Основным этиологическим фактором язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (ЯБДПК) является грамотрицательная спиралевидная бактерия Helicobacter pylori (H. pylori) [1]. H. pylori выявляется у 80-95% пациентов с ЯБДПК [2]. Несмотря на то что более 50% населения мира инфицированы H. pylori [3], лишь 10-20% инфицированных заболевают язвенной болезнью [4]. В настоящее время ЯБДПК нередко протекает бессимптомно, обнаруживая себя на стадии развития осложнений (перфорация, желудочно-кишечное кровотечение, рубцовый стеноз привратника или постбульбарного отдела двенадцатиперстной кишки и др.). Малосимптомность современного течения ЯБДПК, видимо, связана с недостаточной активацией иммунного ответа на хеликобактерную инфекцию в связи с общей иммунокомпрометированностью человека в современных условиях его жизни. Первыми реагируют на инфекционные патогены клетки врожденного иммунного ответа, и клинические проявления любого инфекционно-воспалительного процесса, к разряду которых можно отнести ЯБДПК, зависят от степени активации клеток врожденного иммунного ответа и уровней выработки провоспалительных цитокинов. Патологические процессы, происходящие в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ), отражаются на функциональном состоянии полости рта, являющейся составной частью ЖКТ. Известно, что H. pylori часто обнаруживается в полости рта (зубной бляшке, слюне, миндалинах, аденоидах) [5]. Хеликобактерная инфекция способна индуцировать продукцию цитокинов клетками иммунной системы и эпителиальными клетками, ингибировать иммунный ответ, вызывать мутационные процессы [6]. Десневая жидкость представляет собой биосубстрат, вполне пригодный для идентификации и измерения таких биомаркеров, как цитокины, поскольку ее можно легко и неинвазивно отобрать для исследования [7]. Однако в доступной литературе мы не обнаружили данных по изучению уровней цитокинов в десневой жидкости у больных ЯБДПК.
Цель настоящего исследования – изучение содержания цитокинов в десневой жидкости у больных ЯБДПК в дебюте заболевания и в динамике лечения с использованием разных методов терапии – общепринятой тройной схемы лечения (антихеликобактерные антибиотики, ингибиторы протонной помпы париетальных клеток желудка) [8] и комплексной терапии, включающей помимо стандартных лекарственных средств сульфат цинка, обладающий иммунотропным эффектом [9].
Материалы и методы исследования. В исследование введено 3 группы обследуемых. Первая группа состояла из здоровых лиц (n=20) с интактными тканями пародонта. Вторая и третья группа включали больных с впервые диагностированной ЯБДПК по 30 человек в каждой группе. Наличие хеликобактерной инфекции устанавливали с помощью уреазного теста, проводимого в ходе осуществления эзофагогастродуоденоскопии, а также по результатам тестирования специфических антител IgM и IgG в сыворотке крови к наиболее специфическому и вирулентному антигену Helicobacter pylori (H. pylori) – CagA [10]. Наряду с этим проводили исследование копрофильтрата на обнаружение ДНК H. pylori методом полимеразной цепной реакции. У включенных в исследование лиц проводили изучение показателей индексной оценки состояния пародонта с использованием таких показателей, как индекс гигиены полости рта, степень кровоточивости десен по индексу кровоточивости PBI, папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс (РМА) [11].
В лечении первой группы пациентов использовали стандартные антихеликобактерные препараты первой линии (амоксициллин 2 г/сут., кларитромицин 1 г/сут., омепразол 40 мг/сут.). В комплекс лечебных средств, использованных при лечении пациентов второй группы, был добавлен сульфат цинка в составе лекарственного препарата – цинктерал, содержащего в одной таблетке 45 мг элементарного цинка. Помимо общепринятых стандартных лабораторно-инструментальных методов исследования проводили определение содержания цитокинов в десневой жидкости. Забор последней осуществляли по методу Жулева Е.Н., Серова А.Б. [12]. Количественное определение цитокинов – IL-1β (интерлейкин-1β), RAIL-1β (рецепторный антагонист интерлейкина-1β), IL-2 (интерлейкин-2), IL-4 (интерлейкин-4), IL-10 (интерлейкин-10), TNFa (фактор некроза опухоли a), IFN-γ (интерферон-γ) - проводили методом твердофазного иммуноферментного метода с использованием тест-наборов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург).
Указанные исследования проводили перед началом эрадикационной терапии и через 1 месяц после завершения лечения. Статистическую обработку проводили с помощью электронной программы (Statistica-v.10), при этом определяли показатели описательной статистики – среднюю арифметическую (М) и стандартное отклонение (SD).
Результаты исследования и их обсуждение. В таблице 1 представлена общая характеристика обследованных групп. При поступлении в стационар у больных обнаруживали болевой, диспепсический и астенический синдромы, связанные с ЯБДПК. 12 пациентов не имели болевых ощущений. В группе больных ЯБДПК чаще выявлялись лица с признаками пародонтита (боль в зубах и челюсти при надкусывании пищи и жевании, застревание пищи в межзубных щелях, пародонтальных карманах, кровоточивость десен, гноетечение из межзубных щелей, десневых и пародонтальных карманов, неприятный запах изо рта) по сравнению с группой здоровых лиц. При объективном исследовании обнаруживались признаки катарального или язвенного гингивита, повышение подвижности зубов, пародонтальные карманы с серозно-гнойным содержимым.
