6]. Деструкция коллагеновых волокон осуществляется как за счет генерации нейтрофилами активных форм кислорода, так и за счет фагоцитоза фибробластами с последующим разрушением лизосомальными ферментами коллагеновых структур путем расщепления пептидных связей в определенных участках спирализованных областей коллагена [7]. При прогрессировании воспаления деструктивные процессы происходят как в латеральном, так и в апикальном направлениях относительно области расположения очага воспаления, что сопровождается разрыхлением соединительнотканного матрикса и образованием пространства между зубом и эпителием десневой борозды – формированием десневого кармана [8]. Вследствие его последующего прорастания в подлежащую соединительную ткань, образования грануляций и последующего замещения ими костной ткани происходят формирование пародонтального кармана и разрушение опорных тканей зуба, что способствует возникновению патологической подвижности с последующей потерей зубов [9].

В связи с этим установление причинно-следственных взаимосвязей в развитии деструктивных процессов между метаболизмом коллагеновых биополимеров соединительнотканного матрикса и состоянием тканей пародонта позволяет выявить более глубокие патогенетические механизмы, что будет способствовать разработке новых диагностических критериев для своевременного обнаружения пародонтита, предупреждая наступление этапа потери зубов. Кроме этого, открываются основные патогенетические точки приложения, дающие возможность для последующей разработки новых современных способов лечения.

Цель исследования. Оценка и установление причинных взаимосвязей между показателями метаболизма коллагена и состоянием тканей пародонта при экспериментальном пародонтите.

Материалы и методы исследования. Экспериментальное исследование проводилось на 45 белых нелинейных крысах обоего пола массой 220–300 г, содержащихся в стандартных лабораторных условиях на базе учебного вивария МГУ им. Н.П. Огарёва. Эксперимент был одобрен этическим комитетом Медицинского института и проводился в соответствии с международными этическими нормами, изложенными в Европейской Конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 1986 г.). Животные были разделены на две группы: контрольную (n=15) составили интактные особи, показатели которых принимались за норму, и вторую группу (n=30) – особи, на которых проводилось моделирование экспериментального пародонтита по методике, предложенной К.Д. Школьной, В.Г. Атрушкевич [10]. Животным на 1-е, 3-и, 5-е сутки эксперимента вводился преднизолон в дозе 12 мг/кг массы тела крысы трехкратно через каждые двое суток. На 5-е сутки эксперимента с использованием общего обезболивания (золетил 0,03 мл в/м) осуществлялись фиксация лигатуры путем прошивания межзубного сосочка верхней челюсти между первым и вторым моляром слева, фиксация узла с вестибулярной стороны и его последующее покрытие жидкотекучим пломбировочным материалом для более надежной фиксации.

Оценка метаболизма коллагена проводилась по показателям свободного (СО), пептидносвязанного (ПСО) и белковосвязанного (БСО) оксипролина в соответствии с методикой, предложенной П.Н. Шараевым, с использованием парадиметиламинобензальдегида [11].

Оценка состояния тканей пародонта проводилась по показателям кровоточивости десны, глубине пародонтальных карманов и подвижности зубов с использованием пуговчатого и модифицированного пародонтологического зондов [10].

Контроль показателей осуществлялся на 3-и, 7-е и 25-е сутки исследования после снятия лигатуры. Вывод животных из эксперимента проводился на 25-е сутки путем декапитации.

Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с использованием лицензионного пакета прикладной программы «IBM SPSS Statistics 20» с применением однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) и критерия Тьюки.

Результаты исследования и их обсуждение. На 3-и сутки после снятия лигатуры отмечалось увеличение показателей СО и ПСО на 137,4% (p<0,001) и 104,7% (p<0,001) соответственно относительно аналогичных значений интактной группы. Коэффициент ПСО/СО снизился на 13,0% (p<0,05). Уровень БСО достоверно не изменялся (p>0,05). Полученные результаты свидетельствуют о резкой активации катаболических процессов метаболизма коллагена, что говорит о развитии деструктивных процессов соединительнотканного матрикса пародонта.

На 7-е сутки эксперимента содержание СО в плазме крови сохранялось на повышенном уровне, достоверно не отличаясь от аналогичного показателя на 3-и сутки (p>0,05), что говорит о сохраняющихся деструктивных процессах коллагеновых структур. Но, отмечалось прогрессирующее увеличение уровня ПСО и БСО на 336,7% (p<0,001) и 160,7% (p<0,001) соответственно относительно показателей интактной серии. Коэффициент ПСО/СО увеличился до 1,05±0,14 усл. ед. (p<0,001), что на 94,4% выше аналогичного нормального показателя, это указывает на активацию анаболических изменений. Данные изменения свидетельствуют об интенсификации процессов фибриллогенеза на фоне сохраняющихся катаболических изменений.

