Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,791

ХАРАКТЕРИСТИКА ЦЕРВИКО-ВАГИНАЛЬНОЙ МИКРОБИОТЫ У ЖЕНЩИН С УРОГЕНИТАЛЬНЫМ ХЛАМИДИОЗОМ

Егорова Ю.В. 1 Нестеров А.С. 1
1 ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет»
Изучен видовой состав цервико-вагинальной микробиоты у 182 женщин с урогенитальным хламидиозом (УГХ) и у 52 здоровых женщин (группа сравнения). Представленные данные свидетельствуют о доминировании в биотопе влагалища и цервикального канала здоровых женщин нормальной микробиоты, представленной, в основном, лактобациллами. Обсемененность микросимбионтами влагалища, превышал уровень ПМО в цервикальном биотопе. Показатели частоты встречаемости и плотности колонизации в обоих биотопах условно патогенных микроорганизмов не превышали значений нормоценоза. При урогенитальном хламидиозе происходило снижение частоты встречаемости и колонизационной плотности нормофлоры на фоне повышения данных показателей у представителей условно-патогенной микрофлоры репродуктивного тракта. Наиболее часто встречающимся видом при дисбиотических нарушениях микробоценоза влагалища, развивающимся при УГХ, являлся условно патогенный вид Enterococcus faecalis.
урогенитальный хламидиоз.
цервико-вагинальный биотоп
патогенность
микробиота
1. Введенская Э.В., Абайтова Н.Е., Хаванова И.В. Распространенность специфических и неспецифических воспалительных заболеваний урогенитального тракта / Э.В.Введенская, Н.Е.Абайтова, И.В.Хаванова // Тезисы научных работ I Российского конгресса дерматовенерологов. – СПб., 2003. - Т.1. - С.99.
2. Козлов В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий: Руководство для врачей. - М.: Триада-Х., 2003. -439 с.
3. Лебедев В.А., Давыдов А.И. Урогенитальный хламидиоз // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. – 2002. - №1(2). – С.25-31.
4. Позняк А.Л., Сидорчук С.Н., Захаркив Ю.Ф., Гудков Р.В., Хлопунова О.В., Ковалишин И.М. Терапия хронической трихомонадной инвазии у больных с микст-хламидийной мочеполовой инфекцией // Журнал инфектологии. – 2009. – Т.1., №4. – С.60-65.
5. Прилепская В.Н., Абакарова П.Р. Урогенитальный хламидиоз // Гинекология. -2004. -Т.6., №1 – С.10-14.
6. Mayaud P., Mabey D. Approaches to the control of sexually transmitted infections in developing countries: old problems and modern challenges// Sexually Transmitted Infections. – 2004. – Vol.80. – Р.174–182.
Согласно данным ВОЗ урогенитальный хламидиоз (УГХ) является одним из самых распространенных заболеваний, передаваемых половым путем [6]. Ежегодно в мире регистрируется около 100 миллионов новых случаев хламидийной инфекции [4, 5]. Установлено, что УГХ характеризуется высоким удельным весом микст-инфекций, хламидийная моноинфекция наблюдается только у 2-20% пациентов [1, 3]. Показано, что важным кофактором развития патологического процесса в урогенитальном тракте женщин является микробиота данного биотопа, в связи с чем при диагностике урогенитальных инфекций следует обращать внимание на наличие и количественные показатели сопутствующих условно-патогенных бактерий, однако данный вопрос при УГХ остается открытым.

Целью работы явилось изучение особенности видового состава и бактериальной обсемененности микробиоты влагалища и цервикального канала при урогенитальном хламидиозе.

Материалы и методы

Обследовано 296 женщин, больных урогенитальным хламидиозом, средний возраст которых составил 29,6±1,2 года. Из всех обследованных у 182 (61,5%) пациенток выявлен УГХ, вызванный C. trachomatis в виде моноинфекции, они вошли в основную группу исследуемых лиц. У 114 пациенток (38,5%) возбудитель урогенитального хламидиоза был обнаружен в сочетании с возбудителями герпетической инфекции, урогенитального микоплазмоза, остроконечных кондилом, трихомониаза и др. Группу сравнения составили 52 практически здоровых женщины, репрезентативных по возрасту.

