Патогенетическая взаимосвязь развития хронического панкреатита и сахарного диабета не вызывает сомнений. Важным механизмом в аутокаталитическом воспалении поджелудочной железы с поражением экзокринной части паренхимы и островков Лангенгарса является повышение сосудистой проницаемости, с каскадным запуском проферментов, высвобождением биологически активных веществ, активированием калликреин-кининовой системы [1;2;3]. Биологически активные кинины повышают проницаемость сосудистых стенок, создавая условия для развития венозного стаза и интерстициального отека, как экзокринной части, так и эндокринной части поджелудочной железы. При этом специфика репаративных процессов эндокринной части поджелудочной железы, функции которых внепанкреатическими механизмами, в отличие, от экзокринной части ПЖ, не восполняется, диктует целесообразность изучения поражения инсулярного аппарата при экспериментальном сахарном диабете [4;5].
Данное обстоятельство обусловливает актуальность поиска и изучения лекарственных средств растительного происхождения с выраженными противовоспалительными, сосудоукрепляющими и противодиабетогенными свойствами.
Объектом настоящего исследования явилось комплексное растительное средство «Диабефит», разработанное на основе прописей тибетской медицины, в состав которого входят растения, широко применяющиеся в тибетской медицине, такие как трава горца птичьего (Polygonumaviculare L.), трава крапивы двудомной (Utricadioica L.), корни и корневища девясила высокого (Inulahelenium), побеги черники обыкновенной (Vancciniummytrillus L.), кора ивы козьей (Salexcarpia L.).
Цель работы: исследование фармакологической и фармакотерапевтической эффективности многокомпонентного растительного средства «Диабефит» на сосудистую проницаемость и течение экспериментального сахарного диабета.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на крысах обоего пола линии Вистар с массой 160–180 г. в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР №755 от 12.08.77 г. и «Правилами Европейской конвекции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей». Животные получены из питомника г. Ангарска. Для исследования по изучению влияния растительного средства на сосудистую проницаемость экспериментальные животные были распределены на 3 группы: интактные, контрольные (острое асептическое воспаление), опытные (воспаление+«Диабефит»). За 1 час до исследования животным опытной группы внутрижелудочно однократно вводили водный раствор фитоэкстракта «Диабефит» в терапевтической дозе 300 мг/кг в объеме 10 мл/кг. Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество дистиллированной воды по аналогичной схеме. Острое асептическое воспаление вызывали однократным внутрибрюшинным введением 0,05 % раствора уксусной кислоты. Через 30 мин после инъекции уксусной кислотой животных декапитировали под легким эфирным наркозом. Изучение влияния полифитоэкстракта на проницаемость сосудистой стенки осуществляли методом «меченых сосудов», результаты исследований представлены в таблице 1.
Таблица 1
Влияние «Диабефита» на проницаемость сосудистой стенки
|
Группы животных |
Кол-во брыжеечных окон (в % ко всем просмотренным) |
Число крыс с различными степенями метки (в % от всего числа крыс в опыте) |
||||||
|
Без метки |
1-10 «меченых сосудов» |
10 |
0 |
I |
II |
III |
IV |
|
|
Интактная |
80 |
20 |
0 |
100 |
100 |
10 |
0 |
0 |
|
Контрольная |
12 |
35 |
53 |
0 |
100 |
100 |
85 |
45 |
|
Опытная «Диабефит» |
0 |
74 |
26 |
100 |
100 |
100 |
16 |
0 |
Экспериментальные исследования противодиабетической активности испытуемого растительного средства изучались на модели аллоксанового сахарного диабета, что позволило оценить степень поражения клеток островков Лангерганса и изменения уровня перекисного окисления липидов (ПОЛ), так как большинство авторов связывают диабетогенный эффект аллоксана с повышенной продукцией свободных радикалов перекисей водорода, оказывающих прямое цитотоксическое действие на островковый аппарат поджелудочной железы [6;7; 8; 9].
Опыты проведены на белых беспородных крысах – самцах линии Вистар с исходной массой 260–290 г. «Диабефит» вводили внутрижелудочно в дозе 300 мг/кг один раз в день в объеме 10 мл/кг в течение 5 суток до введения аллоксана и далее до конца эксперимента. Аллоксан вводили внутрибрюшинно однократно в дозе 55 мг/кг предварительно голодавшим животным (24 часа). Препарат сравнения «Арфазетин» вводили в объеме 10 мл/кг массы по аналогичной схеме. Контрольная группа животных получала эквиобъемное количество дистиллированной воды. Исследования проводили через 3 и 7 суток после введения аллоксана. Результаты исследований приведены в таблицах 2 и 3.
