Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

В медицинской биотехнологии постановка экспериментов при помощи моделирования патологических состояний, например ожогового повреждения кожи, имеет огромное значение для глубокого исследования крови и кроветворных органов [3]. Исходя из этого, необходимо тщательное и всестороннее изучение всех изменений, которые происходят в организме при этих воздействиях. Главным образом это относится к системам поддержания гомеостаза [2].

Ожоговые поражения кожи стали в современном мире одним из наиболее социально значимых и распространенных типов травматических повреждений у человека. Изучению вопроса реакции клеток крови на ожоги посвящен ряд исследований [1, 8].

Любое заболевание, патологический процесс, а также ряд физиологических сдвигов могут в той или иной степени отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови [5]. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови. Белые клетки крови, имея высокую реактивность, быстро включаются в адаптационные реакции. Они способны к неспецифическому реагированию в ответ на альтерирующие воздействия.

Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения [1].

Свой вклад в общее состояние системы организма вносят компоненты крови. Наиболее уязвимым объектом для действия продуктов свободнорадикального окисления липидов является стенка кровеносных сосудов, что обусловлено высоким уровнем кислорода в крови и низким уровнем его утилизации [9]. В условиях патологического процесса происходит поражение неклеточного компонента сосудистой стенки.

Цель исследования – изучение показателей периферической крови половозрелых крыс в норме и в условиях термического воздействия.

Материалы и методы. Объектом исследования явились 50 беспородных крыс-самцов 4-месячного возраста. Во время эксперимента регистрировали общее состояние и поведение животных. Самцы крыс были разделены на пять групп по типу воздействия:

I группа – животные, не подвергшиеся ожоговому воздействию (контрольная, 10 шт.);

II группа – животные, получившие ожоговое воздействие и не подвергшиеся терапии (10 шт.). Раны регенерировали естественным путем;

III группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии спреем «Д-Пантенол» (10 шт.);

IV группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии бальзамом мазевой формы «Спасатель» (10 шт.);

V группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии аппликациями настойки календулы (10 шт.).

Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов.

Уровень гемоглобина в образцах крови крыс определяли электрофотометрическим способом на гемоглобинометре APEL Hemoglobinmeter HG-202. Мазки фиксировали и окрашивали по Романовскому – Гимзе. Идентификация форменных элементов крови проводилась согласно методике Н. Т. Ивановой [4]. Количество эритроцитов крови подсчитывали по стандартной методике в камере Горяева. Количество лейкоцитов считали по мазкам крови крыс.

Для оценки уровня свободнорадикального окисления и выраженности в связи с этим липолитических процессов в крови проводили измерение перекисной резистентности эритроцитов. Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про– и антиоксидантный баланс организма [6].

Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию методов определения степени перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) А. А. Покровского и А. А. Абразцова [7], которую предложили А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров и А. А. Резаев [4].

Результаты исследования и их обсуждение. Анализ гематологических исследований экспериментальных животных показал, что наиболее высокий уровень гемоглобина периферической крови наблюдался у крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол», что наглядно отображено в таблице 1. В группе крыс, лечившихся настойкой календулы, данный показатель незначительно отличался от значений у обожженных животных, не получавших лечения.

Таблица 1

Гематологические показатели через 3 суток после ожоговой травмы

Примечание: * – Р<0,05 по сравнению с контролем.

Изменение уровня гемоглобина в результате опыта отмечено в таблице 1. Высокий уровень гемоглобина наблюдался у крыс, лечившихся Д-пантенолом. Средний показатель уровня гемоглобина отмечен у крыс, леченных бальзамом «Спасатель». В экспериментальной группе с настойкой календулы он незначительно и статистически недостоверно отличался от значений у животных 3 группы.

Выявлено, что термический ожог кожи вызвал уменьшение количества эритроцитов периферической крови крыс. Установлено, что при лечении ожогов этот показатель несколько увеличивался, например, при терапии бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол».

Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про- и антиоксидантный баланс организма [10].

По данным табл. 2 показано, что не леченный термический ожог межлопаточной области спины крыс способствует наиболее полному перекисному гемолизу эритроцитов крови крыс (степень гемолиза, в среднем, 7 %, p<0,001). Лечение ожогов кожи бальзамом «Спасатель» вызывает средний гемолиз (степень гемолиза в среднем 3,94 %, р<0,05), при терапии ожоговых травм межлопаточной области спины крыс спреем Д-пантенолом наблюдался частичный гемолиз (степень гемолиза в среднем и 3,62 %, Р<0,05).

Таблица 2

Перекисная резистентность эритроцитов самцов крыс (% гемолизированных эритроцитов)

Примечание: в сравнении с контрольными животными: *р<0,05; **p<0,01; ***p<0,001; в сравнении с группой 2-Ожог: #р<0,05; ##p<0,01; ###p<0,001.

