Состояние здоровья подрастающего поколения - важнейший показатель благополучия общества, не только отражающий настоящую ситуацию, но и дающий прогноз на будущее. В связи с этим проблема сохранения, укрепления и восстановления здоровья подростков имеет высокую социальную значимость [1].
В настоящее время при планировании системы мер по охране здоровья подростков учитываются современные особенности состояния здоровья детей этой возрастной группы, весь комплекс факторов, влияющих на формирование здоровья. В связи с этим определение показателей и критериев состояния здоровья подростков приобретает особую актуальность [1].
Здоровье ребенка программируется в период созревания половых клеток и на ранних этапах индивидуального развития. Состояние здоровья зависит как от характера полученной от родителей генетической информации, так и от условий внешней среды, в которой она реализуется [2]. Поэтому в формировании здоровья генетические факторы играют определенную роль [4, 5].
В связи с изложенным нами представлялось целесообразным рассмотреть распределение полиморфных вариантов генов системы свертывания крови в группах здоровья подростков с учетом гендерных особенностей. В доступной литературе подобных работ мы не встретили.
Цель исследования
Изучить распределение генотипов генов свертывания крови и фолатного цикла в группах здоровья подростков с учетом половых различий.
Материал и методы
В работе использованы данные, полученные при проведении молекулярно-генетического и клинического обследования 1306 подростков (580 мальчиков и 726 девочек) в возрасте 15-16 лет (средний возраст 15,4±1,4 года).
Генотипирование протромботических аллельных полиморфизмов генов FGB, FII, FV, FVII, FXIII, PAI-1, GpIIIA, MTHFR, MTR, MTRR осуществлялось в группе фармакогеномики Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН. Работа выполнена в рамках Протокола ведения Всероссийского регистра «Генетические факторы риска тромбоза у жителей, проживающих на территории РФ, клиническое фенотипирование и тромбопрофилактика тромбоэмболических осложнений в онтогенезе» [3].Данный научно-исследовательский проект утвержден 29.10.2010 (протокол № 12) и соответствует этическим стандартам локального Биоэтического комитета при Алтайском государственном медицинском университете и «Правилам клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом МЗ РФ от 19.06.2003 г. № 266. Перед началом исследования каждым участником было подписано информированное согласие.
Статистическая обработка результатов проводилась посредством пакета программ STATISTICA 6.1 (StatSoftInc., США). Распределение значений количественных показателей оценивали с помощью критерия Шапиро-Уилка. Для каждого показателя вычисляли 95% доверительного интервала (95% ДИ). Достоверность различия показателей между 2 группами документировали посредством U-критерия Манна-Уитни и точного критерия Фишера. Статистически значимыми считали различия при р<0,05.
Результаты и их обсуждение
Обследованные подростки по уровню состояния здоровья были разделены на 3 группы. В первую группу здоровья были включены 115 (8,8%) абсолютно здоровых подростков: мальчиков - 61 (4,7%); девочек - 54 (4,1%). Вторую группу составили 678 (51,9%) детей (мальчиков - 306 (23,4%), девочек - 372 (28,5%). В третью группу здоровья были отнесены 513 (39,3%) подростков, из них: мальчиков 213 (16,3%) и девочек 300 (23%).
Анкетные данные позволили установить, что в первую группу здоровья вошли всего 115 (8,8%) подростков. Для проведения последующего статистического анализа подростков первой и второй групп («практически здоровые» дети) объединили в одну «I-II группу» здоровья.
Результаты распределения полиморфных вариантов генов системы свертывания крови у подростков «I-II группы» здоровья с учетом гендерных особенностей представлены в таблице. Проведенное исследование позволило установить, что количество генотипов факторов свертывания крови у обследованных девочек составило 1923, у мальчиков - 1386, а общее количество достигло 3309.
Кроме того, необходимо отметить (табл. 1), что у обследованных девочек-подростков по отношению к мальчикам-подросткам преобладало количество полиморфных вариантов генов системы гемостаза FXIII (13,4%, p<0,001) и GpIIIa (9,8%, p=0,001). У мальчиков в результате аналогичного обследования были получены данные для генов FII (26,5%, p=0,004), FV (26,5%, p=0,004), PAI-1(26,5%, p=0,004).
