В связи с широкой распространенностью среди лиц разных возрастов и высокой летальностью внебольничная пневмония (ВП) является серьезной проблемой для системы здравоохранения во всем мире. Современные исследования отечественных и зарубежных авторов направлены на улучшение исходов заболевания, сокращение продолжительности госпитализации и снижение смертности среди пациентов с ВП. Безусловно, одним из значимых вкладов в реализацию данных направлений является изучение различных биомаркеров, играющих роль в патогенезе ВП [1, 2].
Одним из недавно идентифицированных и активно изучаемых биомаркеров является белок Клото (Kl). К настоящему времени доказано, что дефицит белка Kl может быть пусковым механизмом не только ускоренного старения, но и развития возраст-ассоциированных заболеваний, включая артериальную гипертензию, остеопороз, атеросклероз [3, 4].
Активно изучается роль белка Kl в патогенезе бронхолегочной патологии, такой как хроническая обструктивная болезнь легких, рак легких [5, 6]. Также доказана его вовлеченность в целый ряд патофизиологических процессов, лежащих в основе патогенеза ВП, среди которых – окислительный стресс, апоптоз, воспаление и др. [7, 8].
В современной литературе имеются единичные, в основном экспериментальные, исследования белка Kl при пневмонии. Результаты данных исследований свидетельствуют о перспективности изучения белка Kl и возможности использования его в качестве терапевтической мишени [9, 10].
Одним из обязательных клинических признаков и неотъемлемым звеном патогенеза у пациентов с ВП является эндогенная интоксикация. При высоком уровне эндогенной интоксикации возможности естественных механизмов дезинтоксикации существенно ограничиваются за счет срыва компенсаторно-приспособительных механизмов. Доказано, что выраженность эндогенной интоксикации коррелирует с тяжестью ВП, обусловливает эффективность проводимой терапии и нередко определяет прогноз заболевания [11, 12].
В доступной литературе не представлено исследований по изучению взаимосвязей уровня белка Kl и показателей, характеризующих выраженность синдрома эндогенной интоксикации у пациентов с ВП.
Цель исследования: изучить уровень белка Kl у пациентов с бактериальной ВП и выявить наличие корреляционных связей с показателями эндогенной интоксикации (такими как молекулы средней массы (МСМ), креатинин, мочевина).
Материалы и методы исследования. Были обследованы 75 человек, из которых 45 были с верифицированным диагнозом ВП (основная группа), получавших лечение на базе терапевтического отделения ГБУЗ АО Астраханская «Городская клиническая больница № 2 им. братьев Губиных».
Критериями включения в исследование пациентов основной группы служили: верифицированный диагноз ВП, возраст ≤60 лет. Критериями исключения служили: наличие в анамнезе сахарного диабета, хронической обструктивной болезни легких, ожирение 3-й степени, наличие другого хронического заболевания в стадии обострения и онкопатологии в анамнезе.
В качестве контроля были обследованы 30 соматически здоровых лиц. Среди соматически здоровых лиц было 17 человек (56,7%) мужского пола и 13 человек (43,3%) женского пола. Возраст соматически здоровых лиц составил 30 [28–34] лет против 34 [27–47] лет у пациентов с ВП (p=0,067). Проведение клинического исследования было одобрено локальным Этическим комитетом (от 06.11.2018 г.).
Гендерно-возрастная и анамнестическая характеристика пациентов с ВП представлена в таблице 1.