К концу эксперимента на 25-е сутки уровень СО превышал аналогичный показатель интактной серии в 2 раза (p<0,001). Наблюдалось сохранение преобладания уровней ПСО и БСО в 5,6 (p<0,001) и 2,0 (p<0,001) раза соответственно над должными значениями. Возросший на 179,6% коэффициент ПСО/СО свидетельствует о сохраняющемся к концу эксперимента дисбалансе процессов синтеза и деградации коллагена. Полученные результаты указывают на активацию процессов фибриллогенеза и образование коллагеновых волокон, подверженных действию лизосомальных ферментов в силу их нестабильной структуры в условиях воспаления (табл. 1).

Таблица 1

Динамика показателей метаболизма коллагена при экспериментальном пародонтите

Примечание: *– различия статистически достоверны при сравнении с показателями контрольной серии (p<0,001); А – различия статистически достоверны при сравнении с показателями опытной серии на 3-и сутки (p<0,001); B – различия статистически достоверны при сравнении с показателями опытной серии на 7-е сутки (p<0,001).

На 3-и сутки эксперимента после снятия лигатуры при осмотре полости рта отмечались гиперемия и отек десневого края, появление кровоточивости десны при ее зондировании, увеличение глубины зондирования десневой бороздки на 0,09 мм (p<0,001) в сравнении с аналогичными показателями контрольной серии, при этом патологическая подвижность отсутствует. Данные изменения свидетельствуют о развитии воспалительного процесса с начальными деструктивными изменениями.

На 7-е сутки эксперимента при осмотре полости рта животных сохранялась имеющаяся гиперемия, моляры верхней челюсти были покрыты мягким налетом, отмечались увеличение отечности десневого края и появление кровоточивости сразу после зондирования. При измерении глубины зондирования десневой бороздки выявлялись углубление пародонтального кармана на 0,57 мм (p<0,001) при сравнении с аналогичными показателями 3-х суток и появление патологической подвижности, что говорит о наличии деструктивных процессов коллагеновых структур соединительнотканного матрикса пародонта.

На 25-е сутки наблюдения отмечалось сохраняющееся выраженное воспаление десны, проявляющееся ее выраженной гиперемией. Определялась обильная кровоточивость, возникающая сразу после зондирования десны. Выявлялись увеличение глубины пародонтальных карманов на 0,36 мм (p<0,001) относительно показателя 7-х суток, достигающее значения 1,31 мм, появление из них гнойного отделяемого в сочетании с усилением подвижности зубов до 2,05 (p<0,001) при сравнении с аналогичным показателем на 7-е сутки. Полученные результаты свидетельствуют о продолжающемся прогрессировании воспалительно-деструктивных процессов в области пародонта, проявляющихся разволокнением периодонтальной связки и, как следствие, нарушением прикрепления зуба (табл. 2).

Таблица 2

Динамика показателей состояния тканей пародонта при экспериментальном пародонтите

Примечание: *– различия статистически достоверны при сравнении с показателями контрольной серии (p<0,001); А – различия статистически достоверны при сравнении с показателями опытной серии на 3-и сутки (p<0,001); B – различия статистически достоверны при сравнении с показателями опытной серии на 7-е сутки (p<0,001).

Сравнение маркеров метаболизма коллагена с показателями состояния тканей пародонта выявило прямую корреляционную зависимость, что указывает на сопряженность исследуемых патогенетических механизмов (табл. 3).

Таблица 3

Корреляционная зависимость между показателями метаболизма коллагена и состоянием тканей пародонта при экспериментальном пародонтите

Заключение. Таким образом, выраженные воспалительно-деструктивные процессы соединительнотканного матрикса пародонта оказывают значительное влияние на состояние пародонтальных тканей. Воспалительный процесс приводит к формированию дисбаланса в системе метаболизма коллагена, характеризующегося выраженными деструктивными изменениями коллагеновых биополимеров соединительной ткани в сочетании с активацией избыточного фибриллогенеза, что подтверждалось резко возросшим уровнем СО и ПСО с одновременно высоким ростом белковосвязанной фракции оксипролина. Новообразованные коллагеновые волокна, явившиеся результатом вышеуказанного процесса, имея нестабильную структуру, быстро подвергаются разрушению под действием лизосомальных ферментов.

Проведенный корреляционный анализ выявил сильную взаимосвязь между процессами деструкции коллагеновых структур с ухудшением состояния тканей пародонта, проявляющимся формированием пародонтальных карманов, возникновением патологической подвижности и выраженной кровоточивости. Результатом возникающих процессов являются появление патологических грануляций в области имеющихся десневых карманов, а также увеличение глубины десневой бороздки с последующим формированием глубоких пародонтальных карманов с увеличением пространства между зубом и эпителием десневой борозды. Выраженные воспалительно-деструктивные процессы, дегенерация коллагеновых фибрилл межклеточного матрикса влекут за собой разволокнение периодонтальной связки и, как следствие, возникновение патологической подвижности, что при прогрессировании процесса приведет к необратимой потери зубов.

Таким образом, проведенное исследование доказывает необходимость внедрения в практику маркеров метаболизма коллагена как показателей, определяющих интенсивность деструктивных процессов соединительнотканного матрикса пародонта, и возможность их применения с целью диагностики тяжести течения пародонтита, а также оценки эффективности проводимого лечения и определения прогноза заболевания.