Таблица 2
Влияние «Диабефита» на течение аллоксанового диабета у белых крыс (3-е сутки)
|
Показатели |
Группы животных |
|||
|
Интактная |
Контрольная (аллоксан+Н20) |
Аллоксан + «Диабефит» |
Аллоксан + «Арфазетин» |
|
|
Глюкоза, ммоль/л |
7,33±0,5 |
26,15±2,21 |
18,10+1,47* |
21,47±1,52 |
|
Гликоген печени, мг/% |
4850±370 |
2967+153 |
3675+214* |
3127±196 |
|
Каталаза, мкат/л |
33,60±2,71 |
14,83+1,15 |
27,20+2,08* |
21,50±1,93 |
|
ДК, ед.ОП. |
6,25+0,50 |
11,45+0,81 |
7,80+0,65* |
8,63+0,72 |
|
МДА в сыворотке крови, мкмоль/мл мин |
5,37±0,41 |
15,74+1,27
|
6,92±0,47* |
10,43±0,75 |
|
МДА в гомогенате подж. железы, мкмоль/мл мин |
11,41±0,82 |
16,37±1,50 |
12,45+1,07* |
15,08+1,36 |
|
МДА в гомогенате печени, мкмоль/млмин |
10,46±0,69 |
26,1311,95 |
20,55±1,72* |
21,20+1,80 |
Таблица 3
Влияние «Диабефита» на течение аллоксанового диабета у белых крыс (7-е сутки)
|
Показатели |
Группы животных |
|||
|
Интактная |
Контрольная (аллоксан+Н20) |
Аллоксан + «Диабефит» |
Аллоксан + «Арфазетин» |
|
|
Глюкоза, ммоль/л |
7,33±0,5 |
11,75±0,80 |
8,83+0,61 * |
9,22±0,78 |
|
Гликоген печени, мг/% |
4850±370 |
3925+219 |
4771+358* |
43681291 |
|
Каталаза, мкат/л |
33,60+2,71 |
21,75±2,04 |
30,83±2,82* |
29,37±2,50 |
|
ДК, ед.ОП. |
6,25±0,50 |
10,82±0,74 |
8,94±0,66* |
9,53±0,70 |
|
МДА в сыворотке крови, мкмоль/мл-мин |
5,37±0,41 |
13,45±1,18 |
7,13±0,58* |
9,56±0,72 |
|
МДА в гомогенатеподж. железы, мкмоль/мл-мин |
11,41+0,82 |
15,73+1,35 |
12,20±0,75* |
14,36±1,20 |
|
МДА в гомогенате печени, мкмоль/мл-мин |
10,46+0,69 |
20,47+1,68 |
17,82+1,61 |
18,92±1,74 |
Результаты
Данные, приведенные в таблице 1, свидетельствуют о наличии у испытуемого средства сосудоукрепляющего действия. Так, у животных, получавших «Диабефит», количество брыжеечных окон с 10 и более «мечеными сосудами» уменьшилось в 2 раза, по сравнению с контролем, а количество брыжеечных окон от 1 до 10 «меченых сосудов» увеличилось в 2 раза. При исследовании проницаемости сосудов по интенсивности метки количество животных с самыми интенсивными метками, соответствующими III и IV степеням проницаемости, у крыс опытной группы уменьшалось соответственно на 19 % и 100 %, по сравнению с контролем.
Модель экспериментального аллоксанового диабета доказывает диабетогенное действие аллоксана, так сравнительный анализ показателей в интактной и контрольной группах животных на 3 и 7 сутки эксперимента показывает, что наибольшее повреждающее воздействие отмечается на ранних сроках исследования, что проявляется в повышении концентрации глюкозы в сыворотке крови в 3,6 раза, снижении уровня гликогена в печени в 1,6 раза, а также в снижении активности фермента антиоксидантной защиты – каталазы в 2,3 раза и повышении содержания продуктов ПОЛ: ДК – в 1,8 раза, МДА в сыворотке крови – 2,9 раза, МДА в гомогенате поджелудочной железы в 1,4 раза, МДА в гомогенате печени – в 2,5 раза, по сравнению с данными в контроле.
Из таблицы 2 следует, что «Диабефит» в экспериментально-терапевтической дозе 300 мг/кг животным опытной группы на 3 сутки эксперимента после введения аллоксана снижает уровень глюкозы на 31 %, а содержание гликогена в печени увеличивает на 19 % по сравнению с контрольными показателями. Проведенные параллельно исследования ПОЛ и системы антиоксидантной защиты отражают благоприятное воздействие «Диабефита» на свободнорадикальное окисление липидов при экспериментальном сахарном диабете. Так, активность каталазы в сыворотке крови у животных опытной группы возрастает на 45 % по сравнению с показателями в контроле, содержание ДК снижается на 32 %, МДА сыворотки крови – на 56 %, МДА в гомогенате поджелудочной железы – на 24 %, МДА в гомогенате печени – на 21 %.
Анализ результатов эксперимента, представленных в таблице 3, подтверждает благоприятное влияние «Диабефита» на течение экспериментального сахарного диабета (7 сутки). Установлено, что концентрация глюкозы в сыворотке крови животных опытной группы снижается на 25 %, уровень гликогена повышается на 18 %, МДА сыворотки крови снижается на 47 %, МДА в гомогенате поджелудочной железы – на 22 %, МДА в гомогенате печени – на13 % по сравнению с данными в контрольной группе.
Заключение
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что испытуемое растительное средство «Диабефит» в дозе 300 мг/кг оказывает выраженное сосудоукрепляющее действие, противодиабетогенное действие.