Актуальность
Реформа системы здравоохранения, являющаяся частью серьезных социально-экономических преобразований идущих в настоящее время в Российской Федерации имеет своей целью повышение уровня здоровья населения и снижения демографических потерь [1, 6]. Достижение этой цели во многом определяется уровнем здоровья подрастающего поколения [7]. Известно, что острые инфекционные заболевания верхних дыхательных путей являются наиболее распространенной причиной обращения к врачу в детском возрасте [2]. Частые инфекционные заболевания дыхательных путей приводят к нарушению физического и нервно-психического развития, способствуют снижению функциональной активности иммунной системы [8]. Следует отметить, что до настоящего времени не разработана эффективная система мер направленная на превентивную диагностику и прогнозирование риска снижения уровня резистентности организма подростка к острым респираторным заболеваниям [3].
В связи с вышеизложенным целью настоящего исследования является выявление закономерности между значением ряда биохимических и иммунологических показателей ротовой жидкости и уровнем резистентности ребенка, в возрасте 14-17 лет.
Материалы и методы
Нами были обследованы 168 детей в возрасте 14-17 лет, постоянно проживающих на территории г.Твери и обучающихся в общеобразовательных школах, расположенных в разных районах города. Все обследованные дети были разделены по полу и по уровню резистентности.
Исследования проводились на базе клинико-диагностической лаборатории поликлиники ТГМУ (код лаборатории в реестре ФСВОК: 10319, лицензия № ФС-69-01-000780 от 23.04.2015 г.) на биохимическом автоматическом анализаторе Flexor XL (Германия, 2012) с использованием коммерческих наборов реактивов для клинико-диагностических лабораторий фирмы «Vital» (Россия). Калий - турбидиметрическим методом без депротеинизации, натрий - энзиматическим колориметрическим кинетическим методом, кальций - колориметрическим методом с Арсеназо III, магний - колориметрическим (ксилидиловый синий) методом без депротеинизации, фосфор - UV-методом без депротеинизации.
Определение кортизола, ДГЭА в смешанной слюне осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) на микропланшетном мультидетекторе Zenyth 1100 (Австрия, 2005) с наборами реактивов фирмы «ХЕМА» (Россия).
Определение секреторного иммуноглобулина А и авидности секреторного иммуноглобулина А определяли параллельно в двух пробах методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью набора реактивов «sIgA-ИФА-БЕСТ». В одну из проб добавляли раствор мочевины (0,3 моль/л), которая разрушает непрочные иммунные комплексы, авидность антител оценивали с помощью расчетного показателя индекса авидности (И.А), который представляет собой отношение результата иммуноферментного определения концентрации антител в пробе, подвергнутой обработке мочевиной, к результату измерения концентрации антител в пробе, мочевиной не обработанной. Определение авидности заключается в дифференциации высоко и низкоавидных антител. Авидность характеризует адгезивные свойства антител.
Для статистической обработки данных использовался программный пакет "Statistica 6". Статистическая обработка включала вычисление описательных статистик, анализ данных на нормальность распределения, исследование связей между параметрами и сравнение групп. Различия групп считались значимыми при p<0,05, где p - уровень значимости.
Результаты и обсуждение
Нами были разработаны и внедрены две методики прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у детей дошкольного возраста. Особенностью данных методик является их малая инвазивность и доступность проведения в условиях как профилактических осмотров в детских коллективах, так и при индивидуальном консультировании ребенка на приеме в поликлинике.
Способ прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у детей в возрасте 3 - 7 лет по индексу авидности секреторного иммуноглобулина А заключается в иммуноферментном определении концентрации секреторного иммуноглобулина А в слюне ребенка. Концентрацию секреторного иммуноглобулина А в слюне определяют параллельно в двух пробах, в одну из которых добавляют мочевину (0,3 моль/л), определяют индекс авидности путем деления значения концентрации секреторного иммуноглобулина А в пробе с мочевиной на значение концентрации секреторного иммуноглобулина А в пробе без мочевины, и при значении индекса авидности менее 0,089 или более 0,27 ребенка относят в группу риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям [5].
Второй способ прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у детей заключается в том, что у ребенка определяют процентное содержание лимфоцитов в крови и концентрацию иммуноглобулина М турбодиметрическим методом в г/л и, если концентрация иммуноглобулина M выше 1,125 г/л, а процентное содержание лимфоцитов ниже 47% или концентрация иммуноглобулина M ниже 1,125 г/л, а процентное содержание лимфоцитов выше 47%, (разнонаправленность отклонений), то ребенка относят в группу риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям [4].
Обе методики были разработаны для детей в возрасте 3-7 лет. Учитывая высокую значимость прогнозирования уровня резистентности к острым респираторным заболеваниям в подростковом возрасте мы изучили особенности биохимических и иммунологических показателей ротовой жидкости у детей подросткового возраста в зависимости от пола и уровня резистентности. Полученные данные представлены в табл. 1.
