Для инициации патологической атипичной метаплазии с переходом в дальнейшем в инвазивную карциному шейки необходимы половые гормоны, особенно эстрогены [6]. При этом важное значение играет нарушение метаболизма женских половых гормонов и, в частности, сдвиг соотношения между их отдельными фракциями. В этом аспекте известна негативная роль метаболита эстрона 16α-ОН и, особенно, его равновесие с 2α-ОН-эстроном [2].
Высокий уровень эстрадиола и низкое содержание прогестерона влияет на увеличение продолжительности жизни при раке шейки матки. Показана отрицательная корреляция уровня эндогенного прогестерона и экспрессии опухолевых маркеров при данной патологии [8]. А обнаружение рецепторов стероидных гормонов в ткани опухоли не оставляет сомнений в том, что гормоны репродуктивной системы играют определенную роль в развитии рака шейки матки [10].
Спорным остается вопрос о роли пролактина при раке шейки матки. Изменение экспрессии пролактина и его рецептора показано при различных злокачественных новообразованиях [7]. Высокая экспрессия пролактина (60-80 кДа) и рецептора (PRLR) была обнаружена одними исследователями в клеточных линиях опухолей шейки матки HeLa, SiHA и С33А по сравнению с нормальными кератиноцитами [9]. По данным авторов соотношение экспрессии пролактина и его рецептора играет существенную роль в выживаемости клеточных линий рака шейки матки, а использование антагониста пролактина при раке шейки матки обеспечивает большую терапевтическую эффективность. Другими исследователями показано, что системный (в сыворотке крови) и локальный (в тканях) уровень пролактина не различался в интактной ткани, ткани предраковых заболеваний и рака шейки матки [5]. При этом экспрессия рецептора пролактина была значительно выше в ткани рака по сравнению с другими тканями, что указывает на возможную роль именно рецептора пролактина в прогрессировании рака шейки матки.
Клиническое течение эндофитных и экзофитных опухолей шейки матки различно, что, по-видимому, сопряжено, в том числе и с нарушением метаболизма половых гормонов. Однако, в доступной литературе не освещен вопрос зависимости нарушений стероидогенеза от формы роста опухоли шейки матки.
В связи с вышесказанным, целью настоящего исследования явилось изучение содержания половых гормонов, стероидсвязывающего белка и пролактина в тканях шейки матки при эндофитной и экзофитной формах роста опухоли.
Материалы и методы
У 46 больных раком шейки матки (эндофитной и экзофитной формы роста) T1б-2аN0M0 стадии процесса репродуктивного возраста (37,2±2,8 лет) были изучены ткани опухоли, ее перифокальной зоны, визуально неизмененной ткани, полученные при оперативном лечении. Тканью перифокальной зоны считали образцы на расстоянии 1 см от видимого края опухоли. В качестве контроля использовали интактную ткань шейки матки, полученную после экстирпации матки по поводу рака эндометрия T1N0M0. Все женщины находились во 2 фазе менструального цикла.
Стадирование рака шейки матки проводилась в соответствии с классификацией TNM и FIGO. Диагностика рака основывалась на результатах гистологического исследования в соответствии с отраслевыми стандартами и алгоритмами объемов диагностики и лечения злокачественных новообразований в онкологии. Критерием отбора больных являлся морфологически подтвержденный диагноз рака шейки матки. По гистологической структуре опухоли при обоих вариантах роста верифицированы как плоскоклеточный рак без ороговения.
В 10% цитозольных фракциях, приготовленных на 0,1 М калий-фосфатном буфере рН 7.4, содержащим 0,1% Твин-20 и 1% БСА методом твердофазного иммуноферментного анализа определяли: уровень эстрона (Е1) (DBC, Канада), эстрадиола (Е2) и свободного эстриола (Е3) (Хема, Россия), свободного (DBC, Канада) и общего тестостерона (Т) (Хема, Россия), прогестерона (Р4) и пролактина (Прл) (Хема, Россия), сексстероидсвязывающего глобулина (ССГ) (Алкор-Био, Россия). Статистический анализ результатов проводили с помощью пакета Statistica 10.0 Оценка достоверности произведена с использованием t-критерия Стьюдента. Уровень Р<0,05 принимали как значимый. При этом соблюдались общие рекомендации для медицинских исследований.
Результаты исследования и их обсуждение
Результаты проведения сравнительного анализа гормонального статуса в ткани рака шейки матки в зависимости от варианта роста представлены в таблицах 1,2.
