Лабазник вязолистный Filipendula ulmaria (L.) Maxim. – представитель семейства розоцветных (Rosaceae) распространен в районах европейской части России и Сибири [1]. Два вида лабазника: лабазник вязолистный Filipendula ulmaria (L.) Maxim. и лабазник шестилепестный Filipendula hexapetala Gilib - являются типичными представителями флоры Самарской области.
Filipendula ulmaria и Filipendula hexapetala обитают в сырых и заболоченных лугах и лесах, а также на заболоченных берегов водоемов, болотах, среди кустарников, в разреженных лесах, по берегам рек, озер. Растения также имеют декоративный вид [1].
В природе лабазник вязолистный и лабазник шестилепестный размножаются преимущественно корневищами, реже семенами [1]. Природные ресурсы значительны, по мощи ресурсного потенциала изучаемые растения являются одними из перспективных травянистых растений России.
Имеются данные, что надземная и подземная части лабазника вязолистного в своем химическом составе имеют биологически активные соединения (БАС) и обладают широким спектром фармакологической активности [2-4].
Листья лабазника вязолистного в своем химическом составе содержат дубильные вещества (3,63–16,85%), фенолкарбоновые кислоты и их производные (кофейная и эллаговая кислоты). А также ряд флавоноидов, таких как гиперозид, кемпферол, кверцетин, авикулярин (2,1%) [5].
В стеблях лабазника вязолистного обнаружены флавоноиды и дубильные вещества (1,91%) [5].
Цветки Filipendula ulmaria содержат эфирное масло (0,2%), ароматические соединения: метилсалицилат (1,3%), салициловый альдегид, а также ряд флавоноидов: кверцетин, спиреозид (4,0–9,7%) [5].
Надземные и подземные части, в том числе цветки лабазника вязолистного в народной медицине используют в качестве антиспастического и вяжущего средств при желудочно-кишечных заболеваниях. Также сырье данного растения используют как ранозаживляющее, гемостатическое, потогонное, при эпилепсии, ревматизме [5]. Отвар из подземных частей и цветков используют при нервных болезнях, гипертонической болезни, как антигельминтное [5].
Настой из листьев и цветков лабазника вязолистного оказывает холинолитическое действие [5].
Согласно литературным данным, экстракт, полученный на основе 70%-ного этанола из надземной части лабазника вязолистного, обладает ноотропной, гепатопротекторной и антиоксидантной активностью [6-8].
Нами была изучена и описана антимикробная активность водно-спиртовых и водных извлечений надземных частей (трава, плоды) лабазника вязолистного и его близкородственного вида лабазника шестилепестного в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий. Данные были сравнены с субстанциями, которые обладают антимикробной активностью [9; 10].
Было доказано, что извлечения из сырья лабазника не уступают некоторым субстанциям (5% спиртовой раствор салициловой кислоты, 0,1% раствор левомицетина спиртовой, 0,1% раствор бензилпенициллина), обладающим антимикробным действием в отношении изучаемых бактерий (грамположительные бактерии Bacillus cereus, Staphylococcus aureus ATCC 29213 и грамотрицательные бактерии Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, а также дрожжеподобный гриб Candida albicans) [9; 10].
Обсуждая данные о химическом составе плодов лабазника вязолистного, следует отметить, что в него входят дубильные вещества (3,8–12,9%) и флавоноиды (2,2%) [5]. Ранее нами по результатам тонкослойной хроматографии были выявлены в плодах лабазника вещества стериновой и сапониновой природы [11].
Известно, что надземная часть лабазника вязолистного содержит простые фенолы (салицилаты) и вещества стериновой природы (β-ситостерин), обладающие антимикробной и противовоспалительной активностью [11].
Однако подобные вещества способны задерживать жидкость в организме, вызывая отеки. Это является нежелательным побочным эффектом и может отрицательно сказываться на процессе лечения. При этом противовоспалительные препараты, обладающие диуретической активностью, будут способствовать выведению из организма лишней жидкости, а также токсинов.
