Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

Рак молочной железы является наиболее распространенной формой рака у женщин [1]. При этом отмечается, что заболеваемость и смертность от рака молочной железы неуклонно растет [2]. По литературным данным около 90 % смертей, связанных с раком, возникают из-за его метастатического распространения [3]. Вместе с тем отмечается, что процесс метастазирования по кровеносным сосудам изучен значительно лучше, чем лимфогенный путь, несмотря на то, что наличие лимфогенного метастазирования – это ключевой показатель менее благоприятного прогноза в большинстве эпителиальных раков [4].

За последние несколько десятилетий традиционная точка зрения на рак, как однородной массы быстро пролиферирующих злокачественных клеток, претерпела существенные изменения. В подавляющем большинстве работ указывается на то, что раковый узел – сложная ткань, которая состоит из нескольких типов клеток. Иммунокомпетентные и другие клетки хозяина составляют микросреду, которая поддерживает рост, способствует прогрессированию и метастазированию опухоли [5; 6]. В этой связи исследования, посвященные тканевой организации опухолей, могут способствовать более полному пониманию механизмов, определяющих сложный процесс метастазирования.

Цель исследования: изучить тканевую организацию инвазивного протокового рака молочной железы при наличии и отсутствии метастазов в регионарные лимфатические узлы.

Материал и методы исследования

Проведено исследование операционного материала 30 пациентов в возрасте от 42 до 77 лет с диагнозом инвазивный протоковый рак молочной железы. По результатам патогистологического исследования у 9 из них (пациенты 1-й группы) были выявлены метастазы в регионарные лимфатические узлы, и у 21 пациента (2 группа) было диагностировано отсутствие лимфогенного метастазирования. Морфометрическое исследование биоптатов удаленных опухолей проводили на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином по стандартной методике.

Для описания патогистологической картины инвазивного протокового рака молочной железы выделяли три зоны: железисто-тубулярную, опухолевой инфильтрации и параканкрозного воспаления. Морфометрический анализ проводился на полученных предварительно 8 микрофотографиях для каждой зоны. При оценке принадлежности опухолевых клеток к высокодифференцированным, умереннодифференцированным и низкодифференцированным элементам учитывали степень выраженности клеточного полиморфизма, ядерно-цитоплазматическое соотношение, наличие митозов, в том числе патологических, способность к структурообразованию (формированию желез), сохранение функций клеток. Высокодифференцированные клетки имели мономорфные мелкие ядра с четким контуром, равномерным хроматином, сходные с ядрами нормальных эпителиальных клеток и способностью образовывать железистые структуры. Низкодифференцированные клетки характеризовались неправильной формой, выраженным полиморфизмом, ядра имели полиморфное строение, с четкими ядрышками и отсутствием способности к формированию структур. Умереннодифференцированные клетки занимали промежуточное положение между высоко- и низкодифференцированными по выраженности вышеуказанных признаков. Анализ относительной площади клеточных элементов проводился с помощью программного обеспечения ImageJ 1.42g (Национальный институт здоровья, США) с дополнительными модулями Grid и Cell Counter, обеспечивающими создание морфометрической сетки с 130 рабочими точками-узлами на цифровых изображениях со способностью случайного смещения координат, а также подсчет исследуемых элементов. Определяли сумму баллов, отражающих степень злокачественности в соответствии с гистологической градацией рака молочной железы, рекомендованной ВОЗ [7].

Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием программного пакета для статистической обработки SPSS v 17.0 for Windows. Для сравнения независимых групп использовали критерий Крускала – Уоллиса с последующим межгрупповым сравнением с помощью критерия Манна – Уитни. Различия между значениями сравниваемых параметров расценивали как статистически значимые при р < 0,05. Полученные в ходе исследования данные представлены как медиана (Me) и интерквартильный размах (Q1; Q3). Рассчитывали коэффициент ранговой корреляции Спирмена (r), и проводили ROC-анализ.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты исследования позволили установить, что при сравнении морфометрических показателей опухолевой ткани больных с инвазивным протоковым раком молочной железы отмечались статистически значимые различия между пациентами, имеющими метастазы в регионарные лимфатические узлы, и пациентами, у которых они отсутствовали (табл. 1). Достаточно примечательным является тот факт, что из исследованных морфологических параметров, характеризующих опухолевую ткань пациентов обеих групп, достоверно различалась показатели, отражающие состояние как опухолевых клеток, так и стромы, а именно степень васкуляризации и микроокружение опухоли. Последнему фактору в современной литературе, посвященной проблемам патогенеза опухолевой прогрессии, уделяется пристальное внимание, поскольку изменение характера микроокружения опухоли у больных раком молочной железы коррелирует со снижением безрецидивной и общей выживаемости [8]. Кроме того, отмечается, что характер микроокружения влияет на степень васкуляризации опухоли [9].

