Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ У МОЛОДИ БЕСТЕРА ПРИ ТИМПАНИИ

Абросимова Н.А. 1
1 Филиал ФГБОУ ВПО "Московский государственный университет технологий и управления им. К.Г. Разумовского" в г. Ростове-на-Дону
Рассмотрены изменения активности пищеварительных ферментов у молоди бестера на начальной, средней и предагональной стадиях заболевания тимпанией. Характерным является соответствие динамики развития тимпании динамике изменения активности пищеварительных ферментов в печени, желудке и кишечнике. По мере возрастания тяжести заболевания активность кислой фосфотазы в печени и кишечнике последовательно уменьшалась, а щелочной фосфатазы наоборот увеличивалась от 1-й к 3-й стадии по сравнению со здоровой рыбой. Активность протеолитических ферментов желудка – пепсина и пепсиногена, а также ферментов поджелудочной железы - химотрипсина+трипсина и амилазы - в кишечнике больных рыб снижалась в соответствии с развитием тимпании. Активность липазы повышалась со 2-й стадии заболевания, а резкое увеличение активности фосфолипазы А уже на 1-й стадии заболевания. Выявленные у больных рыб изменения активности ферментов свидетельствуют об активации процесса липолиза и высвобождении жирных кислот, нарушении скорости катализа триглицеринов и сложных эфиров фосфорной кислоты, что отрицательно влияет на энергетику и метаболизм клеток. Следовательно, динамика изменения активности пищеварительных ферментов может служить отражением развивающегося патологического процесса. Показательным изменениям пищеварительной функции органов пищеварения следует отнести активность кислой и щелочной фосфатаз в печени, липазы и фосфолипазы А в кишечнике.
кишечник
желудок
печень
пищеварительные ферменты
тимпания
1. Абросимова К. С. Изменение липидного обмена молоди бестера в процессе развития тимпании // Естественные науки. 2011. - Астрахань: Изд. дом «Астраханский университет». - № 1 (34). - С. 85-90.
2. Брокерхоф Х., Дженсен Р. Липолитические ферменты. - М.: Мир, 1978. - 396 с.
3. Бурлаков Е. Б., Алексеенко А. В., Аристархова С. А. и др. Механизмы реактивации липидзависимых ферментов пи патологических состояниях // Липиды биологических мембран. - Ташкент, 1982. - С. 16-23.
4. Головина Н. А., Головин П. П., Романова Н. Н., Иванова Н. С. Алиментарные болезни рыб, выращиваемых в условиях теплых вод. Итоги тридцатилетнего развития рыбоводства на теплых водах и перспективы на XXI век: Материалы международного симпозиума. - М.; СПб., 1998. - С. 236-243.
5. Клиническая ферментология. Справочник [под ред. Э. Щеклика]. - Варшава: Польское государственное медицинское издательство, 1966. - 500 с.
6. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник [под ред. В. В. Меньшикова]. - М.: Медицина, 1987. - 368 с.
7. Олехнович В. М., Сорогин В. П., Жогин С. В. и др. Особенности переокисления липидов и антиоксидантных функций при аллергических и инфекционных поражениях бронхо-легочной системы у детей // Механизмы регуляции обмена веществ в норме и патологии: Сб. научн. тр. - Свердловск, 1982. - С. 11-14.
8. Сорвачев К. Ф. Основы биохимии питания рыб. - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. - 247 с.
9. Уголев А. М. Естественные технологии биологических сис­тем. - Л.: Наука, 1987. - 317 с.
10. Jang Jach-Sing, Biggs H.L. Rapid reliable method for measuring serum lipase activity "Clin. Chem". 1971, 17. № 6. Р. 512-518.
Введение

Кормление молоди осетровых рыб при интенсивном разведении в основном базируется на сухих гранулированных комбикормах. При этом чем меньше доля естественных кормов в рационе, тем более высока опасность нарушения обмена веществ и возникновения алиментарных заболеваний, вызванных неполноценностью кормов или их недоброкачественностью. Решение проблем искусственного кормления рыб непосредственно связано с изучением становления пищеварительных ферментов, так как деградация сложных пищевых структур с образованием преимущественно мономеров происходит в основном под влиянием гидролитических ферментов, которые тесно связаны с эндомикрофлорой пищеварительного тракта (кишечника) и составом рациона [8, 9].