Таблица 1
Распределение полиморфных вариантов генов системы свертывания крови у подростков «I-II группы» здоровья с учетом пола
Полиморфные варианты |
Количество полиморфных вариантов генов системы свертывания крови |
p |
||
Всего n=3309 |
Мальчики n=1386 |
Девочки n=1923 |
||
FII 20210 |
n=793 (24,0) |
n=367 (26,5) |
n=426 (22,1) |
0,004 |
G/G |
771 (97,2) |
361 (98,4) |
410 (96,2) |
0,084 |
G/A |
22 (2,8) |
6 (1,6) |
16 (3,8) |
0,084 |
A/A |
0 |
0 |
0 |
0 |
FV 1691 |
n=793 (24,0) |
n=367 (26,5) |
n=426 (22,1) |
0,004 |
G/G |
766 (96,6) |
352 (95,9) |
414 (97,2) |
0,562 |
G/A |
27 (3,4) |
15 (4,1) |
12 (2,8) |
0,333 |
A/A |
0 |
0 |
0 |
0 |
FVII 10976 |
n=177 (5,3) |
n=70 (5,0) |
n=107 (5,6) |
0,532 |
G /G |
144 (81,4) |
54 (77,1) |
90 (84,1) |
0,324 |
G/A |
28 (15,8) |
14 (20,0) |
14 (13,1) |
0,292 |
A/A |
5 (2,8) |
2 (2,9) |
3 (2,8) |
1,000 |
FXIII 226 |
n=345 (10,4) |
n=88 (6,3) |
n=257 (13,4) |
<0,001 |
G/G |
150 (43,5) |
48 (54,5) |
102 (39,7) |
0,018 |
G/A |
88 (25,5) |
32 (36,4) |
56 (21,8) |
0,008 |
A/A |
107 (31,0) |
8 (9,1) |
99 (38,5) |
<0,001 |
FGB (-455) |
n=145 (4,4) |
n=53 (3,8) |
n=92 (4,8) |
0,268 |
G/G |
94 (64,8) |
38 (71,7) |
56 (60,9) |
0,211 |
G/A |
40 (27,6) |
12 (22,6) |
28 (30,4) |
0,341 |
A/A |
11 (24,4) |
3 (5,7) |
8 (8,7) |
0,544 |
GРIIIa1565 |
n=263 (7,9) |
n=74 (5,3) |
n=189 (9,8) |
<0,001 |
T/T |
205 (77,9) |
64 (86,5) |
141 (74,6) |
0,046 |
T/C |
54 (20,5) |
10 (13,5) |
44 (23,3) |
0,090 |
C/C |
4 (1,6) |
0 |
4 (2,1) |
0,333 |
PAI-1 (-675) |
n=793 (24,0) |
n=367 (26,5) |
n=426 (22,1) |
0,004 |
5G/5G |
164 (20,7) |
75 (20,4) |
89 (20,9) |
0,931 |
4G/5G |
364 (45,9) |
164 (44,7) |
200 (46,9) |
0,617 |
4G/4G |
265 (33,4) |
128 (34,9) |
137 (32,2) |
0,407 |
Примечание. Статистика: точный критерий Фишера. В скобках - %.
В ходе анализа частоты встречаемости полиморфных вариантов генов факторов свертывания крови с учетом групп здоровья и половых различий определено, что мутации генотипов G20210А гена FII,G1691А гена FVLeiden, G10976 гена фактора VII регистрировались с одинаковой частотой у мальчиков и девочек подросткового возраста. Следует отметить, что Hmzg генотип 226GG (54,5%, р=0,018) и Htzg генотип 226GA(36,4%, р=0,008) гена FXIII с большей частотой определялись у мальчиков-подростков, а гомозиготный генотип 226АА гена FXIII чаще встречался у девочек (р<0,001).
Распределение генотипа 1565ТТ гена GРIIIa у мальчиков (86,5%) достигало уровня статистической значимости по сравнению с девочками «I-II группы» здоровья (74,6%, р=0,046). По распространенности остальных полиморфных вариантов генов факторов свертывания крови у подростков данной группы здоровья значимых различий не выявлено.