Таблица 1

Данные морфометрического анализа инвазивного протокового рака по зонам опухоли Me (Q1; Q3)

* – достоверные различия по сравнению с группой пациентов с инвазивным протоковым раком, не имеющих метастазы в регионарные лимфатические узлы, при p < 0,05;

# – баллы определялись в соответствии с гистологической градацией рака молочной железы, рекомендованной ВОЗ [6].

Анализ изученных показателей тканевой организации инвазивного протокового рака молочной железы позволил выявить положительные корреляционные связи между наличием метастазов в регионарных лимфатических узлах и: 1) количеством патологических митозов (r = 0,616; p < 0,001); 2) степенью злокачественности (r = 0,487; p = 0,006); 3) количеством микрососудов в железисто-тубулярной зоне (r = 0,515; p = 0,004); 4) относительной площадью, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне опухолевой инфильтрации (r = 0,513; p = 0,004); 5) относительной площадью, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне параканкрозного воспаления (r = 0,698; p < 0,001); 6) количеством микрососудов в зоне параканкрозной инфильтрации (r = 0,471; p = 0,009). Также были выявлены положительные корреляционные связи между количеством лимфатических узлов с метастазами и: 1) количеством патологических митозов (r = 0,593; p = 0,001); 2) степенью злокачественности (r = 0,507; p = 0,004); 3) количеством микрососудов в железисто-тубулярной зоне (r = 0,530; p = 0,003); 4) относительной площадью, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне опухолевой инфильтрации (r = 0,515; p = 0,004); 5) относительной площадью, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне параканкрозного воспаления (r = 0,673; p < 0,001); 6) количеством микрососудов в зоне параканкрозной инфильтрации (r = 0,499; p = 0,005).

Для выявления показателей, имеющих наибольшую ценность для характеристики патологического процесса в плане метастатического поражения регионарных лимфатических узлов, был проведен ROC-анализ, результаты которого представлены в таблице 2.

Таблица 2

Данные ROC-анализа у пациентов с инвазивным протоковым раком молочной железы для переменной состояния, характеризующей наличие метастазов в регионарные лимфатические узлы

Таким образом, повышение относительной площади, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне параканкрозного воспаления, является наиболее чувствительным индикатором наличия метастазов в регионарные лимфатические узлы по сравнению с другими показателями.

Многочисленные исследования подтверждают, что количество опухолеассоциированных макрофагов сопряжено с плохим прогнозом заболевания у пациентов с раком различной локализации [10-12]. В отношении рака молочной железы было показано, что относительное количество опухолеассоциированных макрофагов связано со стадией заболевания и его негативным прогнозом [6]. Это объясняется тем, что опухолеассоциированные макрофаги способствуют росту опухоли [5;13], поскольку стимулируют ангиогенез в опухолевой ткани [14]. Кроме того, отмечается, что комплекс опухолеассоциированных макрофагов и фибробластов сопряжен с метастазированием рака молочной железы [15].

Заключение

Проведенное исследование тканевой организации инвазивного протокового рака молочной железы позволило выявить ее особенности при наличии и отсутствии метастазов в регионарные лимфатические узлы. Были выявлены корреляционные связи между наличием метастазов в регионарные лимфатические узлы и количеством патологических митозов, суммой баллов, определяющих степень злокачественности, количеством микрососудов в железисто-тубулярной зоне, относительной площадью, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне опухолевой инфильтрации, относительной площадью, занимаемой опухолеассоциированными макрофагами в зоне параканкрозного воспаления, и количеством микрососудов в зоне параканкрозной инфильтрации. Выраженность клеточной инфильтрации является важным признаком лимфогенного метастазирования опухоли. Увеличение относительного содержания опухолеассоциированных макрофагов в зоне параканкрозного воспаления является более показательным признаком метастазирования в регионарные лимфатические узлы, чем количество патологических митозов или степень злокачественности опухоли, а следовательно, он может служить в качестве индикатора лимфогенного метастазирования.