Актуальность: Окись углерода представляет собой бесцветный, без запаха, без вкуса и не раздражающий слизистые оболочки токсичный газ, который производится при неполном сгорании органических соединений. Источником его могут являться неправильно установленные обогреватели, автомобили, использующие углеродное топливо, и, самое главное бытовые и лесные пожары [12]. По имеющимся данным у 75-85 % пострадавших при бытовых пожарах часто наблюдаются признаки отравления угарным газом. [1,3,4]. Клинические проявления отравления монокосидом углерода варьируют в зависимости, от степени тяжести, начиная от слабости, головокружения, тошноты и рвоты, до потери сознания, комы и смерти. [8,9]. Патологическое воздействие острого отравления окисью углерода на многие органы и ткани хорошо изучено, однако, систематизированных работ, описывающих изменение параметров микроциркуляции с использованием компьютерного спектрального анализа ЛДФ-грамм в доступной литературе не обнаружено [2,5]. Исследование микроциркуляции крови является одной из актуальных проблем современной медицины, так как состояние микрогемодинамики определяет адекватность трофического обеспечения тканей и органов, а также резервы поддержания гомеостаза всех систем организма человека. Известно, что в микроциркуляторном русле, помимо обеспечения транскапиллярного обмена, реализуется и его реакция на воздействие факторов внешней и внутренней среды, однако отклик системы микроциркуляции на действие этих факторов, может быть различным.[9].
Разработано множество, как инвазивных так и неинвазивных методов оценки микрокровотока, большинство из них технически сложные и имеют ограничения, так как приспособлены для одного строго определенного показателя [10,11].
В данной работе для оценки параметров микроциркуляции нами использовался метод лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) т.к. он является неинвазивным, фиксирует сразу несколько показателей, что дает возможность получить наиболее полную картину состояния микрогемодинамики в тканях.
Цель: Методом ЛДФ оценить изменение показателей микроциркуляции у крыс при остром отравлении угарным газом.
Материалы и методы
Все эксперименты выполнены на 40 белых беспородных крысах самцах возрастом 8-10 месяцев, массой 240-270 г. Животные содержались на стандартной диете вивария, при естественном освещении. В ходе эксперимента крысы были разделены на 2 группы по 20 особей, контрольную и опытную.
Этапы и методы исследования:
1. Исследуемых животных наркотизировали внутрибрюшинным введением раствора хлоралгидрата из расчета 350 мг/кг.
2. У всех крыс из контрольной и опытной групп производили забор 30 микролитров крови из хвостовой вены, уровень карбоксигемоглобина крови определяли на экспресс анализаторе производных гемоглобина Полигем (НПП «Техномедика» Россия).
3. Наркотизированные крысы фиксировались в положении на спине с отведенными в стороны конечностями. Областью измерений являлась внутренняя поверхность бедра, датчик ЛДФ располагался на расстоянии 2 мм, от поверхности кожи. Исследования проводились на приборе ЛАКК-2 (НПП «Лазма», Россия) со спектральным вейвлет-анализом колебаний кровотока. Время записи составляло 360 секунд.
4. Животные из опытной группы затравливались угарным газом, который получали путем смешивания серной и муравьиной кислот. Контакт происходил в герметичной стеклянной камере в течение 5 минут при концентрации в ней СО 0,5 %. Контрольные крысы находились в аналогичной камере с атмосферным воздухом.
5. Через 15 минут после извлечения крыс из стеклянной камеры повторно измеряли уровень карбоксигемоглобина и регистрировали показатели микроциркуляции обеих групп, описанными выше методами.
При анализе ЛДФ-грамм определялись статистические средние величины перфузии тканей и амплитудно-частотные спектральные характеристики колебаний кровотока. Статистическую обработку материала проводили при помощи t критерия Стьюдента. Различия считали значимыми при p<0,05.