Материал для диагностики УГХ получали из трех точек урогенитального тракта в соответствии со стандартами диагностики ИППП [2]. В исследуемом материале возбудителя и антитела к ним выявляли при помощи прямого МФА, реакции непрямой иммунофлуоресценции (НИФ) и ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR с использованием диагностического комплекса «QIAGEN» (Rotor-Gene, Германия). С целью идентификации возбудителей сопутствующих ИППП применяли культуральный, серологические методы и Real-Time PCR.

Состояние вагинального микроценоза, количественную и качественную оценку его состава производили в соответствии с Приказом МЗ СССР №535 от 22.04.85 «Об унификации микробиологических методов исследования, применяющихся в клинико-диагностических лабораториях». Степень микробной обсемененности определяли методом секторального посева, выражая степень колонизации в КОЕ / мл. Родовую и видовую идентификацию культур осуществляли путем изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств выделенных микроорганизмов.

Хламидии, микоплазмы, уреаплазмы идентифицировали при помощи реакции прямой иммунофлюоресценции (реактивы фирмы «ХламиСлайд рекомбинантный»). Для этого из биологического материала урогенитального тракта готовили мазки, фиксировали их в ацетоне 10 мин. и окрашивали 15-20 мин. люминесцирующим иммуноглобулином. Полученные препараты изучали при помощи люминесцентной микроскопии. При положительном результате выявлялись гранулы, имеющие ярко-зеленое свечение.

Статистическую обработку данных проводили при помощи программы «Statistica for Windows».

Результаты исследования

 Проведенные исследования выявили существенные отличия интенсивности роста микробиоты урогенитального тракта у здоровых женщин и у пациенток с УГХ. Было выявлено, что 61,5±4,9% здоровых женщин имело скудную микробиоту и 5,8±2,1% – обильную. Среди обследованных основной группы, напротив, большинство женщин (46,2±6,0%) имело обильную микробиоту и лишь 13,7±5,2% - скудную (табл. 1).

Таблица 1

Интенсивность роста микробиоты у обследованных

Показатели интенсивности роста

Основная группа

(n=182)

Группа сравнения

(n=52)

скудный

13,7±5,2*

61,5±4,9

умеренный

40,1±6,4

32,7±6,2

обильный

46,2±6,0*

5,8±2,1

* – показатель достоверности различий в основной группе и у здоровых женщин (р<0,05)

Наличие дисбиотических изменений было выявлено у 82,6% обследованных с УГХ, у здоровых женщин дисбиоза влагалища обнаружено не было (рис. 1).

Рис.1. Доля выявления дисбиоза влагалища при УГХ

Установлено, что у пациенток основной группы 598 (66,7±7,2%) выделенных штаммов являлись представителями анаэробной и 298 (33,3±6,5%) аэробной микрофлоры. У женщин группы сравнения отмечено иное распределение выделенных штаммов по типу дыхания – 94 (59,5±5,8%) и 64 (40,5±6,1%) соответственно, т.е. соотношение анаэробов/аэробам составило в основной группе 2:1, в группе сравнения 1,5:1 (рис. 2).

 

Рис. 2. Соотношение аэробной к анаэробной микрофлоры у женщин с урогенитальным хламидиозом

Исследования показали, что частота высеваемости представителей биоты в цервикальном и вагинальном биотопах варьировала (табл. 2 ).

Таблица 2

Частота встречаемости симбионтов репродуктивного тракта

здоровых женщин (%)

Виды

микроорганизмов

Влагалище

Цервикальный канал

Lactobacillus spp.

86,5±6,2

50,0±8,2

Bifidobacterium spp.

25,4±3,8

11,5±3,5

Staphylococcus epidermidis

1,9±0,8

13,5±3,6

Streptococcus agalactiae

9,6±3,2

5,8±2,4

Staphylococcus hominis

3,8±1,9

1,9±1,2

Escherichiae сoli

17,3±4,5

5,8±2,2

Enterococcus faecalis

23,1±5,6

13,5±4,8

Propionibacterium spp.