В связи с этим предстояло изучить диуретическую активность густого экстракта из плодов лабазника вязолистного для демонстрации перспективности создания противовоспалительных лекарственных препаратов на основе данного сырья с диуретической активностью.
Целью исследования являлось изучение влияния на выделительную функцию почек густого экстракта из плодов лабазника вязолистного.
Материал и методы исследования
В фазу плодоношения сырье было заготовлено и высушено в Самарской области (поселок Алексеевка) в июне – июле 2017 года. У растения подтверждали видовую специфичность при помощи определителей соответствующей флоры [1].
В лабораторных условиях было получено водно-спиртовое извлечение (1:5) на основе 70%-ного этилового спирта из плодов лабазника вязолистного, после чего из него путем упаривания под вакуумом получили густой экстракт.
Изучение диуретической активности проводили на кафедре фармакологии имени заслуженного деятеля науки РФ профессора А.А. Лебедева ФГБОУ ВО «СамГМУ» Минздрава России на 20 беспородных белых крысах обоего пола с массой от 200 до 250 грамм.
Животные при помощи внутрижелудочного зонда получали водную нагрузку в объеме 3% от массы тела по описанной методике [12; 13]. В качестве терапевтической дозы густого экстракта из плодов лабазника вязолистного была взята доза в 50 мг/кг.
По критерию Манна-Уитни проводили статистическую обработку полученных данных.
В качестве препаратов сравнения служили диуретические препараты фуросемид и гидрохлоротиазид. Действие диуретического эффекта фуросемида наступает после приема внутрь через 30-60 минут, и максимум действия наблюдается через 1-2 часа и сохраняется с продолжительностью эффекта в течение 2-3 часов (при сниженной функции почек – до 8 часов) [14]. Диуретическая активность гидрохлоротиазида наступает не так быстро, как у фуросемида, максимальная активность наступает примерно через 4 ч после приема, однако действие сохраняется в течение 6-12 ч [14].
Опыты по изучению острой токсичности густого экстракта из плодов лабазника вязолистного были исследованы на 20 белых беспородных красах обоего пола массой 200-250 г. Животные содержались в виварии при свободном доступе к воде на обычном рационе.
Животные были разделены на 2 группы по 10 крыс в каждой.
Одна группа получала однократно ??утрижелудоч?о густой экстракт ? дозе 15 г/кг на фоне 3%-ной ?од?ой нагрузки, а другая группа – очищенную воду ? аналогичном объеме. В первый день исследования острой токсичности густого экстракта лабазника вязолистного белые беспородные крысы находились под непрерывным наблюдением. Общая продолжительность эксперимента составляла 14 дней.
Результаты исследования и их обсуждение
В ходе проведенных хронических экспериментов было установлено, что внутрижелудочное введение густого экстракта из плодов лабазника вязолистного в дозе 50 мг/кг за 4 ч опытного периода на фоне 3%-ной водной нагрузки животным опытной группы способствовало достоверному увеличению показателей диуреза (на 36%), калийуреза (на 48%) относительно показателей водного контроля, при этом натрийурез и кретининурез изменялся недостоверно (рис. 1). Следует отметить, что увеличение диуреза произошло преимущественно за счет снижения канальцевой реабсорбции воды и калия (возрастание диуреза и калийуреза).
Рис. 1. Влияние внутрижелудочного введения извлечения из плодов лабазника вязолистного на выделительную функцию почек крыс за 4 ч эксперимента
Примечание: * - здесь и далее достоверность отличий показателей опытной группы животных, получавших лекарственное средство, от показателей контрольной группы животных, получавших воду, р<0,05.
Препарат сравнения фуросемид при однократном внутрижелудочном введении в пороговой дозе 1 мг/кг способствовал достоверному возрастанию диуреза (на 23%) и натрийуреза (на 31%) за 4 ч эксперимента в опытной группе животных относительно показателей водного контроля преимущественно за счет снижения канальцевой реабсорбции воды и натрия (рис. 2).
