Целью работы явилось изучение особенности видового состава и бактериальной обсемененности микробиоты влагалища и цервикального канала при урогенитальном хламидиозе.
Материалы и методы
Обследовано 296 женщин, больных урогенитальным хламидиозом, средний возраст которых составил 29,6±1,2 года. Из всех обследованных у 182 (61,5%) пациенток выявлен УГХ, вызванный C. trachomatis в виде моноинфекции, они вошли в основную группу исследуемых лиц. У 114 пациенток (38,5%) возбудитель урогенитального хламидиоза был обнаружен в сочетании с возбудителями герпетической инфекции, урогенитального микоплазмоза, остроконечных кондилом, трихомониаза и др. Группу сравнения составили 52 практически здоровых женщины, репрезентативных по возрасту.
Материал для диагностики УГХ получали из трех точек урогенитального тракта в соответствии со стандартами диагностики ИППП [2]. В исследуемом материале возбудителя и антитела к ним выявляли при помощи прямого МФА, реакции непрямой иммунофлуоресценции (НИФ) и ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR с использованием диагностического комплекса «QIAGEN» (Rotor-Gene, Германия). С целью идентификации возбудителей сопутствующих ИППП применяли культуральный, серологические методы и Real-Time PCR.
Состояние вагинального микроценоза, количественную и качественную оценку его состава производили в соответствии с Приказом МЗ СССР №535 от 22.04.85 «Об унификации микробиологических методов исследования, применяющихся в клинико-диагностических лабораториях». Степень микробной обсемененности определяли методом секторального посева, выражая степень колонизации в КОЕ / мл. Родовую и видовую идентификацию культур осуществляли путем изучения морфологических, культуральных и биохимических свойств выделенных микроорганизмов.
Хламидии, микоплазмы, уреаплазмы идентифицировали при помощи реакции прямой иммунофлюоресценции (реактивы фирмы «ХламиСлайд рекомбинантный»). Для этого из биологического материала урогенитального тракта готовили мазки, фиксировали их в ацетоне 10 мин. и окрашивали 15-20 мин. люминесцирующим иммуноглобулином. Полученные препараты изучали при помощи люминесцентной микроскопии. При положительном результате выявлялись гранулы, имеющие ярко-зеленое свечение.
Статистическую обработку данных проводили при помощи программы «Statistica for Windows».
Результаты исследования
Проведенные исследования выявили существенные отличия интенсивности роста микробиоты урогенитального тракта у здоровых женщин и у пациенток с УГХ. Было выявлено, что 61,5±4,9% здоровых женщин имело скудную микробиоту и 5,8±2,1% – обильную. Среди обследованных основной группы, напротив, большинство женщин (46,2±6,0%) имело обильную микробиоту и лишь 13,7±5,2% - скудную (табл. 1).
Таблица 1
Интенсивность роста микробиоты у обследованных
Показатели интенсивности роста |
Основная группа (n=182) |
Группа сравнения (n=52) |
скудный |
13,7±5,2* |
61,5±4,9 |
умеренный |
40,1±6,4 |
32,7±6,2 |
обильный |
46,2±6,0* |
5,8±2,1 |
* – показатель достоверности различий в основной группе и у здоровых женщин (р<0,05)
Наличие дисбиотических изменений было выявлено у 82,6% обследованных с УГХ, у здоровых женщин дисбиоза влагалища обнаружено не было (рис. 1).
Рис.1. Доля выявления дисбиоза влагалища при УГХ
Установлено, что у пациенток основной группы 598 (66,7±7,2%) выделенных штаммов являлись представителями анаэробной и 298 (33,3±6,5%) аэробной микрофлоры. У женщин группы сравнения отмечено иное распределение выделенных штаммов по типу дыхания – 94 (59,5±5,8%) и 64 (40,5±6,1%) соответственно, т.е. соотношение анаэробов/аэробам составило в основной группе 2:1, в группе сравнения 1,5:1 (рис. 2).
Рис. 2. Соотношение аэробной к анаэробной микрофлоры у женщин с урогенитальным хламидиозом
Исследования показали, что частота высеваемости представителей биоты в цервикальном и вагинальном биотопах варьировала (табл. 2 ).