Таблица 1
Гендерно-возрастная и анамнестическая характеристика пациентов с ВП
|
Показатель |
Пациенты с ВП (n=45) |
|
Возраст, лет |
33 [27;46] |
|
Пол муж, абс. жен, абс. |
26 (55,3%) 19 (42,2%) |
|
В анамнезе: Ишемическая болезнь сердца: – стенокардия, абс. – перенесенный в прошлом инфаркт миокарда, абс. Артериальная гипертензия, абс. Дислипидемия, абс. Ожирение, абс. Табакокурение, абс. |
10 (22,2%) 4 (8,9%) 14 (31,1%) 16 (35,6%) 21 (53,3%) 17 (37,78%) |
|
Кол-во дней от начала заболевания до госпитализации |
3 [3–4] |
|
Жалобы: Повышение температуры, абс. Кашель, абс. Одышка, абс. Общая слабость, абс. Боли в грудной клетке, абс. Выделение мокроты, абс. |
43 (95,6%) 42 (93,3%) 31 (68,9%) 34 (75,6%) 5 (11,1%) 16 (35,6%) |
|
Односторонняя пневмония, абс. Двухсторонняя пневмония, абс. |
32 (71,1%) 13 (28,9%) |
Среди пациентов с ВП бактериальной этиологией среднетяжелое течение было у 35 человек (77,8%), тяжелое течение – у 10 человек (22,2%).
Уровень белка Клото (нг/мл) определяли в образцах плазмы методом иммуноферментного анализа с помощью коммерческой тест-системы «Klotho (KL)» (UscnLifeScienceInc. Wuhan, каталожный номер E97957Hu). Уровень МСМ (усл. ед.) определяли в плазме крови при длине волн 280 нм (выявляется фракция МСМ, содержащая ароматические аминокислоты) методом спектрофотометрии на аппарате спектрофотометре УФ-видимой области Cary-50 компании «Agilent Technologies» (USA) (оптический диапазон 190–1100 нм) по методике Н.И. Габриэлян и др. (1984 г.) с раствором трихлоруксусной кислоты [13]. Из показателей эндогенной интоксикации также были проанализированы уровни креатинина и мочевины в крови.
Данные обрабатывались в программах StatTech v. 2.5.9 (разработчик – ООО «Статтех», Россия). Количественные показатели оценивались на предмет соответствия нормальному распределению с помощью критерия Колмогорова–Смирнова. Количественные показатели, имеющие нормальное распределение, описывались с помощью средних арифметических величин (M) и стандартных отклонений (SD), границ 95%-ного доверительного интервала (95% ДИ). В случае отсутствия нормального распределения количественные данные описывались с помощью медианы (Me) и нижнего и верхнего квартилей (Q1–Q3) Сравнение по количественному показателю, имеющему нормальное распределение, при условии равенства дисперсий выполнялось с помощью t-критерия Стьюдента. Сравнение двух групп по количественному показателю, распределение которого отличалось от нормального, выполнялось с помощью U-критерия Манна–Уитни. Направление корреляционной связи между двумя количественными показателями с распределением, отличным от нормального, оценивались с помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Теснота связи оценивалась по шкале Чеддока. Пороговое значение p-value было принято за≤0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. По результатам анализа уровня белка Kl у обследованных лиц были выявлены статистически значимые различия между соматически здоровыми лицами и пациентами с ВП (p<0,001) (табл. 2).
Таблица 2
Сравнение уровней белка Kl (нг/мл) у обследуемых лиц
|
Обследуемые |
n |
Me |
Q1–Q3 |
p |
|
Соматически здоровые лица |
30 |
0,69 |
0,63–0,90 |
<0,001* |
|
Бактериальная ВП |
45 |
0,51 |
0,43–0,59 |
* –p<0,05
Среди пациентов с ВП у 14 человек (15,2%) уровень белка Kl не выходил за границы интерквартильного размаха группы контроля и у 78 человек (84,8%) был ниже значений интерквартильного размаха группы контроля. Минимальное значение уровня белка Kl составило 0,34 нг/мл, а максимальное – 0,79 нг/мл.
При анализе уровня белка Kl в зависимости от степени тяжести ВП было выявлено, что его уровень статистически значимо ниже у пациентов с тяжелым течением по сравнению с пациентами со среднетяжелым течением (p=0,006). У пациентов с тяжелым течением ВП уровень белка Kl составил 0,43 [0,40–0,49] нг/мл против 0,52 [0,46–0,65] нг/мл у пациентов со среднетяжелым течением (рис. 1).