Таким образом, представленные выше данные свидетельствуют о наличии у подростков гендерных особенностей в распределении полиморфных вариантов генов системы свертывания крови, прежде всего это характерно для генов FXIII (фибриназа) и GРIIIa (тромбоцитарный рецептор фибриногена - ITGB3-bинтегрин).
В нашем исследовании с учетом гендерных особенностей изучена распространенность генотипов генов системы свертывания крови у подростков III группы здоровья (табл. 2).
Представленные в таблице 2 данные свидетельствуют о том, что распределение генотипов Norm, Htzg, Hmzg семи изученных генов факторов свертывания крови у подростков с хроническими заболеваниями в стадии стойкой клинической ремиссии не имеет статистически значимых различий и выявляется с одинаковой частотой у мальчиков и девочек этой группы. Но все же достоверно высокая частота данных генотипов регистрируется в группе девочек (р<0,001). Так, частота гена FXIII у девочек III группы здоровья составила 65,1% против 34,9% у мальчиков-подростков (р<0,001). В отношении распространенности остальных полиморфных вариантов генов системы свертывания крови у подростков III группы здоровья статистически значимых различий не установлено. К примеру, частота гена FV у девочек составила 23,5%, а у мальчиков - 25,9% (р=0,193).
Таблица 2
Распределение полиморфных вариантов генов системы свертывания крови у подростков III группы здоровья с учетом пола
Полиморфные варианты |
Количество полиморфных вариантов генов системы свертывания крови |
p |
||
Всего n=2099 |
Мальчики n=820 |
Девочки n=1279 |
||
FII 20210 |
n=513 (24,4) |
n=213 (25,9) |
n=300 (23,5) |
0,193 |
G/G |
500 (97,5) |
210 (98,6) |
290 (96,6) |
0,255 |
G/A |
13 (2,5) |
3 (1,4) |
10 (3,4) |
0,255 |
A/A |
0 |
0 |
0 |
0 |
FV 1691 |
n=513 (24,4) |
n=213 (25,9) |
n=300 (23,5) |
0,193 |
G/G |
498 (97,1) |
209 (98,1) |
289 (96,3) |
0,294 |
G/A |
15 (2,9) |
4 (1,9) |
11 (3,7) |
0,294 |
A/A |
0 |
0 |
0 |
0 |
FVII 10976 |
n=103 (4,9) |
n=33 (4,0) |
n=70 (5,5) |
0,147 |
G /G |
85 (82,5) |
24 (72,7) |
61 (87,1) |
0,096 |
G/A |
15 (14,6) |
8 (24,2) |
7 (10,0) |
0,234 |
A/A |
3 (2,9) |
1 (3,0) |
2 (2,9) |
1,000 |
FXIII 226 |
n=175 (8,3) |
n=61 (7,4) |
n=114 (8,9) |
0,257 |
G/G |
104 (59,4) |
42 (68,9) |
62 (54,4) |
0,076 |
G/A |
60 (34,3) |
17 (27,9) |
43 (37,7) |
0,242 |
A/A |
11(6,3) |
2 (3,2) |
9 (7,9) |
0,333 |
FGB (-455) |
n=94(4,5) |
n=36 (4,4) |
n=58 (4,5) |
0,914 |
G/G |
55 (58,5) |
17 (47,2) |
38 (65,5) |
0,090 |
G/A |
35 (37,2) |
18 (50,0) |
17 (29,3) |
0,051 |
A/A |
4 (4,3) |
1 (2,8) |
3 (5,2) |
0,658 |
GРIIIa 1565 |
n=188 (8,9) |
n=51 (6,2) |
n=137 (10,7) |
<0,001 |
T/T |
151 (80,4) |
44 (86,3) |
107 (78,1) |
0,226 |
T/C |
36 (19,1) |
7 (13,7) |
29 (21,2) |
0,301 |
C/C |
1 (0,5) |
0 |
1 (0,7) |
1,000 |
PAI-1 (-675) |
n=513 (24,4) |
n=213 (25,9) |
n=300 (23,5) |
0,193 |
5G/5G |
105 (20,5) |
40 (18,8) |
65 (21,7) |
0,435 |
4G/5G |
238 (46,4) |
95 (44,6) |
143 (47,7) |
0,530 |
4G/4G |
170 (33,1) |
78 (36,6) |
92 (30,6) |
0,183 |
Примечание. Статистика: точный критерий Фишера. В скобках - %.
