На современном этапе основная задача противораковой борьбы заключается в профилактике и раннем распознавании злокачественных новообразований. Существенная роль отводится морфологическим исследованиям, особенно при выявлении ранних признаков патологической пролиферации.
В связи с широким распространением длительного ношения внутриматочных контрацептивов (ВМК) и возможностью развития при этом воспалительных и дистрофических изменений [7,9,10], внимание исследователей привлекают онкологические аспекты внутриматочной контрацепции [8,11,13].
Поскольку возникновение опухолевой ткани всегда сопровождается перестройкой генетического аппарата, то в первую очередь регистрируются ранние изменения в виде биометрических и гистохимических изменений ядра [1,5,6]. Поэтому изучение таких изменений может дать объективные тесты для оценки риска малигнизации эндометрия при длительной внутриматочной контрацепции.
Задачей настоящего исследования явилось изучение содержания полового хроматина и особенностей митотического режима клеток эндометрия при использовании ВМК от 6 мес. до 12 лет.
Соскобы эндометрия брали на 8–10-й или на 19–23-й дни менструального цикла сразу после удаления ВМК. Ко времени обследования все женщины (92) были практически здоровы, средний возраст их составил 29,5+/2,7 лет. Для изучения отобраны случаи, в которых слизистая оболочка матки была без патологических изменений. Контролем служил эндометрий, полученный у 21 женщины перед введением ВЫМК цуг-методом (в соответствующие дни цикла).
Митотический режим изучался на гистологических срезах толщиной 6–9 мкм, окрашенных железным гематоксилином по Гейденгайну. Определяли митотическую активность (МА) – число митотически делящихся клеток на 100 полей зрения микроскопа (об. 90, ок. 10), процентное соотношение фаз митоза, общее число патологических митозов и количество различных форм патологии митоза, общее число патологических митозов и количество различных форм патологии кариокинеза, выраженное в процентах к общему числу митозов. Определение полового хроматина (ПХ) и его подсчет производили на гистологических срезах с реакцией Фельгена при помощи светового микроскопа с увеличением до 1200 раз. Число эпителиальных клеток, содержащих ПХ. Подсчитывали в 2–3 участках среза с выведением средних показателей в процентах. С этой целью изучалось не менее 300 клеток в каждом срезе. Полученные результаты сравнивались с контролем, обрабатывались статистически с использованием критерия достоверности Фишера – Стъюдента.
Результаты исследования показали, что в контрольной группе пациенток на 8–10-й день цикла (средняя стадия пролиферации) МА железистого эпителия 50,1+/2,2, клеток стромы ниже – 22,3+/2,06. Среди нормальных митозов преобладали профазы и метафазы (в эпителии соответственно 42,3 % и 32,45 %. В строме – 45.3 % и 34,4 %). Аналогичные данные о соотношении профаз и метафаз в клетках эндометрия получены рядом исследователей [ 2,4]. Патологические митозы составили 1,8+/0,3 % в эпителии желез и 1,7+ 0,2 % – в клетках стромы. Отдельные формы патологии митоза были в основном представлены отставанием хромосом в метакинезе и при расхождении, часто встречались К-митозы. Реже – мосты. На преобладание этих типов патологии кариокинеза в эндометрии указывают также другие авторы [4,12].
На 19–23-й день менструального цикла (средняя стадия секреции) в контрольной группе женщин МА эпителия составляла 16,2+0,4, в строме – 4,8+ 0,5. Превалировали профазы и метафазы, причем профазы встречались чаще метафазы. Число патологических митозов в эту стадию цикла имело тенденции к снижению, спектр их был тот же. Что и в фазе пролиферации.
Как видно из табл. 1, при внутриматочной контрацепции МА клеток эндометрия не претерпевала значительных изменений. Лишь в группе женщин, применявших ВМК сроком до 1 года, выявлено снижение МА клеток эпителия и стромы эндометрия, но оно было преходящим, и при более длительном использовании ВМК отмечалась нормальная митотическая активность. Подобные результаты приводят некоторые исследователи [2, 3], изучавшие митотический режим эндометрия при ношении ВМК. Поскольку эстрогены регулируют синтез ДНК и вступление клеток в фазу митоза, снижение пролиферативной активности клеток эндометрия при использовании инертных ВМК в течение года Л.С. Ежова и соавт. [2] объясняют нарушением утилизации стероидных гормонов в клеточных структурах органов-мишеней.
