Цель исследования
Изучить пространственную изменчивость ферментативной активности почв городских территорий, загрязненных тяжелыми металлами, для оценки экологического состояния почвы.
Объекты и методы исследования
Для установления характера зависимости ферментативной активности почвы от уровня загрязнения тяжелыми металлами в лабораторных условиях был поставлен опыт в вегетационных сосудах. ТМ вносили в почву в составе промышленных отходов - осадков нейтрализации гальваностоков, полученных с одного из приборостроительных заводов Владимирской области, в количестве 3,5 кг/м2.
Почвенные пробы для анализа отбирали с участков на глубинах (см) от 0-15, 15-30, 30-45 тростьевым буром. С каждого вегетационного сосуда на каждой из глубин отбиралось по три объединенные пробы. Отбор и анализ проб проводили через 3 месяца после внесения гальваношлама. Для постановки опытов в лабораторных условиях использовалась дерново-подзолистая почва, отобранная с реперного участка Владимирской области.
В почвенных образцах определяли следующие показатели: целлюлозолитическую активность (аппликационным методом в чашках Петри путем учета остаточного количества нерасщепленной целлюлозы [1]); каталазную активность и дыхание почвы (газометрическим методом [5]), уреазную активность (фотоколориметрически [7]), нитрифицирующую активность (потенциометрическим методом). Определение валового содержания ТМ проводили рентгеноспектральным флуоресцентным методом на приборе «Spectroskan-МАКС-G».
Результаты исследования и их обсуждение
Для исследования влияния ТМ на показатели ферментативной активности, был проведен анализ почвы, который показал, что после внесения ГШ в дозе 3,5 кг/м2 валовое содержание ТМ в корнеобитаемом слое почвы стало превышать его концентрацию на незагрязненной почве и стало характеризоваться как «очень высокое» (табл. 1).
Таблица 1
Содержание тяжелых металлов в исследуемой почве, после внесения ГШ в количестве 3,5 кг/м2
|
Ni мг/кг |
Cu мг/кг |
Cr мг/кг |
контроль |
25 |
15 |
72 |
опыт |
3610 |
2310,8 |
938 |
Полученные данные указывают на значительные превышения концентраций ТМ относительно контроля в 144,4, 154 и в 11,4 раз по никелю, меди и хрому соответственно.
Исследованиями, проведенными С.И. Колесниковым с соавторами, установлено, что при загрязнении почвы ТМ одними из первых нарушаются функции почвы, связанные преимущественно с ее химическими, физико-химическими и биохимическими свойствами: источник элементов питания и энергии, сорбция веществ и микроорганизмов, стимулятор и ингибитор биохимических и других процессов. Выполнение этих функций, в частности, зависит от активности ферментов.
В исследованной почве было проведено измерение активности ферментов, катализирующих наиболее важные биохимические процессы, протекающие в почве: каталазы, отвечающей за разложение перекиси водорода, уреазы, катализирующей гидролиз мочевины, целлюлозолитической активности, нитрифицирующей активности, для выяснения способности почв к мобилизации органических соединений азота и активность почвенного дыхания.
Изучение интенсивности нитрификации показало, что почва контрольных образцов характеризуется большей активностью процесса нитрификации по сравнению с почвой с высоким содержанием тяжелых металлов. Высокая интенсивность нитрификации в почвах свидетельствует о завершении переработки продуктов распада органических соединений и активно идущем процессе самоочищения (табл. 2).
Таблица 2
Активность процесса нитрификации почвы с высоким содержанием ТМ
Глубина отбора проб, см |
Нитрифицирующая активность, количество нитратов после 30-дневной экспозиции, мг/100 г почвы |
|
контроль |
опыт |
|
0-10 |
8,919 |
7,418 |
10-20 |
1,289 |
2,24 |
20-40 |
0,195 |
1,8635 |
Отмечалось снижение активности нитрификации по профилю.
Роль каталазы в почве велика и заключается в разрушении опасной для растений перекиси водорода, образующейся в процессе дыхания растений и в результате биохимических реакций окисления органических веществ [3]. Каталазная активность исследованной почвы уменьшалась по профилю в большинстве изученных образцов (табл. 3), что представляется закономерным, так как количество органического вещества уменьшается в почве вниз по профилю, однако результаты, полученные в образцах с содержанием высоких концентраций ТМ, несколько выше контрольных.
Таблица 3
Каталазная активность почвы с высоким содержанием ТМ
Глубина отбора проб, см |
Каталазная активность почвы, мл O2/ за минуту на 1 г почвы |
|
контроль |
опыт |
|
0-10 |
1,5 |
1,8 |
10-20 |
1,45 |
1,5 |
20-40 |
1,4 |
1,5 |
Это можно объяснить разрушающим действием металлов на перекись водорода. Так, при добавлении незначительных количеств солей железа к растворам перекиси водорода, содержащих медную соль, наблюдалось увеличение скорости разложения на 200%. Резкое выраженное каталитическое действие оказывают ионы меди и железа, несколько более слабое - ионы хрома.