Результаты и обсуждение
До контакта с угарным газом уровень карбоксигемоглобина крови у обеих групп крыс не превышал 2% от общего содержания гемоглобина крови, и был в пределах нормы. Исходные показатели микроциркуляции в исследуемых группах существенно не различались (p>0,05) и составляли в среднем: перфузия на уровне 18(±3) перфузионных единиц, среднее относительное насыщение кислородом крови (сатурация) в среднем 77(±10), объемное кровенаполнение ткани наблюдалось в пределах 18(±4). По данным вейвлет-анализа пики амплитудно-частотного спектра колебаний кровотока при контрольном измерении в двух группах также сопоставимы (Рис 1).
Рис.1. Фрагмент ЛДФ-граммы (вверху) и вейвлет-спектр колебаний кровотока (внизу) внутренней поверхности бедра крысы в исходном состоянии. Здесь и далее: по вертикали ― амплитуда осцилляций кровотока (перфуз. ед.); по горизонтали ― для ЛДФ-граммы― время в секундах, для вейвлет-спектра ― частота колебаний (Гц).
Пребывание животных контрольной группы в герметичной камере с атмосферным воздухом не повлияло на концентрацию карбоксигемоглобина крови, который продолжал оставаться на уровне 3±2 %, (р<0,01) от общего содержания гемоглобина. При этом показатели микрогемодинамики внутренней поверхности бедра незначительно (p>0,05) снизились, в сравнении с исходными данными. Уровень перфузии составлял 15(±3) перф.ед., сатурации на уровне 70 (±12), объемное кровенаполнение не более 17(±3). Частота колебаний вейвлет-спектра не изменилась.
В результате контакта крыс опытной группы с угарным газом в герметичной камере концентрация карбоксигемоглобина в крови увеличилась в среднем 34 (±5%)-(р<0,01), что согласно литературным данным соответствует отравлению средней степени тяжести. Параметры микроциркуляции в результате отравления угарным газом также значительно изменились (Рис 2).
Рис. 2. Фрагмент ЛДФ-граммы и вейвлет-спектр колебаний кровотока внутренней поверхности бедра крысы на фоне отравления угарным газом. Наблюдается повышение показателей перфузии, существенное увеличение амплитуды колебаний в эндотелиальном диапазоне и нейрогенном диапазоне.
Показатели перфузии возросли до 32(±6) перф.ед. (p<0,05). Определялась тенденция к снижению среднего относительного насыщения крови кислородом до 60(±10) - (p>0,05), что, вероятно, связано с высоким содержанием карбоксигемоглобина неспособного связывать кислород. Значительное снижение объемного кровенаполнения тканей до 60(±10) - (p<0,05), может быть обусловлено компенсаторным спазмом периферических сосудов и централизацией кровообращения в ответ на гипоксическое поражение.
По данным вейвлет-анализа наблюдалось значительное снижение амплитуды колебаний в эндотелиальном диапазоне (вблизи 0,01 Гц), в нейрогенном диапазоне (0,02-0,05 Гц) и увеличение амплитуды колебаний в миогенном диапазоне (0,06 – 0,15 Гц). Указанные выше диапазоны относятся к активным факторам регуляции состояния микроциркуляторно русла, они возникают в результате чередования эпизодов вазоконстрикции и вазодилятации, обусловленной сокращением и расслаблением мышц сосудов[6]. Возрастание амплитуд активных факторов вероятнее носит компенсаторный характер, как локальная реакция тканей на снижение уровня оксигемоглобина крови.
Выводы
По данным лазерной доплеровской флоуметриии острая интоксикация угарным газом соответствующая отравлению средней степени тяжести у крыс вызывает значительные изменение показателей микроциркуляторного русла, в виде существенного повышения показателей перфузии со снижение сатурации и объема кровенаполнения, увеличение амплитуды колебаний кровотока в эндотелиальном, нейрогенном и миогенном диапазонах.
Рецензенты:
Миннебаев М.М., д.м.н., профессор кафедры патофизиологии ГБОУ ВПО Казанского государственного медицинского университета, г. Казань;
Фролов Б.А., д.м.н., профессор, зав. кафедрой патофизиологии ГБОУ ВПО Оренбургской государственной медицинской академии, г. Оренбург.