Сравнительный анализ распределения полиморфных вариантов генов факторов свертывания крови у подростков «I-II группы» здоровья с III группой показал, что Htzg генотип 226GA гена FXIII у девочек III группы здоровья определялся с большей частотой (37,7%, р=0,001), чем у девочек «I-II группы» здоровья (21,8%).
Следует отметить, что Hmzg генотип 226AA гена FXIII значимо чаще фиксировался у девочек «I-II группы» здоровья (38,5%, р<0,001) по сравнению с девочками III группы здоровья (7,9%). У мальчиков подросткового возраста с III группой здоровья при сравнении с «I-II группой» статистически значимых различий частот распространенности полиморфных вариантов G226А гена фактора FXIII выявлено не было.
Следующим этапом нашего исследования явилось установление частоты встречаемости генетических полиморфизмов генов фолатного метаболизма у подростков «I-II группы» здоровья с учетом гендерных особенностей (табл. 3). Из данной таблицы следует, что количество полиморфных вариантов гена метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR 1298, р=0,039) и гена В12-зависимой метионин-синтазы (MTR 2756, р=0,017) статистически значимо преобладало в группе девочек. У мальчиков констатирован высокий уровень полиморфных вариантов гена метионин-синтазыредуктазы (MTRR 66, 22,3%, р=0,039).
Таблица 3
Распределение полиморфных вариантов генов фолатного метаболизма у подростков «I-II группы» здоровья с учетом пола
Полиморфные варианты |
Количество полиморфных вариантов генов фолатного метаболизма |
р |
||
Всего n=1618 |
Мальчики n=716 |
Девочки n=902 |
||
MTHFR 677 |
n=793 (49,0) |
n=367 (51,3) |
n=426 (47,2) |
0,109 |
C/С |
396 (49,9) |
182 (49,6) |
214 (50,2) |
0,943 |
C/Т |
323 (40,7) |
151 (41,1) |
172 (40,4) |
0,828 |
T/T |
74 (9,3) |
34 (9,3) |
40 (9,4) |
1,000 |
MTHFR 1298 |
n=256 (15,8) |
n=98 (13,7) |
n=158 (17,5) |
0,039 |
A/A |
136 (53,1) |
51 (52,0) |
85 (53,8) |
0,798 |
A/C |
96 (37,5) |
36 (36,7) |
60 (38,0) |
0,895 |
C/C |
24 (9,4) |
11 (11,2) |
13 (8,2) |
0,509 |
MTR 2756 |
n=245 (15,1) |
n=91 (12,7) |
n=154 (17,1) |
0,017 |
A/A |
162 (66,1) |
63 (69,2) |
99 (64,3) |
0,486 |
A/G |
56 (22,9) |
20 (22,0) |
36 (23,4) |
0,875 |
G/G |
27 (11,0) |
8 (8,8) |
19 (12,3) |
0,411 |
MTRR 66 |
n=324 (20,0) |
n=160 (22,3) |
n=164 (18,2) |
0,039 |
A/A |
69 (26,7) |
30 (18,7) |
39 (23,8) |
0,281 |
A/G |
83 (32,2) |
24 (15,0) |
59 (36,0) |
<0,001 |
G/G |
172(41,1) |
106 (66,3) |
66 (40,2) |
<0,001 |
Статистика: точный критерий Фишера. В скобках - %.
В результате проведенного молекулярно-генетического исследования было показано, что у мальчиков достоверно чаще фиксировался гомозиготный вариант 66GG гена метионин-синтазыредуктазы (MTRR 66,3% против 40,2% у девочек, р<0,001).