Следовательно, в 4-часовом опыте густой экстракт лабазника вязолистного стимулирует диурез аналогично препарату сравнения фуросемиду в пороговой дозе 1 мг/кг.
Рис. 2. Влияние внутрижелудочного введения фуросемида в пороговой дозе 1 мг/кг на выделительную функцию почек крыс за 4 ч эксперимента
В то же время в суточном хроническом эксперименте при однократном внутрижелудочном введении густого экстракта лабазника вязолистного в дозе 50 мг/кг на фоне 3%-ной водной нагрузки у животных опытной группы относительно показателей водного контроля отмечалось достоверное значительное увеличение всех исследуемых показателей экскреторной функции почек: диуреза (на 58%), натрийуреза (на 61%), калийуреза (на 74%) и креатининуреза (на 70%), как за счет повышения клубочковой фильтрации, так и за счет понижения канальцевой реабсорбции воды и ионов (рис. 3).
Рис. 3. Влияние внутрижелудочного введения извлечения из плодов лабазника вязолистного на выделительную функцию почек крыс за 24 ч эксперимента
В свою очередь, препарат сравнения гидрохлоротиазид, введенный однократно внутрижелудочно в эффективной средней терапевтической дозе 20 мг/кг, способствовал значительному достоверному возрастанию диуреза (на 40%), натрийуреза (на 54%) и калийуреза (на 55%) относительно водного контроля за 24 ч эксперимента, преимущественно за счет снижения канальцевой реабсорбции воды и ионов (рис. 4).
Таким образом, густой экстракт лабазника вязолистного в суточном эксперименте увеличивает диурез, снижая канальцевую реабсорбцию аналогично препарату сравнения гидрохлоротиазиду в эффективной средней терапевтической дозе 20 мг/кг, однако дополнительно симулируя клубочковую фильтрацию (возрастание креатининуреза).
Рис. 4. Влияние внутрижелудочного введения гидрохлоротиазида на выделительную функцию почек крыс за 24 ч эксперимента
В ходе исследования также были проведены эксперименты по изучению острой токсичности густого экстракта из плодов лабазника вязолистного. За время наблюдения в поведении беспородных белых крыс как контрольных, так и опытных групп отклонений не отмечалось, также не было зарегистрировано летальных исходов. На протяжении всего эксперимента (14 дней) вес опытных животных не имел достоверных отличий от веса контрольных крыс.
В результате однократное внутрижелудочное введение густого экстракта из плодов лабазника вязолистного в дозе 15 г/кг не привело к гибели испытуемых животных и токсическим проявлениям. Из этого следует, что изучаемый густой экстракт можно отнести к IV классу токсичности (малоопасные вещества) в соответствии с ГОСТ 12.1.007 – 76 [15].
Выводы
1. Однократное внутрижелудочное введение густого экстракта лабазника вязолистного в дозе 50 мг/кг на фоне 3%-ной водной нагрузки за 4 ч эксперимента способствует развитию мочегонной реакции у животных опытной группы относительно водного контроля преимущественно за счет канальцевого компонента механизма действия, аналогично действию препарата сравнения фуросемида в пороговой дозе 1 мг/кг.
2. Однократное внутрижелудочное введение густого экстракта лабазника вязолистного в дозе 50 мг/кг на фоне 3%-ной водной нагрузки за 24 ч опыта приводит к росту диуреза у животных опытной группы относительно водного контроля как за счет клубочкового, так и за счет канальцевого компонента механизма действия, в отличие от препарата сравнения гидрохлоротиазида в эффективной средней терапевтической дозе 20 мг/кг, стимулирующего мочеотделение преимущественно за счет канальцевого компонента.
3. Густой экстракт лабазника вязолистного обладает коротким латентным периодом и длительным диуретическим действием.
4. Густой экстракт из плодов лабазника вязолистного относится к IV классу токсичности в соответствии с ГОСТ 12.1.007 – 76, так как однократное внутрижелудочное введение препарата в дозе 15 г/кг не привело к гибели испытуемых животных.