При эндофитном варианте роста опухоли содержание эстрона во всех образцах достоверно не отличается от аналогичного показателя в интактной ткани, тогда как уровень эстрадиола был снижен в 3,6 раза, 4 раза и 2 раза соответственно в ткани опухоли, перифокальной зоны и визуально неизмененной ткани. Содержание эстриола снижено в среднем во всех исследованных тканях в 3,4 раза относительно контрольных показателей. Сумма эстрогенов значительно (в среднем в 3 раза) снижена относительно контроля во всех исследованных тканях за счет снижения эстрадиола и эстриола.
Таблица 1
Содержание гормонов, их метаболитов и стероидсвязывающего глобулина в тканях шейки матки при эндофитном варианте роста опухоли
|
показатели |
ткань опухоли |
ткань перифокальной зоны |
визуально неизмененная ткань |
Интактная ткань шейки матки |
|
Эстрон,пг/г |
349,6±31,2 |
360,1±28,7 |
432,7±36,5 |
397,9±37,3 |
|
Эстрадиол, нг/г |
0,5±0,041 |
0,45±0,041 |
0,9±0,071 |
1,8±0,15 |
|
Эстриол, нг/г |
3,7±0,41 |
3,2±0,31 |
3,9±0,351 |
12,1±1,3 |
|
Сумма эстрогенов |
4,6±0,431 |
4,01±0,381 |
5,2±0,471 |
14,3±1,3 |
|
Тестостерон общий, нг/г |
79,5±6,21 |
76,3±8,11 |
89,9±7,41 |
45,8±3,8 |
|
Тестостерон свободный, пг/г |
21,2±2,3 |
24,4±2,1 |
28,5±3,1 |
23,6±2,5 |
|
Прогестерон, нг/г |
17,9±1,61 |
24,8±2,31 |
22,6±2,01 |
39,2±4,1 |
|
Пролактин, нг/г
|
532,9±48,61 |
425,7±39,31 |
301,7±29,6 |
313,5±31,3 |
|
ССГ, нмоль/г
|
48,3±4,51 |
71,4±6,21 |
106,5±9,8 |
102,5±7,6 |
Примечание. 1 - Достоверно по отношению к показателю в интактной ткани. Уровень показателей нормирован на грамм влажной ткани.
Содержание общего тестостерона при эндофитном варианте роста опухоли повышено по сравнению с интактной тканью в среднем в 1,8 раза, при этом показатели его свободной формы достоверно не отличаются от контрольных величин. В ткани эндофитных образований шейки матки происходит падение уровня ССГ, наиболее выраженное в опухоли - в 2,1 раза и в перифокальной зоне - в 1,4 раза при аналогичном контролю уровне этого гормона в визуально неизмененной ткани.
Уровень прогестерона снижен во всех образцах тканей при эндофитном росте опухоли в среднем в 1,8 раза. Содержание пролактина не изменяется в визуально неизмененных тканях, однако увеличено в ткани опухоли и соответствующей перифокальной зоне в 1,7 и 1,4 раза соответственно.
При экзофитном варианте роста опухоли шейки матки во всех исследованных тканях сумма эстрогенов снижена относительно контрольных значений, что связано с падением эстрадиола в среднем в 3 раза и эстриола - в 3,5 раза. Обращает на себя внимание однотипные по уровню изменения эстрадиола в опухолевой ткани, соответствующих тканей перифокальных и визуально неизмененных зон в отличие от аналогичных показателей в тканях эндофитных образований.
