В настоящее время в медицинской практике важное место занимают растительные лекарственные средства в связи с тем, что они обладают широким спектром биологической активности в сочетании с низкой токсичностью, что позволяет использовать их для профилактики и лечения различных заболеваний. Поиск новых источников сырья для получения отечественных фитопрепаратов является актуальной задачей. Помимо внедрения новых, неприменяемых в официнальной медицине растений, необходимо ресурсосберегающее использование отходов промышленной переработки уже разрешенного к применению лекарственного растительного сырья, что требует совершенствования технологических схем производства как существующих, так и вновь разрабатываемых лекарственных препаратов [3].
Ранее нами были проведены исследования липофильной фракции мелколепестника канадского и полыни горькой. Качественный состав пигментов в сырье изучаемых видов растений определяли с помощью специфических химических тестов и восходящей тонкослойной хроматографии, для количественного определения пигментов использовали спектрофотометрическую методику, позволяющую определять каротиноиды и хлорофиллы при их совместном присутствии [1; 4; 5].
Целью данных исследований явилось продолжение изучения веществ первичного биосинтеза, а именно химического состава липофильной фракции некоторых растений семейства Asteraceae.
Материалы и методы исследования
В качестве материала для исследования использовали надземные органы мелколепестника канадского и полыни горькой, собранные в фазу вегетации: «конец цветения - начало плодоношения» на территории Курской и Белгородской областей в 2010-2011 гг., а также шрот полыни горькой, оставшийся после получения настойки.
Определение химического состава липофильной фракции проводили с помощью хромато-масс-спектрометрического метода анализа. Для этого получали извлечения методом мацерации в течение 24 часов (экстрагент - диэтиловый эфир, гидромодуль - 1:10); полученные извлечения фильтровали, упаривали под вакуумом досуха. Сухие экстракты (3-5 мг - точные навески) обрабатывали 0,4 мл 1 М раствора соляной кислоты в метаноле при 80 °С в течение 180 минут (кислый метанолиз). Образовавшиеся при метанолизе метиловые эфиры жирных кислот и другие липидные компоненты экстрагировали гексаном. Гексан упаривали, а сухой остаток силилировали в 20 мкл БСТФА (бис-(триметилсилил)трифторацетамид) в течение 15 минут при 80 °С и разбавляли гексаном до 100 мкл. Для анализа 1 мкл смеси вводили в инжектор системы хромато-масс-спектрометра, работающего в автоматическом режиме [2; 6].
Хромато-масс-спектрометрический анализ проводили на хромато-масс-спектрометре AT-5850/5973 Agillent Technologies (США). Масс-спектрометр квадрупольный с диапазоном масс 2-950 а.е.м. имеет разрешающую способность 0,5 а.е.м. во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эВ. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату. Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза НР-5ms Хьюлетт-Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматографирование проводили в режиме программирования температуры от 135 до 320 °C со скоростью 7 град./мин. Температура инжектора и интерфейса 280 °C. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс-спектров NIST.
Результаты исследования и их обсуждение
В результате проведенного анализа в составе липофильной фракции травы мелколепестника канадского установлено наличие не менее 52 компонентов, в траве и шроте полыни горькой 62 и 53 соединения соответственно: суммарных жирных кислот, стеринов, спиртов, тяжелых терпеноидов (таблицы 1, 2).
