Одним из ведущих факторов антропогенного воздействия на здоровье является аэрогенное. Аэрогенное загрязнение окружающей среды оказывает выраженное воздействие на формирование популяционного здоровья населения и на отдельный макроорганизм, вызывая формирование сенсибилизации и развитие хронической патологии. Согласно классификации промышленных аллергенов, сенсибилизирующая активность категории 2 - «умеренно опасных» промышленных аллергенов доказана в отношении белково-витаминного концентрата (по белку) и пыли растительного и животного происхождения с примесью диоксида кремния от 2 до 10% [4]. Именно с такими вредными факторами производства приходится сталкиваться рабочим птицефабрик. В воздушной среде данного производства определены высокие концентрации пыли, имеющей сложный состав, различные вредные газы, а также бактериальная и грибковая обсемененность. При этом многие показатели превышают ПДК или ПДУ, установленные ГОСТом для воздуха рабочей зоны. Длительное влияние комплекса производственных факторов одновременно с ухудшением здоровья работающих, как правило, может привести, в том числе, и к патологическим изменениям (СОР), заболеваниям пародонта, твердых тканей зубов. Совокупность длительного воздействия неблагоприятных факторов воздуха рабочей зоны, даже на уровне предельно-допустимых концентраций, повышает риск формирования статуса поливалентной сенсибилизации [5].
Поэтому проблема неблагоприятного влияния факторов окружающей среды на состояние здоровья с каждым годом приобретает все большую актуальность.
При развитии аллергического ответа происходит активация Th2 клеток, эозинофилов и базофилов под влиянием цитокинов и хемокинов [6]. Эти реакции включают в себя также повышение экспрессии молекул межклеточной адгезии sICAM-1 (intercellular adhesion molecule-1). sICAM-1 широко распространена во многих тканях и суперпродуцируется при воспалении, особенно в ответ на IL-1 или гамма-интерферон [3].
sICAM-1 это молекула межклеточной адгезии 1 типа, которая представляет собой одноцепочечный гликопротеин с молекулярной массой 55 kDa. Это интегральный мембранный белок, содержащий пять Ig-подобных внеклеточных доменов. sICAM-1 обнаруживается на эндотелиальных, эпителиальных клетках, лейкоцитах, лимфоцитах, моноцитах, фибробластах и определяет контакт клеток в иммунных реакциях. Экспрессия этих молекул может быть постоянной или индуцибельной Связывание sICAM-1 способствует продукции воспалительных цитокинов и хемокинов, способствуя тем самым поддержанию воспаления [5]. Экспрессия sICAM-1 усиливается в течение 6-8 часов после стимуляции и сохраняется как минимум 48 часов. Взаимодействие лейкоцитарного β2-интегрина с ICAM-1 имеет важное значение в регуляции отдельного этапа адгезии лейкоцитов и их трансэндотелиальной миграции. sICAM-1 и его рецептор LFA-1 являются дополнительными факторами активации Т-лимфоцитов. Кратковременное воздействие Т-клеточного рецептора и CD2 индуцирует определенное состояние LFA-1, при котором возрастает уровень его связывания с sICAM-1, при чем без изменения концентрации молекул.
Роль sICAM-1 как маркера заболеваний доказана для большого числа различных патологических процессов. В аллергическом воспалении дыхательных путей sICAM-1 участвует в патогенезе аллергических ринитов, при аллергическом контактном дерматите sICAM-1 появляется на кератиноцитах уже через 4 часа после проведения кожно-аллергического теста. При опухолевых заболеваниях замечена прямая корреляция между степенью экспрессии sICAM-1 и гистологически установленной степенью риска[6].
На сегодняшний день большое колличество исследований направлено на разработку неинвазивных методов оценки показателей иммунитета, особенно при проведении массовых обследований в условиях периодических медицинских осмотров работающего населения. Но, не смотря на это, данная проблема остается достаточно актуальной.
Преимуществом определения sICAM-1 в ротовой жидкости (РЖ) то, что используется неинвазивная методика. Для изучения местного иммунитета полости рта используется РЖ человека. Перед взятием материала пациент полоскает полость рта кипяченой водой. Набор материала производится в стерильные пробирки путем сплевывания [4].