Рис. 1. Анализ уровня белка KL у пациентов с ВП со среднетяжелым и тяжелым течением
В качестве маркеров эндогенной интоксикации нами были проанализированы уровни МСМ, креатинина и мочевины. Некоторые исследователи считают, что уровень МСМ является одним из чувствительных признаков эндогенной интоксикации. Статистически значимые различия в уровнях МСМ у пациентов с острой пневмонией с разной степенью тяжести были выявлены в исследовании Е.А. Бородина c соавт. (2003) [14], статистически значимые различия уровня МСМ по сравнению с группой контроля (уровень был выше в 1,7 раза) и у пациентов с разной степенью тяжести ВП были продемонстрированы в исследовании Б.И. Гельцера (2020) [15].
Как видно из данных, представленных в таблице 3, уровень МСМ у соматически здоровых лиц и у пациентов с бактериальной ВП имел статистически значимые различия (p<0,001).
Таблица 3
Сравнение уровней МСМ (усл. ед.) у обследуемых лиц
|
Обследуемые |
n |
Me |
Q1–Q3 |
p |
|
Соматически здоровые лица |
30 |
0,280 |
0,273–0,288 |
<0,001* |
|
Бактериальная ВП |
45 |
0,391 |
0,312–0,456 |
* –p<0,05
При этом у пациентов с тяжелым течение ВП уровень МСМ составил 0,352 [0,308–0,427] усл. ед. против 0,466 [0,447–0,499] усл. ед. у пациентов со среднетяжелым течением. Различия были статистически значимы (p<0,001).
Рис. 2. Анализ уровня МСМ у пациентов с ВП со среднетяжелым и тяжелым течением
Значение уровня креатинина у пациентов с бактериальной ВП было 109,4 [95,1–120,1] мкмоль/л, мочевины – 5,9±0,9 (95% ДИ; 5,7–6,2) ммоль/л. Уровни креатинина и мочевины у пациентов с бактериальной ВП в зависимости от течения заболевания имели статистически значимые различия (p<0,002, p<0,001).Так, уровень креатинина был статистически значимо выше у пациентов с тяжелым течением ВП и составил 124,8 [116,9–135,9] мкмоль/л против 106,0 [93,0–117,6] мкмоль/л у пациентов со среднетяжелым течением.
Уровень мочевины также был статистически значимо выше у пациентов с тяжелым течением ВП и составил 6,9±0,6 (95% ДИ; 6,5–7,3) ммоль/л против 5,7±0,7 (95% ДИ; 5,4–5,9) ммоль/л у пациентов со среднетяжелым течением.
Далее нами был проведен корреляционный анализ для определения наличия корреляционной зависимости, направленности и тесноты по шкале Чеддока между уровнем белка Kl и показателями эндогенной интоксикации – МСМ, креатинином и мочевиной – у пациентов с бактериальной ВП. Взаимосвязи между уровнем белка Kl и уровнями креатинина и мочевины были статистически значимыми, отрицательные. Теснота связей по шкале Чеддока была заметная (рис. 3).
Рис. 3. Взаимосвязи между уровнем белка Kl и показателями эндогенной интоксикации (МСМ, креатинином, мочевиной) у пациентов с бактериальной ВП
Взаимосвязь уровня белка Kl и МСМ была статистически значимой (p=0,002), отрицательной. Коэффициент корреляции составил –0,44. Теснота связи по шкале Чеддока умеренная.
Заключение. Полученные данные свидетельствуют о наличии взаимосвязей между уровнем белка Kl и маркерами выраженности эндогенной интоксикации, а также о перспективности изучения уровня белка Kl для диагностики тяжести ВП. Так, у пациентов с ВП уровень белка Kl статистически значимо ниже, чем у соматически здоровых лиц. Также уровень белка Kl статистически значимо ниже у пациентов с тяжелым течением ВП по сравнению с пациентами со среднетяжелым течением. Между уровнем белка Kl и показателями эндогенной интоксикации (МСМ, креатинином, мочевиной) выявлено наличие статистически значимых отрицательных корреляционных связей. Сила взаимосвязей была больше между уровнем Kl и уровнем креатинина (–0,56) и мочевины (–0,65), чем между уровнем белка Kl и МСМ (–0,44).