Результаты исследования уреазной активности почвы показали, что скорость разложения мочевины в верхнем слое контрольных образцов, изменяется в диапазоне 18,6-26,3 мг NHз/10 г почвы в сутки и может считаться высокой. В образцах, подвергающихся влиянию тяжелых металлов, скорость разложения мочевины снижается и составляет в среднем 15,9-16,8 мг NHз/10 г почвы в сутки (табл. 4).
Таблица 4
Уреазная активность почвы с высоким содержанием ТМ
Глубина отбора проб, см |
Уреазная активность, Хср, мг NHз/10 г почвы в сутки |
|
контроль |
опыт |
|
0-10 |
26,3 |
16,8 |
10-20 |
24,6 |
15,6 |
20-40 |
18,6 |
15,9 |
В ходе исследований была изучена динамика целлюлозолитической активности почвы (табл. 5). При оценке целлюлозолитической активности почв (%) использовали следующую шкалу: очень слабая < 10, слабая 10-30, средняя 30-50, сильная 50-80, очень сильная > 80.
Таблица 5
Целлюлозолитическая активность почвы с высоким содержанием ТМ
Глубина отбора проб, см |
Целлюлозолитическая активность, Хср, разложения фильтра после 30 дневной экспозиции, % |
|
контроль |
опыт |
|
0-10 |
33,89 |
21,76 |
10-20 |
12,19 |
9,6 |
20-40 |
10,46 |
4,6 |
Дерново-подзлистые почвы в контрольных образцах характеризуются средней (очень слабой) целлюлозолитической активностью (степень разложения фильтра >30 %), так как они бедны органическим веществом, азотом, подвижными формами фосфора и калия, а именно эти условия обусловливают высокую интенсивность разложения целлюлозы. Исследованные нами почвенные образцы загрязненной почвы по большей части характеризуются слабой целлюлозолитической активностью (степень разложения фильтра 10-30%) (табл. 5), это объясняется тяжелыми металлами, присутствующими в почве. Исследования показали, что верхний слой почвы в большинстве случаев обладал более высокой целлюлозолитической активностью по сравнению с нижележащими слоями. Нижележащие слои в загрязненной почве обладали очень слабой целлюлозолитической активностью (<10). Такие результаты мы связываем с тем, что верхние горизонты почвы содержат больше органического вещества, а также большей доступностью микроорганизмов, перерабатывающих клетчатку к кислороду воздуха. Многие исследователи рассматривают процесс распада клетчатки, осуществляемый микроорганизмами, как один из важнейших показателей плодородия почвы, определяющих уровень ее биогенности. Целлюлоза является важным компонентом органического вещества, поэтому скорость разложения целлюлозы влияет на скорость разложения органики в почве в целом, что в свою очередь сказывается на состоянии зеленых насаждений.
В качестве одного из наиболее общих показателей биологической активности почв является «дыхание» почв - выделение углекислого газа и поглощение кислорода почвой. Выделение углекислого газа из почвы отражает интенсивность жизнедеятельности почвенной биоты, скорость минерализации опада и подстилки.
Интенсивность «дыхания» относится к лабильным современным признакам, но в то же время оно тесно связано с суммарной биологической активностью и является очень четким и выразительным показателем изменения скоростей процессов в сезонной динамике, при изменении погодных условий, при загрязнении почв и т.д.
Таблица 6
Дыхание почвы с высоким содержанием ТМ
Глубина отбора проб, см |
Дыхание почвы, мг СО2/100 г почвы за сутки |
|
контроль |
опыт |
|
0-10 |
3,4 |
3,77 |
10-20 |
3,2 |
2,6 |
20-40 |
3 |
2,77 |
В верхнем слое почвы зафиксированы более высокие скорости продуцирования углекислоты, это можно объяснить возросшей скоростью оборота микробной биомассы.
Выводы
1. Загрязнение почвы высокими концентрациями ТМ отражается на активности почвенных ферментов: в ряду повышения чувствительности исследованные активности располагаются в следующем порядке: каталазная активность → дыхание почвы → нитрифицирующая активность → уреазная активность → целлюлозолитическая активность.
2. Наиболее чувствительной к воздействию тяжелых металлов оказалась целлюлозолитическая активность.
Работа выполнена в рамках выполнения государственного задания по проекту № 37.2108.2014/K
Рецензенты:
Мищенко Н.В., д.б.н., профессор кафедры почвоведения института прикладной математики и информатики и био-нанотехнологий ВлГУ, г. Владимир;
Зинченко С.И., д.с.-х.н., профессор, зав. отделом агрофизики почвы, ГНУ Владимирский НИИСХ, г. Суздаль.