Анализ данных по определению перекисного гемолиза эритроцитов самцов белых крыс показал, что устойчивость эритроцитов к перекисной провокации значительно повышалась в условиях лечения ожогов кожи крыс аппликациями бальзамом «Спасатель». Воздействие аппликациями мазью «Д-пантенол» привели к повышению устойчивости эритроцитов к перекисной провокации и приблизили показатели перекисного гемолиза эритроцитов к контролю. Термический ожог без лечения резко снизил устойчивость эритроцитов к перекисной провокации. Аппликации настойкой календулы незначительно повысил устойчивость эритроцитов к гемолизу (см. табл. 2).

Установлено, что термические ожоги существенно влияют и на общее число лейкоцитов, что проявлялось выраженной лейкопенией во все сроки наблюдения. В табл. 3 представлена некоторая волнообразность лейкопении. Так, на 3-и сутки количество лейкоцитов составляло 1,8±1,4 × 10⁹, на 7-е – 2,5±1,4 × 10⁹, на 14-е – 0,85±1,4 × 10⁹, на 30-е – 2,4±1,4 × 10⁹. Учитывая, что в контрольной серии уровень лейкоцитов составлял 10,2±1,4 × 10⁹, что соответствует и литературным данным [9], отмечено значительное снижение числа защитных клеток крови.

Таблица 3

Содержание лейкоцитов в периферической крови крыс

Примечание: * – p<0,05 – достоверность различий между группами животных по сравнению с контролем.

Наблюдалось изменение общего количества лейкоцитов после термического воздействия между экспериментальными группами и контролем (см. табл. 3). В ходе экспериментов было выявлено, что у животных, получавших терапию Д-пантенолом, происходило незначительное уменьшение общего количества лейкоцитов в сравнении с контролем. У животных, получавших лечение настойкой календулы, количество лейкоцитов достоверно уменьшилось в сравнении с контрольной группой на 22 % (р<0,05).

Изучение лейкоцитарной формулы дало не менее интересные результаты. В табл. 4 отражены результаты исследования влияния ожоговой травмы на показатели лейкоцитарной формулы периферической крови подопытных крыс. В контрольной серии в формуле преобладали лимфоциты до 55–60 %, нейтрофилы составляли 40 %. При исследовании получено, что термический ожог приводил к достоверному и выраженному увеличению процентного числа лимфоцитов и нейтрофилов. Так, на 3-и сутки лимфоциты составляли 67,4 %.

Таблица 4

Изменение показателей лейкоцитарной формулы на 3-и сутки эксперимента

Примечание: р<0,05, * – в сравнении с контролем,

# – в сравнении с группой получивших ожог без лечения.

Данные эксперимента моделирования термического ожога межлопаточной области спины белых крыс свидетельствовали о достоверном колебании количества нейтрофилов у животных, получавших лечение аппликациями спрея, в сравнении с контрольной группой и группой, не получавших лечение (рис. 1).

Рис. 1. Количество нейтрофилов (M±m, %) в разных опытных группах

Отмечено, что показатели количества нейтрофилов, по сравнению с контролем, чуть ниже в группе, лечившихся спреем «Д-пантенол», и незначительно выше в группе, лечившихся бальзамом «Спасатель». На рис. 2 видно, что отсутствие терапии ожога у 2 группы крыс отразилось на большем количественном содержании лимфоцитов крови.

Рис. 2. Количество лимфоцитов (M±m, %) в разных опытных группах

У группы крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель», количество лимфоцитов увеличилось. При сравнении крыс, лечившихся спреем «Д-пантенол», с контрольной группой наблюдалось снижение количества лимфоцитов, а у крыс, лечившихся настойкой календулы, количество лимфоцитов практически не отличалось от 2 группы.

При ожоге наблюдалось изменение показателей эозинофилов: увеличение этого показателя в группе 2 (ожог без терапии), в сравнении с группами крыс, получавших лечение (р<0,05). У животных, лечившихся спреем, количество эозинофилов повысилось на 22 %, по сравнению с контролем, при терапии настойкой календулы оно понизилось, что не достоверно (рис. 3).

Рис. 3. Количество эозинофилов (M±m, %) в разных опытных группах

Как видно из круговой диаграммы на рис. 4, термическое воздействие без лечения приводило к снижению количества моноцитов, терапия аппликациями бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол» стимулировало незначительное увеличение количества моноцитов в крови, по сравнению с контрольной группой подопытных животных (рис. 4).

Рис. 4. Количество моноцитов (M±m, %) в разных опытных группах

Заключение

Исследование таких гематологических показателей, как количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина и состояние перекисной резистентности эритроцитов, свидетельствует о значительном поражении системы крови под воздействием местного воздействия термического фактора. Наиболее результативными оказались эксперименты терапии ожогов крыс аппликациями спрея «Д-пантенол» и бальзама «Спасатель».

Таким образом, применение в эксперименте лекарственных средств для лечения ожогов (спрей Д-пантенол, бальзам «Спасатель») способствует существенному ингибированию свободнорадикального окисления, к повышению прочности клеточных мембран компонентов крови.