Таблица 2
Частота встречаемости симбионтов репродуктивного тракта
здоровых женщин (%)
Виды микроорганизмов |
Влагалище |
Цервикальный канал |
Lactobacillus spp. |
86,5±6,2 |
50,0±8,2 |
Bifidobacterium spp. |
25,4±3,8 |
11,5±3,5 |
Staphylococcus epidermidis |
1,9±0,8 |
13,5±3,6 |
Streptococcus agalactiae |
9,6±3,2 |
5,8±2,4 |
Staphylococcus hominis |
3,8±1,9 |
1,9±1,2 |
Escherichiae сoli |
17,3±4,5 |
5,8±2,2 |
Enterococcus faecalis |
23,1±5,6 |
13,5±4,8 |
Propionibacterium spp. |
7,8±2,9 |
5,8±1,7 |
Corynebacterium spp. |
3,8±1,4 |
1,9±2,5 |
Candida spp. |
11,5±4,7 |
5,8±3,4 |
* – достоверность различия показателя, по сравнению с женщинами с УГХ (р<0,05)
В микробиоте влагалища и цервикального канала практически всех здоровых обследуемых (86,5±6,2% и 50,0±8,2% соответственно) доминировали Lactobacillus spp., отмечалось также высокое содержание Bifidobacterium spp.
Видовой спектр лактобацилл, выделенных у здоровых женщин был представлен следующими видами: L. acidophilus (41,2%), L. fermentum (24,3%), L. rhamnosus (7,5%), L.plantarum (16,4%), L. casei (10,6%) (рис. 3).
Рис.3. Видовой спектр лактобацилл, выделенных у
здоровых женщин
Показатели обсемененности лактобактериями и бифидобактериями были также самыми высокими и во влагалище (7,0±1,48 lg КОЕ/мл и 5,72±1,33 lg КОЕ/мл соответственно), и в цервикальном канале (4,9±0,91 lg КОЕ/мл и 3,14±1,48 lg КОЕ/мл соответственно) (табл. 3).
Таблица 3
Показатель микробной обсемененности урогенитального тракта
здоровых женщин (lg КОЕ/мл)
Виды микроорганизмов |
Влагалище |
Цервикальный канал |
Lactobacillus spp. |
7,0±1,48 |
4,9±0,91 |
Bifidobacterium spp. |
5,72±1,33 |
3,14±1,48 |
Staphylococcus epidermidis |
3,78±1,42 |
3,11±1,17 |
Streptococcus agalactiae |
3,95±1,33 |
1,96±0,24 |
Staphylococcus hominis |
2,11±1,29 |
2,42±1,37 |
Escherichia сoli |
3,12±1,31 |
1,95±1,26 |
Enterococcus faecalis |
3,24±1,12 |
2,17±0,68 |
Propionibacterium spp. |
1,69±1,14 |
1,30±0,62 |
Corynebacterium spp. |
3,42±1,28 |
2,16±0,63 |
Candida spp. |
3,45±1,28 |
2,05±0,93 |
* – достоверность различия показателя, по сравнению с женщинами с УГХ (р<0,05)
Как видно из таблицы, показатели обсемененности условно-патогенных видов были ниже, чем у лакто- и бифидобактерий, патогенных видов обнаружено не было.
Изучение видового состава выделенных микроорганизмов урогенитального тракта показало существенные различия в составе микрофлоры и вагинального, и цервикального биотопов у пациенток с УГХ по сравнению со здоровыми женщинами.
Выявлены значительные изменения частоты встречаемости Lactobacillus spp. – доминантного симбионта микробиоценоза данного биотопа, являющегося одним из основных факторов поддержания межвидового баланса микрофлоры урогенитального тракта (табл. 4).
Таблица 4
Частота встречаемости симбионтов урогенитального тракта при УГХ (%)
Виды микроорганизмов |
Влагалище |
Цервикальный канал |
Lactobacillus spp. |
45,1±4,9* |
37,4±7,8* |
Bifidobacterium spp. |
7,1±2,6* |
4,9±2,4* |
Staphylococcus epidermidis |
8,8±3,7* |
4,9±1,4* |
Streptococcus agalactiae |
10,4±4,1 |
6,0±3,1 |
Staphylococcus hominis |
7,1±2,5* |
6,0±2,0* |
Escherichiae сoli |
31,3±5,1* |
15,4±3,8* |
Enterococcus faecalis |
49,5±6,1* |
31,9±6,6* |
Propionibacterium spp. |
4,4±3,4* |
1,6±0,6* |
Corynebacterium spp. |
9,3±2,3* |
4,9±2,2 |
Candida spp. |
26,4±5,9* |
10,4±3,7 |
* – достоверность различия показателя, по сравнению со здоровыми женщинами (р<0,05)
Лактобациллы во влагалище у женщин с УГХ встречались почти в два раза реже, чем у здоровых, частота встречаемости Bifidobacterium spp.была также достоверно ниже у пациенток первой группы по сравнению со второй.