Цель исследования
Изучение показателей местного иммунитета полости рта рабочих лиц, имеющих сенсибилизацию к грибковой инфекции в условиях птицеводческого производства.
Материалы и методы исследования
Нами было обследовано 160 работников ОАО Птицефабрика «Башкирская» в возрасте от 25 до 52 лет, со стажем работы 5 лет и более. Контрольную группу составили 64 человека, проживающие в той же местности, соответствующие по полу и возрасту контрольной группы, не работающие на птицефабрике. Обследование было проведено в соответствии с рекомендациями ВОЗ (1985). Критерием отбора в группу исследования явилось: согласие на участие в исследовании, работа на птицефабрике, отсутствие вредных привычек в виде курения и злоупотребления алкоголем. Оценено состояние твердых тканей зубов, тканей пародонта и СОР. Для изучения местного иммунитета полости рта нами использована не стимулированная смешанная слюна пациентов. Перед взятием материала пациенту предлагали прополоскать рот кипяченой водой комнатной температуры. Для забора материала в каждом случае использованы стерильные пробирки. Пациент собирал слюну путем сплевывания. До проведения исследования материал хранился при температуре - 20 ºС.
Проведено определение содержания аллергоспецифических иммуноглобуллинов (IgE) г/л, молекул межклеточной адгезии sICAM-1 нг/мл на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Lazurit», тест-системами производства ЗАО «Вектор-Бест», (п. Кольцово Новосибирской области) и «eBioscience» Австрия. Проведено микроскопическое исследование соскоба с поверхности (СОР) для постановки диагноза кандидоз и кандидоносительство.
IgE к С. albicans в смешанной слюне выявляли методом ИФА с использованием в качестве твердой фазы 96-луночных планшетов (производства «Labsystems»), сенсибилизированных аллергеном С. albicans, полученным в НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина, и поликлональных антител (производства «Полигност»).
IgЕ представляет собой разновидность белков крови - иммуноглобуллинов, выполняющих в организме функцию иммунной защиты. В отличие от других классов иммуноглобуллинов IgE способен вызывать сенсибилизацию тканей организма к аллергенам, то есть обеспечивает развитие аллергической реакции. IgE вырабатывается локально, приемущественно в подслизистом слое тканей, контактирующих с внешней средой: коже, дыхательных путях, желудочно-кишечном тракте, миндалинах. При попадании в организм аллергена происходит его взаимодействие с IgE. Это сопровождается выбросом гистамина и других активных субстанций из клеток, на мембране которых фиксирован IgE. Поступление гистамина и других цитотоксических веществ в межклеточное пространство приводит к развитию местной воспаллительной реакции [2]. Определение IgE является методом диагностики, позволяющим оттдеференцировать воспалительные заболевания аллергической этиологии от простого воспалительного процесса, имеющих схожую клиническую картину, а также подобрать наиболее адекватное лечение.
Рядом исследователей была определена специфическая сенсибилизация рабочих прицефабрики к наиболее часто встречающимся аллергенам рабочей зоны - эпидермальным. А именно: куриный помет, частички пуха, грибы (Aspergillus niger, Aspergilllus flavus, Candida albicans). Специфическая сенсибилизация оценивалась по содержанию иммуноглобулинов класса Е (МЕ∕мл) в сыворотке крови[3].
При исследовании сыворотки крови на уровень сенсибилизации к грибковым антигенам выявлено, что очень высокий уровень сенсибилизации отмечался в 25% случаев, высокий в 41%, умеренный в 24% случаев и отсутствие сенсибилизации наблюдался у 10% рабочих. Всвязи с этим нами была поставлена задача, определить наличие сенсибилизации у рабочих, болеющих кандидозом, кандидоносителей и при отсутствии кандидоза.
При поражении полости рта дрожжеподобным грибом C. albicans во многих случаях развивается аллергическая реакция. Наличие IgE к C. albicans в повышенном количестве свидетельствует о высокой чувствительности организма к данному аллергену (гиперчувствительность немедленного типа), отражая острую аллергическую реакцию в организме на C. albicans.