Благодаря своему «врожденному иммунитету», позволившему сохраниться этому древнему семейству, осетровые рыбы имеют немного заболеваний, по сравнению с другими рыбами. Вместе с тем, изучение существующих и регистрируемых на сегодняшний день заболеваний находится на относительно низком уровне. К таким заболеваниям относится тимпания.

Согласно литературным и экспериментальным данным следует предположить, что  тимпания является следствием качественного и количественного изменения нормальной микрофлоры кишечника, сопровождающегося развитием нетипичных для него микроорганизмов - дрожжей рода Candida, плесеней и, возможно, других микроорганизмов [1, 4]. Анализ заболеваний молоди осетровых рыб на рыборазводных заводах выявил факт возникновения тимпании при длительном кормлении сухим гранулированным кормом. Вероятно, возникновение тимпании провоцируется  однотипностью диеты вследствие нарушения непрерывно изменяющегося взаимодействия микробного населения и организма.

Материал и методы исследований

Объектом исследований служила молодь бестера массой около 1.5-2.0 г с различной степенью тяжести заболевания тимпанией. В зависимости от степени поражения молоди больная рыба условно была разделена на 3 группы: 1-я (начальная), 2-я (средней тяжести) и 3-я (тяжелая или предагональная). Визуально тяжесть заболевания определяется по припухлости брюшка и поведению [1]. На 3-й стадии молодь перестает питаться, держится на поверхности воды, не реагируя на внешние раздражители.

Активность пищеварительных ферментов определяли в печени, желудке и кишечнике молоди бестера на 3-х стадиях заболевания. Определения проводили на средней пробе. В качестве контроля принимали здоровую молодь (без признаков припухлости брюшка).

Активность  кислых протеиназ  (пепсиноген,  пепсин) определяли   по методу Ансона, щелочных протеиназ (трипсин, химотрипсин) - по Кунтцу [5], активность амилазы - по  методу А. А. Покровского и В. М. Щербакова [6],   щелочной и кислой фосфатазы - методом Бессея-Лоури [5], липазы - по скорости гидролиза трибутирина  [10], фосфатазы А - колориметрически.

Результаты исследований и их обсуждение

На начальной стадии тимпании активность кислой фосфатазы в печени лишь незначительно (на 9 %) снижалась по сравнению со здоровыми рыбами. По мере возрастания тяжести заболевания ее активность последоватедьно уменьшалась на 35 и 56 %.  Активность щелочной фосфатазы наоборот увеличивалась от 1 к 3 стадии соответственно на 9, 30 и 78 % по сравнению со здоровой рыбой (рис. 1). 

Рисунок 1. Активность фосфатаз в печени больной молоди бестера, % к контролю (контроль принят за 100 %)

Активность протеолитических ферментов желудка больных рыб снижалась в соответствии с динамикой развития тимпании. Если на начальной 1 стадии заболевания активность пепсина и пепсиногена у больных рыб была равна или близка к таковой контрольной молоди (различия не превышали 7 %), то в дальнейшем на 2 и 3 стадиях активность данных ферментов снижалась соответственно на 21-31 и 33-45 % (рис. 2).

Рисунок 2. Активность протеолитических ферментов в желудке больной молоди бестера, % к контролю (контроль принят за 100 %)

Активность ферментов поджелудочной железы - химотрипсина+трипсина и амилазы -  в кишечнике больных рыб на 1 стадии тимпании мало отличалась от контрольной молоди (различия соответственно составили 13 и 7 %).  Более существенно активность этих ферментов снижалась от 2 к 3 стадии заболевания. Так, суммарная активность химотрипсина  и трипсина уменьшилась на 33 % и далее на 53 %, а амилазы - на 30 % и почти 60 % по сравнению с контролем (рис. 3).