7,8±2,9

5,8±1,7

Corynebacterium spp.

3,8±1,4

1,9±2,5

Candida spp.

11,5±4,7

5,8±3,4

* – достоверность различия показателя, по сравнению с женщинами с УГХ (р<0,05)

В микробиоте влагалища и цервикального канала практически всех здоровых обследуемых (86,5±6,2% и 50,0±8,2% соответственно) доминировали Lactobacillus spp., отмечалось также высокое содержание Bifidobacterium spp.

Видовой спектр лактобацилл, выделенных у здоровых женщин был представлен следующими видами: L. acidophilus (41,2%), L. fermentum (24,3%), L. rhamnosus (7,5%), L.plantarum (16,4%), L. casei (10,6%) (рис. 3).

Рис.3. Видовой спектр лактобацилл, выделенных у здоровых женщин

Показатели обсемененности лактобактериями и бифидобактериями были также самыми высокими и во влагалище (7,0±1,48 lg КОЕ/мл и 5,72±1,33 lg КОЕ/мл соответственно), и в цервикальном канале (4,9±0,91 lg КОЕ/мл и 3,14±1,48 lg КОЕ/мл соответственно) (табл. 3).

Таблица 3

Показатель микробной обсемененности урогенитального тракта

здоровых женщин (lg КОЕ/мл)

Виды микроорганизмов

Влагалище

Цервикальный канал

Lactobacillus spp.

7,0±1,48

4,9±0,91

Bifidobacterium spp.

5,72±1,33

3,14±1,48

Staphylococcus epidermidis

3,78±1,42

3,11±1,17

Streptococcus agalactiae

3,95±1,33

1,96±0,24

Staphylococcus hominis

2,11±1,29

2,42±1,37

Escherichia сoli

3,12±1,31

1,95±1,26

Enterococcus faecalis

3,24±1,12

2,17±0,68

Propionibacterium spp.

1,69±1,14

1,30±0,62

Corynebacterium spp.

3,42±1,28

2,16±0,63

Candida spp.

3,45±1,28

2,05±0,93

* – достоверность различия показателя, по сравнению с женщинами с УГХ (р<0,05)

Как видно из таблицы, показатели обсемененности условно-патогенных видов были ниже, чем у лакто- и бифидобактерий, патогенных видов обнаружено не было.

Изучение видового состава выделенных микроорганизмов урогенитального тракта показало существенные различия в составе микрофлоры и вагинального, и цервикального биотопов у пациенток с УГХ по сравнению со здоровыми женщинами.

Выявлены значительные изменения частоты встречаемости Lactobacillus spp. – доминантного симбионта микробиоценоза данного биотопа, являющегося одним из основных факторов поддержания межвидового баланса микрофлоры урогенитального тракта (табл. 4).

Таблица 4

Частота встречаемости симбионтов урогенитального тракта при УГХ (%)

Виды

микроорганизмов

Влагалище

Цервикальный канал

Lactobacillus spp.

45,1±4,9*

37,4±7,8*

Bifidobacterium spp.

7,1±2,6*

4,9±2,4*

Staphylococcus epidermidis

8,8±3,7*

4,9±1,4*

Streptococcus agalactiae

10,4±4,1

6,0±3,1

Staphylococcus hominis

7,1±2,5*

6,0±2,0*

Escherichiae сoli

31,3±5,1*

15,4±3,8*

Enterococcus faecalis

49,5±6,1*

31,9±6,6*

Propionibacterium spp.

4,4±3,4*

1,6±0,6*

Corynebacterium spp.

9,3±2,3*

4,9±2,2

Candida spp.

26,4±5,9*

10,4±3,7

* – достоверность различия показателя, по сравнению со здоровыми женщинами (р<0,05)

Лактобациллы во влагалище у женщин с УГХ встречались почти в два раза реже, чем у здоровых, частота встречаемости Bifidobacterium spp.была также достоверно ниже у пациенток первой группы по сравнению со второй.