Установлено, что у девочек подросткового возраста в отличие от мальчиков-подростков (15,0%) частоты встречаемости гетерозиготного варианта 66АGгена MTRR (36,0%, р<0,001) зафиксированы статистически значимо выше. Исследование распространенности полиморфных вариантов генов фолатного цикла выявило также отсутствие статистически значимых различий у подростков «I-II группы» частот гена MTHFRС677Т (51,3% у мальчиков и 47,2% у девочек, р=0,109).
Как следует из таблицы 4, статистически значимых различий в распределении полиморфных вариантов генов фолатного цикла и гендерных особенностей у подростков III группы здоровья выявлено не было. Отсутствие статистически значимых гендерных различий может быть следствием влияния полиморфных вариантов генов фолатного цикла.
Таблица 4
Распределение полиморфных вариантов генов фолатного метаболизма у подростков III группы здоровья
Полиморфные варианты |
Количество полиморфных вариантов генов фолатного метаболизма |
р |
||
Всего n=1033 |
Мальчики n=399 |
Девочки n=634 |
||
MTHFR 677 |
n=513 (49,7) |
n=213 (53,4) |
n=300 (47,3) |
0,064 |
C/С |
263 (51,3) |
113 (53,1) |
150 (50,0) |
0,531 |
C/Т |
206 (40,2) |
79 (37,1) |
127 (42,3) |
0,236 |
T/T |
44 (8,6) |
21 (9,8) |
23 (7,7) |
0,425 |
MTHFR 1298 |
n=185 (17,9) |
n=71 (17,8) |
n=114 (17,9) |
1,000 |
A/A |
88 (47,6) |
33 (46,5) |
55 (48,2) |
0,880 |
A/C |
78 (42,2) |
27 (38,0) |
51 (44,7) |
0,444 |
C/C |
19 (10,2) |
11 (15,5) |
8 (7,1) |
0,082 |
MTR 2756 |
n=160 (15,5) |
n=55 (13,8) |
n=105 (16,6) |
0,251 |
A/A |
112 (70,0) |
37 (67,3) |
75 (71,4) |
0,717 |
A/G |
36 (22,5) |
15 (27,3) |
21 (20,0) |
0,323 |
G/G |
12 (7,5) |
3 (5,4) |
9 (8,6) |
0,547 |
MTRR 66 |
n=175 (16,9) |
n=60 (15,0) |
n=115 (18,1) |
0,202 |
A/A |
52 (29,7) |
21 (35,0) |
31 (26,9) |
0,298 |
A/G |
48 (27,4) |
13 (21,7) |
35 (30,4) |
0,284 |
G/G |
75 (42,9) |
26 (43,3) |
49 (42,7) |
1,000 |
Статистика: точный критерий Фишера. В скобках - %.
В то же время проведение последующего анализа позволило установить, что у мальчиков III группы здоровья при сравнении с «I-II группой» здоровья частота встречаемости Norm варианта 66GG гена MTRR статистически значимо выше (35,0% против 18,7%, р=0,013). Напротив, Hmzg вариант 66GG гена MTRR достигает уровня статистической значимости при «I-II группе» здоровья (66,3% против 43,3%, р=0,003).
Таким образом, представленные выше данные свидетельствуют о том, что частота встречаемости полиморфных вариантов генов системы свертывания крови и фолатного цикла в определенной степени сопряжена с группой здоровья и полом подростков. У мальчиков-подростков «I-II группы» здоровья статистически чаще встречается Norm генотип 1565ТТ гена GРIIIa, Norm генотип 226GG иHtzg генотип 226GA гена FXIII, а также Hmzg генотип 66GG гена MTRR. Однако у девочек с большей частотой определяется Hmzg генотип 226АА гена FXIII и Htzg генотип 66GA гена MTRR. У подростков, страдающих хроническими заболеваниями в стадии клинической ремиссии (III группа здоровья), различия не наблюдаются по полу и распределению частот полиморфных вариантов генов фолатного цикла, кроме преобладания частоты встречаемости гена GРIIIa у девочек.
Рецензенты:
Выходцева Г.И., д.м.н., профессор, зав. кафедры педиатрии с курсом ФПК и ППС ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Барнаул;
Колесникова О.И., д.м.н., профессор кафедры педиатрии с курсом ФПК и ППС ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Барнаул.