Рисунок 3. Активность ферментов кишечника больной молоди бестера, % к контролю (контроль принят за 100 %): ХТ+Т - химотрипсин+трипсин, КФ - кислая фосфатаза, ЩФ - щелочная фосфатаза

Направленность изменений активности фосфатаз аналогична таковой в печени. Минимальны отличия активности кислой и щелочной фосфатаз на начальной стадии заболевания - 2-7 %. Активность кислой фосфатазы к 2-й и затем 3-й стадии тимпании снижалась на 24 и 37 %, а активность щелочной фосфатазы повышалась соответственно на 23 и 36 %.

Снижение активности протеолитических ферментов и амилазы у больных рыб, в первую очередь обусловлено снижением интенсивности или отсутствием потребления пищи. Что характерно при голодании. Нарушение баланса активности изученных фосфатаз, играющих важную роль в регуляции обмена фосфорилированных соединений, приводит к изменению направленности липидного обмена у больных рыб. Вследствие этого у них повышается уровень триацилглицеринов, моно- и диацилглицеринов и уменьшается содержание  фосфолипидов [4].

Важная роль в метаболизме внутриклеточных липидов и функционировании биологических мембран принадлежит липазе [2]. Как показано на рисунке 4, активность липазы у рыб на  второй стадии заболевания возросла на 30.8 %, на третьей стадии - на 46.2 % по сравнению со здоровыми рыбами.

Рисунок 4. Активность липазы и фосфолипазы А в кишечнике молоди бестера в процессе развития тимпании, % к контролю (контроль принят за 100 %)

Подобное резкое увеличение активности фермента свидетельствует об активации процесса липолиза и высвобождении жирных кислот.

Еще большее влияние оказывает тимпания на активность фосфолипазы А. Уже на первой стадии ее активность возросла в 1.5, на второй - в 3 и третьей (предагональной) - более чем в 4 раза. Согласно литературным данным и данным экспериментальных исследований между активностью фосфолипазы и окислением липидов существует прямая зависимость. Об этом свидетельствует синхронность изменений активности фосфолипаз и переокисления липидов, поскольку переокисленные мембранные липиды в первую очередь подвергаются воздействию эндогенных фосфолипаз [3, 7].  Вовлечение липидов клеточных мембран в процессы перекисного окисления является существенным фактором структурной и функциональной их дестабилизации. Наряду с этим, продукты начальных этапов переокисления, а также лизофосфатидилхолины, образующиеся под действием фосфолипаз, являются чрезвычайно биологически агрессивными, обладающими выраженными мембранодеструктивными свойствами. Следовательно, при выявленных у больных рыб изменениях активности фосфатаз, липазы и фосфолипазы А у них нарушается скорость катализа триглицеринов и сложных эфиров фосфорной кислоты, что отрицательно влияет на энергетику и метаболизм клеток.

Таким образом, динамика развития тимпании у молоди бестера соответствует динамике изменения активности пищеварительных ферментов в печени, желудке и кишечнике и может служить отражением развивающегося патологического процесса. К показательным изменениям пищеварительной функции органов пищеварения следует отнести активность кислой и щелочной фосфатаз в печени, липазы и фосфолипазы А  в кишечнике.

Рецензенты:

  • Пономарева Елена Николаевна, д. б. н., профессор, зав. отделом водных биологических ресурсов бассейнов южных морей Южного научного центра Российской Академии наук,  г. Ростов-на-Дону.
  • Студеникина Екатерина Ивановна, д.б.н., доцент, зав. отделом Океанографии Азовского НИИ рыбного хозяйства Агенства по рыболовству, г. Ростов-на-Дону.

Библиографическая ссылка

Абросимова Н.А. ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ У МОЛОДИ БЕСТЕРА ПРИ ТИМПАНИИ // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 4. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=6555 (дата обращения: 25.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074