Результаты исследования
После проведения микроскопического исследования соскоба с поверхности (СОР) пациенты были разделены на три группы. Первую группу составили 66 рабочих, которым был поставлен диагноз кандидоз, вторую группу составили 52 рабочих с кандидоносительством и в третью группу мы отнесли 22 рабочих, у которых, лабораторных данных, подтверждающих кандидоз и кандидоносительство, обнаружено не было. Даже тем рабочим, кто не имел клинических проявлений, был поставлен диагноз кандидоз или кандидоносительство. Пациенты контрольной группы не предьявляли жалоб и лабораторных данных за кандидоз или кандидоносительство у них зафиксировано не было.
При исследовании РЖ на концентрацию к специфическому IgE к Candida albicans получены следующие данные (табл. 1): в контрольной группе уровень специфического IgE к Candida albicans оказался в пределах нормы. Из 66 пациентов, которым был поставлен диагноз кандидоз, 59% имели повышенные значения содержания специфического IgE к Candida albicans 5,01±0,56 МЕ∕мл, а у 41% увеличения уровня специфического IgE к Candida albicans обнаружено не было. У лиц с кандидоносительством повышенные значения специфического IgE к Candida albicans были обнаружены в 53,8% случаях, а у 46,2% специфический IgE к Candida albicans был в пределах нормы. Даже в группе пациентов, где нет лабораторно подтвержденных данных за кандидоз и кандидоносительство, у 31,8% пациентов в РЖ обнаружен специфический IgE к Candida albicans. Из полученных данных также отмечено, что в группах с кандидозом и кандидоносительством у сенсибилизированных пациентов уровень специфических IgE к Candida albicans не имел существенных отличий, но значительно превышал показатели контрольной группы. У лиц без лабораторных признаков кандидоза он был ниже, чем у лиц с кандидозом и кандидоносительством, но превышал показатели контрольной группы.
Таблица 1
Уровень специфического IgE к C. аlbicans в ротовой жидкости рабочих птицефабрики и в контрольной группе
|
Группа |
Ι группа |
ΙΙ группа |
ΙΙΙ группа |
Контрольная группа |
|
Содержание специфического IgE к C. Albicans в ротовой жидкости |
5,01±0,56 МЕ∕мл* |
4,2±0,74 МЕ∕мл* |
2,9±0,94 МЕ∕мл* |
0,47±0,63 МЕ∕мл* |
* - статистически достоверные различия при уровне значимости р≤0,001
Исследование РЖ на концентрацию sICAM-1 мы проводили у пациентов контрольной группы и у лиц, в РЖ которых было обнаружено повышенное значение специфического IgE к C.albicans. Получены следующие данные (табл. 2).
Таблица 2
Содержание sICAM-1 у пациентов, имеющих специфическую сенсибилизацию к C albicans и в контрольной группе
|
Группы |
Ι группа |
ΙΙ группа |
ΙΙΙ группа |
Контрольная група |
|
Уровень sICAM-1 нг∕мл |
9,4±0,75* |
7,2±0,52** |
5,8±0,38** |
4,3±0,91 |
* - статистически достоверные различия при уровне значимости р≤0,001
* - статистически достоверные различия при уровне значимости р≤0,01
Выводы
У людей, работающих в условиях хронической аэрогенной нагрузки грибковыми аллергенами, происходит сенсибилизация к данному грибку, что обусловлено повышением уровня специфического IgE. О снижении местного иммунитета говорит изменение уровня молекул межклеточной адгезии sICAM-1. Данным пациентам требуется коррекция местного иммунитета полости рта, специфическая антиаллергенная и противогрибковая терапия.
Метод изучения состава ротовой жидкости является перспективным способом неинвазивного и безопасного обследования лиц, подвергающимся хроническим аэрогенным нагрузкам, оценки местного иммунитета.
Рецензенты:
Герасимова Л.П., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой терапевтической стоматологии с курсом ИДПО, г. Уфа;
Блашкова С.Л., д.м.н., доцент, заведующий кафедрой терапевтической стоматологии ГБОУ ВПРО КГМУ Минздрава России, г. Казань.