Таблица 1
Характеристика митотического режима эндометрия женщин при различных сроках применения ВМК
Показатели митотического режима
|
Клетки |
Срок применения ВМС
|
|||||
Контроль |
До 12 мес |
13-36 мес |
37-60 мес |
61-84 мес |
85-144 мес |
||
Средняя стадия пролиферации |
50,1+/-2,2
22,3+/-2,06
|
36,6+/-3,4* 13,1+/-1,4* |
52,8+/-1,3 22,9+/-3,2 |
48,5+/-2,0 21,6+/-1,2 |
51,6+/-3,7 24,1+/-2,3 |
52,3+/-2,1 23,4+/-1,9 |
|
Митотическая активность
|
Эпителий
Строма |
||||||
Число метафаз |
Эпителий
Строма |
32,4+/-2,1
34,4+/3,2 |
33,6+/-4,1 34,3+/-2,6 |
39,3+/-3,5 38,7+/-2,6 |
30,7+/-0,9 28,5+/-1,9 |
38,2+/-2,5 34,7+/-1,6 |
48,6+/-3,7* 48,3+/-3,5*
|
% патологических митозов
|
Эпителий
Строма |
1,8+/-0,3
1,7+/-0,2 |
1,7+/-0,6 1,46+/-0,1 |
1,95+/-0,1 1,3+/-0,2 |
1,6+/-0,2 1,5+/-0,2 |
2,4+/-0,4 1,8+/-0,3 |
4,3+/-0,3* 2,8+/-0,2*
|
Средняя стадия секреции
|
16,2+/-0,4
4,8+/-0,5 |
14,9+/-0,6 3,37+/-0,4* |
15,1+/-0,35 4,2+/-0,2 |
15,49+/-0,2 5,75+/-0,2 |
15,62+/-0,2 5,34+/-0,3 |
16,9+/-0,6 5,2+/-1,0
|
|
Митотическая активность
|
Эпителий
Строма |
||||||
Число метафаз |
Эпителий
Строма
|
25,1+/-1,6
25,6+/-4,7 |
22,9+/-2,6 29,1+/-3,5 |
26,9+/-5,8 26,4+/-3,5 |
30,5+/-3,9 35,3+/-2,7 |
30,3+/-4,2* 38,3+/-3,9 |
47,4+/-2,5* 36,4+/-2,3
|
% патологических митозов |
Эпителий
Строма
|
0,5+/-0,02
0,4+/-0,05 |
0,35+/-0,01* 0,73+/-0,15 |
0,61+/-0,12 0,6+/-0,09 |
0,59+/-0,05 0,5+/-0,04 |
0,48+/-0,01 0,69+/-0,06* |
0,71+/-0,14* 0,92+/-0,02*
|
*р<0,05
К настоящему времени накоплен большой фактический материал [4 и др.], позволяющий считать, что малигнизация эндометрия сопровождается не только возрастанием интенсивности клеточного деления, но и резким увеличением числа метафаз (9 до 70 %) и патологических митозов (до 30–40 %).
Анализ митотического режима клеток эпителия и стромы эндометрия на фоне применения ВМК показал, что соотношение числа профаз и метафаз, количество и спектр патологических митозов значительно не отличались от данных контрольной группы женщин. Однако в нашем наблюдении у пациенток, применявших внутриматочные контрацептивы более 84 мес, наблюдалось некоторое увеличение числа метафаз и патологических митозов (р<0,05) с преобладанием патологии тех же видов,что и в контроле.
В результате выполненного исследования было установлено, что среднее содержание полового хроматина (ПХ) в нормальном пролиферирующем эндометрии контрольной группы женщин составило 35,9+/2,1 % при крайних вариантах от 23 до 56 %, в секреторно преобразованном – 41,1+/1,6 % при крайних вариантах от 27 до 64 %.
Данные о среднем содержании ПХ в железистом эпителии неизмененного эндометрия в зависимости от длительности применения ВМК представлены в табл. 2, из которой видно, что содержание ПХ не претерпевало значительных изменений, характерных для пролиферативных процессов слизистой оболочки матки [12]. Однако наблюдалось повышение содержания ПХ в эндометрии женщин, использовавших ВМК до 12 мес (р<0,05). Обнаруженное процентное увеличение ПХ сочеталось с понижением митотической активности железистого эпителия эндометрия. Снижение пролиферативной активности клеток слизистой матки на фоне применения ВМК было транзиторным.
Таблица 2
Содержание полового хроматина в железистом эпителии эндометрия в зависимости от длительности внутриматочной контрацепции
Срок применения ВМС (мес)
|
Средняя фаза пролиферации
|
Средняя фаза секреции |
||
Число женщин |
Содержание ПХ в% |
Число женщин |
Содержание ПХ в % |
|
Контроль
|
10 |
35,9+/-2,1 |
11 |
41,1+/-1,6 |
6 – 12
|
10 |
49,3+/-1,1* |
10 |
54,2+/-2,3* |
12 – 36 |
11 |
32,7+/-1,5 |
10 |
43,5+/-1,1
|
37 – 60 |
10 |
36,4+/-2,1
|
12 |
39,9+/-1,6 |
61 – 84 |
10 |
33,8+/-1,7
|
10 |
38,9+/-2,0 |
85 – 144 |
8 |
34,1+/-1,9
|
10 |
40,9+/-1,7 |
*р<0,05.
Таким образом, в результате проведенных исследований можно заключить, что в эндометрии при использовании внутриматочных контрацептивов не создаются условия для возникновения выраженных пролиферативных процессов и атипии.