Таблица 1 - Результаты исследования состава липофильной фракции травы мелколепестника канадского методом хромато-масс-спектрометрии
Номер пика |
Время удерживания, мин |
Вещество (кислота) |
Состав от суммы, % |
1 |
9,475 |
миристиновая |
2,260 |
2 |
9,489 |
бензол-1-[1,5-диметил-4-гексенил]-4-метил |
2,090 |
3 |
10,906 |
пентадекановая |
1,550 |
4 |
11,144 |
тетраметил-гексадеценол |
1,960 |
5 |
11,252 |
тетраметил-гексадеценол |
1,400 |
6 |
11,483 |
тетраметил-гексадеценол |
1,270 |
7 |
11,557 |
терпен неизвестный |
1,270 |
8 |
11,747 |
тетраметил-гексадеценол |
1,610 |
9 |
12,059 |
гексадеценовая |
1,780 |
10 |
12,344 |
гексадекановая |
7,720 |
11 |
12,690 |
изо-капроновый ангидрид |
1,200 |
12 |
13,029 |
капроновый ангидрид |
1,760 |
13 |
13,327 |
антеизо-гептадекановая |
0,290 |
14 |
13,409 |
гептадеценовая |
0,270 |
15 |
13,551 |
терпенол неизвестный |
0,420 |
16 |
13,687 |
гептадекановая |
1,230 |
17 |
13,890 |
терпенол неизвестный |
1,650 |
18 |
14,284 |
терпенол неизвестный |
2,270 |
19 |
14,670 |
линолевая |
8,170 |
20 |
14,738 |
олеиновая |
4,100 |
21 |
15,023 |
стеариновая |
4,120 |
22 |
15,742 |
6,10,14-триметил-пентадекан-2-ол |
0,870 |
23 |
16,264 |
β-линоленовая кислота |
1,060 |
24 |
17,031 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
0,670 |
25 |
17,078 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
0,860 |
26 |
17,254 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
0,530 |
27 |
17,309 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
0,370 |
28 |
17,533 |
эйкозановая кислота |
1,650 |
29 |
18,360 |
нонадиенил-окси-ноненовая кислота |
0,460 |
30 |
18,719 |
генэйкозановая кислота |
0,690 |
31 |
19,520 |
н-гексакозан |
0,800 |
32 |
19,872 |
докозановая кислота |
2,020 |
33 |
20,971 |
трикозановая кислота |
1,140 |
34 |
21,704 |
н-октакозан |
0,870 |
35 |
21,907 |
2-гидрокси-докозановая кислота |
1,420 |
36 |
22,056 |
тетракозановая кислота |
2,070 |
37 |
22,918 |
2-гидрокси-трикозановая кислота |
1,060 |
38 |
23,074 |
пентакозановая кислота |
0,400 |
39 |
23,135 |
сквален |
0,620 |
40 |
23,759 |
н-триаконтан |
2,030 |
41 |
23,908 |
2-гидрокси-тетракозановая кислота |
2,630 |
42 |
24,077 |
гексакозановая кислота |
0,670 |
43 |
24,695 |
н-гентриаконтан |
0,640 |
44 |
24,844 |
2-гидрокси-пентакозановая кислота |
0,420 |
45 |
25,664 |
н-дотриаконтан |
2,790 |
46 |
25,773 |
2-гидрокси-гексакозановая кислота |
0,320 |
47 |
25,976 |
октакозановая кислота |
0,330 |
48 |
26,322 |
моноглицерид |
2,570 |
49 |
28,045 |
стигмастерол |
6,780 |
50 |
28,771 |
стигмастерол (изомер) |
6,360 |
51 |
29,035 |
амирин |
3,330 |
52 |
29,510 |
амирин (изомер) |
5,180 |
|
|
Сумма |
100 |
Таблица 2 - Результаты исследования состава липофильной фракции травы и шрота полыни горькой методом хромато-масс-спектрометрии
Номер пика |
Время удерживания, мин |
Вещество (кислота) |
Состав от суммы, % |
|
Шрот |
Трава |
|||
1 |
6,688 |
лауриновая |
0,488 |
0,556 |
2 |
6,993 |
азелаиновая |
- |
0,122 |
3 |
7,169 |
элемицин (триметоксиаллилбензол) |
- |
0,427 |
4 |
9,475 |
миристиновая |
1,209 |
1,834 |
5 |
10,384 |
изо-пентадекановая |
0,062 |
0,121 |
6 |
10,520 |
антеизо-пентадекановая |
0,220 |
0,232 |
7 |
10,906 |
пентадекановая |
0,497 |
0,379 |
8 |
11,218 |
гексагидрофарнезол-ацетон |
0,517 |
0,727 |
9 |
11,802 |
изо-гексадекановая |
0,286 |
0,217 |
10 |
12,053 |
гексадеценовая кислота |
0,722 |
1,480 |
11 |
12,337 |
гексадекановая |
6,874 |
8,611 |
12 |
12,459 |
3-гидрокси-миристиновая |
0,129 |
0,156 |
13 |
13,314 |
изо-гептадекановая |
0,397 |
0,146 |