Таблица 2
Содержание гормонов, их метаболитов и стероидсвязывающего глобулина в тканях шейки матки при экзофитном варианте роста опухоли
|
показатели |
ткань опухоли |
ткань перифокальной зоны |
визуально неизмененная ткань |
Интактная ткань шейки матки |
|
Эстрон,пг/г |
322,9±28,61 |
497,6±36,11 |
601,3±52,71 |
397,9±37,3 |
|
Эстрадиол, нг/г |
0,6±0,051 |
0,68±0,071 |
0,6±0,061 |
1,8±0,15 |
|
Эстриол, нг/г |
3,5±0,41 |
3,3±0,311 |
4,3±0,51 |
12,1±1,3 |
|
Сумма эстрогенов |
4,42±0,51 |
4,47±0,41 |
5,5±0,61 |
14,3±1,3 |
|
Тестостерон общий, нг/г |
84,9±7,31 |
85,9±8,61 |
54±5,1 |
45,8±3,8 |
|
Тестостерон свободный, пг/г |
28,7±2,9 |
26,9±2,4 |
20,4±1,6 |
23,6±2,5 |
|
Прогестерон, нг/г |
27,6±2,31 |
34,7±3,2 |
35,5±3,7 |
39,2±4,1 |
|
Пролактин, нг/г |
684,3±52,91 |
371,3±35,4 |
289,3±26,1 |
313,5±31,3 |
|
ССГ, нмоль/г |
161,7±13,91 |
101,8±11,3 |
102,7±9,6 |
102,5±7,6 |
Примечание. 1 - Достоверно по отношению к показателю в интактной ткани. Уровень показателей нормирован на грамм влажной ткани.
Андрогеновый статус тканей при экзофитном варианте роста характеризуется повышением общей формы тестостерона в ткани опухоли и перифокальной зоны на фоне неизменного показателя в соответствующей визуально неизмененной ткани. Содержание свободного тестостерона не имело достоверных отличий в ткани экзофитных опухолей. При этом активность ССГ повышена лишь в ткани опухоли. При экзофитной форме роста, очевидно, происходит локальный синтез тестостерона в ткани опухоли, затрагивающий перифокальную зону, при этом, не меняя андрогеновый статус визуально неизмененной ткани. Также только в опухолевой ткани при экзофитном росте достоверно снижен уровень прогестерона в 1,4 раза и повышен уровень пролактина - в 2,2 раза относительно контроля (таблица 2). Значение остальных показателей достоверно не отличаются от уровня гормонов в интактной ткани шейки матки.
Заключение
Признано, что гиперэстрогения является основной патогенетической причиной злокачественных опухолей репродуктивных органов. Это теория подтверждена многочисленными исследованиями [1]. Однако существуют данные, указывающие на участие андрогенов в опухолевой трансформации как гормонозависимых органов, так и негормонозависимых [3]. Повышенный уровень тестостерона на фоне дефицита прогестерона в ткани опухоли и перифокальной зоны обнаружен при раке эндометрия [4]. Наши результаты согласуются с данными литературы о существовании положительной корреляции между повышенным уровнем тестостерона в крови пре- и постменопаузальных женщин и риском развития рака шейки матки. Авторы полагают, что тестостерон может быть этиологическим фактором инвазивной карциномы шейки матки [11].
Результаты проведенного исследования показали, что в самой злокачественной опухоли и прилежащих тканях нарушен гормоногенез, что выражается в резкой смене приоритетов в сторону выраженного превалировании андрогенов на фоне значительного снижения эстрогенов. В опухолях шейки матки наблюдается прогестероновый дефицит, что может отражатся на активности эстрадиола и тестостерона. Наряду с однонаправленными изменениями эстроген-андрогенного соотношения и отсутствия защитного антипролиферативного действия со стороны прогестерона, выявлены различия в динамике ССГ при различных вариантах роста опухоли шейки матки. В случае экзофитного роста снижение эстрогенов и повышение андрогенов влечет за собой парадоксальное повышение выработки ССГ и снижение его при эндофитном варианте рака шейки матки. Выявленные взаимоотношения стероидных гормонов и их связывающего глобулина могут свидетельствовать о потере со стороны гормона его специфической функции связывания и поддержании баланса активных и связанных форм половых гормонов.
Очевидные различия найдены в метаболическом состоянии окружающих опухоль тканях при различных формах роста рака шейки матки. При эндофитном росте опухоли в окружающих и опухолевых тканях происходят однотипные по направленности и выраженности изменения стероидных гормонов. Основные перестройки гормоногенеза в тканях экзофитных образований происходят в самой опухоли, тогда как ткань перифокальной зоны и визуально-неизмененная ткань метаболически сходны со здоровой кожей. Это может свидетельствовать о распространенности процесса малигнизации за пределы опухоли в случаях эндофитного роста и являться возможной причиной различий в клиническом течении рака шейки матки в зависимости от формы роста.
Рецензенты:Каймакчи О.Ю., д.м.н., ассистент кафедры онкологии Ростовского государственного медицинского университета, г. Ростов-на-Дону;
Николаева Н.В., д.м.н., ассистент кафедры онкологии Ростовского государственного медицинского университета, г. Ростов-на-Дону.