Напротив, показатели частоты встречаемости условно патогенных микроорганизмов при урогенитальном хламидиозе возрасла по сравнению со здоровыми женщинами. Enterococcus faecalis был обнаружен во влагалищном биотопе в 2,1 раза, S. epidermidis в 4,6 раза, S. hominis в 1,9, Corynebacterium spp. в 2,4 раза и Candida spp. – в 2,5 раза чаще, чем у здоровых женщин (p<0,05). В цервикальном биотопе Staphylococcus epidermidis был выделен в 2,7 раза, Bifidobacterium spр. и Propionibacterium spp. – в 2,4 и 3,6 раза соответственно реже, чем у здоровых женщин. Частота встречаемости Enterococcus faecalis, S. hominis, Corynebacterium sрp., E. coli и Candida spp. в цервикальном биотопе была достоверно больше.

 Плотность колонизации симбионтов при УГХ репродуктивного тракта также претерпевала изменения. Так, показатель микробной обсемененности (ПМО) Lactobacillus spp., выделенных из цервикального канала, был в 3,4 раза меньше, чем у здоровых женщин (табл. 5).

Таблица 5

Показатель микробной обсемененности урогенитального тракта при УГХ

(lg КОЕ/мл)

Виды микроорганизмов

Влагалище

Цервикальный канал

Lactobacillus spp.

3,9±1,11

1,43±0,30*

Bifidobacterium spp.

2,12±1,16*

1,41±0,20*

Staphylococcus epidermidis

5,16±2,12*

3,52±1,25

Streptococcus agalactiae

4,39±1,22

2,25±1,35

Staphylococcus hominis

2,68±2,11

6,94±1,11*

Escherichia сoli

4,95±1,86

4,17±1,08

Enterococcus faecalis

8,13±1,64*

4,85±0,93*

Propionibacterium spp.

1,25±0,23

1,21±0,27

Corynebacterium spp.

5,78±1,20*

3,95±0,81*

Candida spp.

2,24±0,43*

1,67±1,21

* – достоверность различия показателя, по сравнению со здоровыми женщинами (р<0,05)

Однако ПМО Enterococcus faecalis и Corynebacterium spp. во влагалищном биотопе был выше в 2,0 и 1,7 раза, а в цервикальном отделяемом в 2,2 и 1,8 раза, по сравнению с группой здоровых женщин (р<0,05).

Представленные данные свидетельствуют о доминировании в биотопе влагалища и цервикального канала здоровых женщин нормальной микробиоты, представленной, в основном, лактобациллами. Они, проявляя высокую степень колонизационной резистентности, являются одним из основных факторов поддержания межвидового баланса микроорганизмов данного биотопа.

Обсемененность микросимбионтами влагалища, превышал уровень ПМО в цервикальном биотопе. Показатели частоты встречаемости и плотности колонизации в обоих биотопах условно патогенных микроорганизмов не превышали значений нормоценоза. При урогенитальном хламидиозе происходило снижение частоты встречаемости и колонизационной плотности нормофлоры на фоне повышения данных показателей у представителей условно-патогенной микрофлоры репродуктивного тракта. Наиболее часто встречающимся видом при дисбиотических нарушениях микробоценоза влагалища, развивающимся при УГХ, являлся условно патогенный вид Enterococcus faecalis.

Рецензенты:

Потатуркина-Нестерова Н.И., д.м.н., профессор, зав. курсом микробиологии кафедры «Общей и клинической фармакологии с курсом микробиологии» ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», г. Ульяновск.

Кан Н.И., д.м.н., профессор, зав. кафедрой «Последипломного образования и семейной медицины» ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», г. Ульяновск.


Библиографическая ссылка

Егорова Ю.В., Нестеров А.С. ХАРАКТЕРИСТИКА ЦЕРВИКО-ВАГИНАЛЬНОЙ МИКРОБИОТЫ У ЖЕНЩИН С УРОГЕНИТАЛЬНЫМ ХЛАМИДИОЗОМ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=16737 (дата обращения: 13.12.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074