14 |
13,395 |
антеизо-гептадекановая |
0,345 |
0,363 |
15 |
13,531 |
циклопропан-гептадекановая |
0,243 |
0,191 |
16 |
13,687 |
гептадекановая |
0,642 |
0,709 |
17 |
14,670 |
линолевая |
6,943 |
12,326 |
18 |
14,738 |
олеиновая |
5,980 |
5,846 |
19 |
15,023 |
стеариновая |
2,664 |
3,931 |
20 |
15,091 |
2-гидрокси-пальмитиновая |
0,074 |
0,103 |
21 |
15,396 |
октадеканол |
0,289 |
0,196 |
22 |
16,922 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
- |
0,169 |
23 |
17,031 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
- |
0,277 |
24 |
17,078 |
октадекатриеновая, конъюгированная |
- |
0,202 |
25 |
17,166 |
н-триэйкозан |
0,697 |
0,854 |
26 |
17,254 |
эйкозеновая кислота |
- |
0,137 |
27 |
17,533 |
эйкозановая кислота |
1,559 |
1,944 |
28 |
17,824 |
эйкозанол |
0,823 |
0,783 |
29 |
18,360 |
н-пентакозан |
0,407 |
0,385 |
30 |
18,719 |
генэйкозановая кислота |
0,357 |
0,256 |
31 |
18,991 |
генэйкозанол |
- |
0,145 |
32 |
19,520 |
н-гексакозан |
2,225 |
3,394 |
33 |
19,764 |
3-гидрокси-эйкозановая кислота |
- |
0,143 |
34 |
19,872 |
докозановая кислота |
2,706 |
2,320 |
35 |
20,096 |
докозанол |
2,968 |
1,713 |
36 |
20,619 |
н-гептакозан |
0,458 |
0,693 |
37 |
20,971 |
трикозановая кислота |
0,892 |
0,652 |
38 |
21,161 |
трикозанол |
0,480 |
0,300 |
39 |
21,704 |
н-октакозан |
3,524 |
4,324 |
40 |
21,826 |
тетракозеновая кислота |
- |
0,191 |
41 |
21,907 |
2-гидрокси-докозановая кислота |
1,169 |
1,056 |
42 |
22,050 |
тетракозановая кислота |
4,103 |
2,650 |
43 |
22,212 |
тетракозанол |
4,864 |
2,097 |
44 |
22,728 |
н-нонакозан |
0,649 |
0,652 |
45 |
22,918 |
2-гидрокси-трикозановая кислота |
0,641 |
0,588 |
46 |
23,074 |
пентакозановая кислота |
0,505 |
0,428 |
47 |
23,203 |
пентакозанол |
0,524 |
0,317 |
48 |
23,759 |
н-триаконтан |
8,235 |
6,710 |
49 |
23,908 |
2-гидрокси-тетракозановая кислота |
3,186 |
1,941 |
50 |
24,077 |
гексакозановая кислота |
1,881 |
1,884 |
51 |
24,179 |
гексакозанол |
1,497 |
0,773 |
52 |
24,695 |
н-гентриаконтан |
1,018 |
0,612 |
53 |
24,844 |
2-гидрокси-пентакозановая кислота |
0,424 |
0,428 |
54 |
25,041 |
гептакозановая кислота |
0,272 |
0,410 |
55 |
25,664 |
н-дотриаконтан |
7,974 |
4,350 |
56 |
25,773 |
2-гидрокси-гексакозановая кислота |
0,749 |
0,386 |
57 |
25,976 |
октакозановая кислота |
1,535 |
1,837 |
58 |
26,316 |
октакозанол |
0,425 |
0,812 |
59 |
27,665 |
эргостенол |
0,972 |
0,640 |
60 |
27,991 |
стигмастерол |
2,827 |
3,219 |
61 |
28,689 |
ситостерол |
8,875 |
8,315 |
62 |
29,463 |
ланостадиенол |
1,998 |
2,340 |
|
|
Сумма |
100 |
100 |
Заключение
В результате проведенных исследований установлено, что химический состав липофильной фракции исследуемых объектов представлен широким спектром биологически активных соединений, определяющих актуальность дальнейшего изучения их фармакологической активности.
Рецензенты
Шорманов В.К., д.фарм.н., профессор кафедры фармацевтической, токсикологической и аналитической химии ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет», г. Курск.
Новиков О.О., д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической химии и фармакогнозии, ГОУ ВПО «Белгородский государственный университет», г. Белгород.
Библиографическая ссылка
Северин А.П., Яцюк В.Я., Сипливый Г.В., Сипливая Л.Е., Ботов А.Ю. ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЛИПОФИЛЬНОЙ ФРАКЦИИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ СЕМЕЙСТВА ASTERACEAE // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 2. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=5807 (дата обращения: 17.02.2025).