Таблица 1
Особенности биохимических и иммунологических показателей ротовой жидкости у обследованных детей в зависимости от пола и уровня резистентности (M±m)
|
Показатель |
Группа детей с низким уровнем резистентности |
Группа детей с высоким уровнем резистентности |
||
|
мальчики (n=13) |
девочки (n=21) |
мальчики (n=107) |
девочки (n=133) |
|
|
кортизол |
1,6 ± 0,6 |
4,14 ± 2,33 |
1,7 ± 0,2 |
2,95 ± 0,41 |
|
ДГЭА |
1,3 ± 0,6 |
1,19 ± 0,4 |
0,9 ± 0,1 |
7,01 ± 6,1 |
|
калий |
5,9 ± 0,6 |
6,7 ± 0,54 |
7,5 ± 0,2 |
7,3 ± 0,19 |
|
натрий |
40,7 ± 8,5 |
32,9 ± 2,6 |
36,6 ± 2,1 |
34,97 ± 1,8 |
|
кальций |
0,7 ± 0,2 |
0,54 ± 0,05 |
0,6 ± 0,06 |
0,57 ± 0,04 |
|
магний |
0,3 ± 0,04 |
0,3 ± 0,04 |
0,3 ± 0,02 |
0,27 ± 0,02 |
|
фосфор |
2,3 ± 0,8 |
2,7 ± 0,5 |
3,2 ± 0,2 |
3,45 ± 0,21 |
|
секреторный иммуноглобулин А |
111,8 ± 59,2 |
113,6 ± 40,4 |
154,7 ± 17,7 |
179,9 ± 19,2 |
|
авидность секреторного иммуноглобулина А |
66,6 ± 6,6 |
76,2 ± 4,03 |
67,5 ± 1,9 |
75,9 ± 1,5 |
Как видно из данных, представленных в табл. 1 достоверных различий в уровне изученных нами биохимических и иммунологических показателей ротовой жидкости у обследованных детей в зависимости от пола и уровня резистентности выявлено не было. Однако следует отметить ряд тенденций.
Уровень кортизола в ротовой жидкости у девочек с низким уровнем резистентности был в 2,6 раза выше, чем у мальчиков той же группы. Аналогичная тенденция прослеживается и в отношении уровня фосфора - у девочек с низким уровнем резистентности он был в 1,2 раза выше, чем у мальчиков. В то время, как уровни натрия и кальция у мальчиков с низким уровнем резистентности были выше (в 1,2 раза и в 1,3 раза соответственно) чем у девочек. Остальные биохимические и иммунологические показатели ротовой жидкости у детей с низким уровнем резистентности не имели различий.
Следует отметить, что в группе детей с высоким уровнем резистентности наблюдалось увеличение уровня ДГЭА у девочек в 7,8 раза по сравнению с аналогичным показателем у мальчиков. Уровень кортизола у девочек с высоким уровнем резистентности был в 1,7 раза выше, чем у мальчиков той же группы. Различий в уровне остальных изученных нами показателей у мальчиков и девочек с высоким уровнем резистентности выявлено не было.
По нашим данным, уровень ДГЭА у мальчиков с высоким уровнем резистентности был в 1,4 раза выше, чем у мальчиков с низким уровнем резистентности. В то же время уровень калия и фосфора у мальчиков с низким уровнем резистентности был выше, чем у мальчиков с высоким уровнем резистентности в (в 1,3 раза и в 1,4 раза соответственно)
Для девочек с высоким уровнем резистентности было характерно увеличение уровня кортизола ротовой жидкости в 1,4 раза, по сравнению с девочками, имеющими низкий уровень резистентности. Нами было выявлено увеличение в 5,9 раза уровня ДГЭА у девочек с низким уровнем резистентности по сравнению с аналогичным показателем у девочек с высоким уровнем резистентности. Следует отметить, что для девочек с низким уровнем резистентности было характерно увеличение уровня секреторного иммуноглобулина А и фосфора в 1,6 раза и в 1,3 раза соответственно, по сравнению с аналогичными показателями в группе девочек с низким уровнем резистентности.
Нами был проведён ранговый корреляционный анализ Спирмена. Для мальчиков с низким уровнем резистентности были выявлены достоверные корреляционные связи с следующих парах: кортизол - авидность секреторного иммуноглобулина А, кортизол - авидность, авидность - натрий, секреторный иммуноглобулин А-магний. Для девочек с низким уровнем резистентности были выявлены достоверные корреляционные связи в двух парах: кортизол-кальций и ДГЭА - магний.
В группе детей с высоким уровнем резистентности количество значимых корреляционных пар было больше. Для мальчиков были выявлены достоверные корреляционные связи с следующих парах: кортизол - авидность, кортизол - фосфор, кортизол- секреторный иммуноглобулин А, кортизол- ДГЭА, ДГЭА- калий, ДГЭА - фосфор, секреторный иммуноглобулин А-натрий, секреторный иммуноглобулин А- фосфор, калий - натрий.
Для девочек с высоким уровнем резистентности было характерно наличие значимых корреляционных связей в отношении следующих пар биохимических и иммунологических показателей ротовой жидкости: кортизол - авидность, кортизол-магний, кортизол- секреторный иммуноглобулин А, кортизол- ДГЭА, ДГЭА- кальций, ДГЭА- калий, секреторный иммуноглобулин А- кальций, секреторный иммуноглобулин А-магний, секреторный иммуноглобулин А- фосфор, секреторный иммуноглобулин А-авидность, калий - магний, калий - кальций, кальций - фосфор, кальций - магний.
Заключение
Таким образом, для детей в возрасте 14-17 характерно наличие достоверных гендерных различий ряда биохимических и иммунологических показателей ротовой жидкости в зависимости от уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям. Были выявлены биохимические и иммунологические показатели ротовой жидкости характерные для детей с низким уровнем резистентности и для детей с высоким уровнем резистентности. Полученные данные свидетельствуют о возможности прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у подростков на основании биохимического и иммунологического исследования ротовой жидкости. Предложенные нами ранее методики прогнозирования риска снижения уровня резистентности организма к острым респираторным заболеваниям у детей в возрасте 3 - 7 могут быть адаптированы на детей подросткового возраста.
Рецензенты:
Егорова Е.Н., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой биологической и органической химии ГБОУ ВПО ТГМУ МЗ РФ, г.Тверь;
Петрова М.Б., д.б.н., профессор, заведующий кафедрой биологии ГБОУ ВПО ТГМУ МЗ РФ, г.Тверь.