Напротив, показатели частоты встречаемости условно патогенных микроорганизмов при урогенитальном хламидиозе возрасла по сравнению со здоровыми женщинами. Enterococcus faecalis был обнаружен во влагалищном биотопе в 2,1 раза, S. epidermidis в 4,6 раза, S. hominis в 1,9, Corynebacterium spp. в 2,4 раза и Candida spp. – в 2,5 раза чаще, чем у здоровых женщин (p<0,05). В цервикальном биотопе Staphylococcus epidermidis был выделен в 2,7 раза, Bifidobacterium spр. и Propionibacterium spp. – в 2,4 и 3,6 раза соответственно реже, чем у здоровых женщин. Частота встречаемости Enterococcus faecalis, S. hominis, Corynebacterium sрp., E. coli и Candida spp. в цервикальном биотопе была достоверно больше.
Плотность колонизации симбионтов при УГХ репродуктивного тракта также претерпевала изменения. Так, показатель микробной обсемененности (ПМО) Lactobacillus spp., выделенных из цервикального канала, был в 3,4 раза меньше, чем у здоровых женщин (табл. 5).
Таблица 5
Показатель микробной обсемененности урогенитального тракта при УГХ
(lg КОЕ/мл)
Виды микроорганизмов |
Влагалище |
Цервикальный канал |
Lactobacillus spp. |
3,9±1,11 |
1,43±0,30* |
Bifidobacterium spp. |
2,12±1,16* |
1,41±0,20* |
Staphylococcus epidermidis |
5,16±2,12* |
3,52±1,25 |
Streptococcus agalactiae |
4,39±1,22 |
2,25±1,35 |
Staphylococcus hominis |
2,68±2,11 |
6,94±1,11* |
Escherichia сoli |
4,95±1,86 |
4,17±1,08 |
Enterococcus faecalis |
8,13±1,64* |
4,85±0,93* |
Propionibacterium spp. |
1,25±0,23 |
1,21±0,27 |
Corynebacterium spp. |
5,78±1,20* |
3,95±0,81* |
Candida spp. |
2,24±0,43* |
1,67±1,21 |
* – достоверность различия показателя, по сравнению со здоровыми женщинами (р<0,05)
Однако ПМО Enterococcus faecalis и Corynebacterium spp. во влагалищном биотопе был выше в 2,0 и 1,7 раза, а в цервикальном отделяемом в 2,2 и 1,8 раза, по сравнению с группой здоровых женщин (р<0,05).
Представленные данные свидетельствуют о доминировании в биотопе влагалища и цервикального канала здоровых женщин нормальной микробиоты, представленной, в основном, лактобациллами. Они, проявляя высокую степень колонизационной резистентности, являются одним из основных факторов поддержания межвидового баланса микроорганизмов данного биотопа.
Обсемененность микросимбионтами влагалища, превышал уровень ПМО в цервикальном биотопе. Показатели частоты встречаемости и плотности колонизации в обоих биотопах условно патогенных микроорганизмов не превышали значений нормоценоза. При урогенитальном хламидиозе происходило снижение частоты встречаемости и колонизационной плотности нормофлоры на фоне повышения данных показателей у представителей условно-патогенной микрофлоры репродуктивного тракта. Наиболее часто встречающимся видом при дисбиотических нарушениях микробоценоза влагалища, развивающимся при УГХ, являлся условно патогенный вид Enterococcus faecalis.
Рецензенты:Потатуркина-Нестерова Н.И., д.м.н., профессор, зав. курсом микробиологии кафедры «Общей и клинической фармакологии с курсом микробиологии» ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», г. Ульяновск.
Кан Н.И., д.м.н., профессор, зав. кафедрой «Последипломного образования и семейной медицины» ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», г. Ульяновск.
Библиографическая ссылка
Егорова Ю.В., Нестеров А.С. ХАРАКТЕРИСТИКА ЦЕРВИКО-ВАГИНАЛЬНОЙ МИКРОБИОТЫ У ЖЕНЩИН С УРОГЕНИТАЛЬНЫМ ХЛАМИДИОЗОМ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 6. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=16737 (дата обращения: 19.02.2025).