Таблица 1
Общая характеристика групп исследования
Показатель |
Здоровые, n=20 |
Больные ЯБДПК |
|
Стандартная терапия, n=30 |
Стандартная терапия + сульфат цинка, n=30 |
||
Женщины/мужчины |
15/5 |
22/8 |
24/6 |
Возраст, годы |
39,5±10,9 |
38,4±11,3 |
39,8±11,9 |
Болевой синдром, чел. |
0 |
23 |
25 |
Диспепсия, чел. |
0 |
21 |
24 |
Астения, чел. |
0 |
21 |
27 |
Степень кровоточивости десны |
0 |
2,66±0,45 |
2,71±0,51 |
PMA, % |
0 |
59,1±6,2 |
57,3±5,5 |
Индекс гигиены, баллы |
1,1±0,3 |
2,5±0,50 |
2,7±0,45 |
В результате изучения содержания цитокинов в десневой жидкости выявлено существенное повышение уровней большинства цитокинов у больных ЯБДПК (таблица 2). Исключение составил противовоспалительный цитокин – IL-10, уровень которого практически не отличался от такового у здоровых лиц.
Таблица 2
Уровни цитокинов в десневой жидкости у больных ЯБДПК и здоровых
Цитокин, пг/мл |
Больные ЯБДПК, n=60 |
Здоровые, n=20 |
p< |
M±SD |
M±SD |
||
IL-1β |
1430,6±811,8 |
81,4±73,7 |
<0,001 |
RAIL-1β |
33570,7±2301,5 |
20339,1±1821,6 |
<0,001 |
IL-2 |
1601,3±195,9 |
1155,3±106,4 |
<0,001 |
IL-4 |
55,0±6,6 |
45,1±3,3 |
<0,001 |
IL-10 |
153,4±68,2 |
106,7±102,3 |
>0,05 |
TNFa |
30,8±2,2 |
25,5±3,3 |
<0,001 |
IFN-γ |
316,8±225,5 |
34,1±15,4 |
<0,001 |
Анализ уровней цитокинов в десневой жидкости через 1 месяц после проведенного в стационарных условиях лечения показал, что в обеих группах больных независимо от использованного метода лечения произошло снижение исходно повышенных уровней провоспалительных цитокинов – IL-1β, TNFa и IFN-γ, а также противовоспалительных цитокинов – RAIL-1β, IL-4 (таблица 3).
Таблица 3
Динамика уровней цитокинов в десневой жидкости у больных
ЯБДПК под влиянием различных методов лечения
Цитокины, пг/мл |
Больные ЯБДПК |
р |
||
Стандартная терапия, (n=30) |
Стандартная терапия + сульфат цинка, (n=30) |
|||
MSD |
MSD |
|||
IL-1β |
I |
1390,3786,7 |
1461,1±778,7 |
>0,05 |
II |
216,9117,9 ^ *** |
84,8±11,4^ |
<0,001 |
|
RAIL-1β |
I |
319362219 |
34847±2551 |
>0,05 |
II |
216711401^ ** |
20286±904^ |
<0,001 |
|
IL-2 |
I |
1174,7161,8 |
1147,5±161,5 |
>0,05 |
II |
781,1±158,8*** |
1223,3±205,1 |
<0,001 |
|
IL-4 |
I |
55,0±8,0 |
55,0±6,0 |
>0,05 |
II |
46,4±6,5^ |
45,4±5,3^ |
>0,05 |
|
IL-10 |
I |
109,0±6,4 |
98,6±5,5 |
>0,05 |
II |
101,1±14,9 |
96,1±3,7 |
>0,05 |
|
TNFa |
I |
32,8±0,1 |
32,8±0,2 |
>0,05 |
II |
24,2±2,1^ |
26,1±3,5^ |
>0,05 |
|
IFN-γ |
I |
324,7±11,0 |
324,6±16,1 |
>0,05 |
II |
23,7±14,7^ * |
37,3±17,0^ |
<0,01 |
Примечания: I – значение показателя до лечения, II – значение показателя через 1 месяц после лечения; р – степень достоверности различий значений показателей сравниваемых групп больных; знаком (^) обозначено достоверное изменение значения показателя относительно исходного значения; звездочкой (*) отмечена степень достоверности показателя относительно значения группы здоровых лиц (* - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001).
Степень изменения содержания цитокинов различалась в зависимости от примененного комплекса терапии. Так, при добавлении в схему комплексного лечения ЯБДПК сульфата цинка уровень IL-1β снижался в 17,2 раза относительно исходного уровня, уровень RAIL-1β – в 1,7 раза, при применении стандартной терапии уровни данных цитокинов снижались в 6,4 и 1,4 раза соответственно. В результате у больных, получавших соединение цинка, уровни IL-1β и RAIL-1β спустя 1 месяц после лечения сравнялись с показателями здоровых лиц. Уровни IL-2 и IFN-γ, обладающих регулирующим действием в отношении клеточного механизма адаптивного иммунного ответа, после лечения стандартным комплексом антихеликобактерных средств оказывались ниже референсных значений. В то же время в группе больных, получавших сульфат цинка, данные цитокины практически совпадали с уровнями здоровых лиц.
Выявлены существенные различия в результатах контрольных клинико-инструментальных исследований, по которым оценивалась эффективность лечения больных ЯБДПК спустя 1 месяц после проведенной терапии. Так, у 86,6% пациентов, в лечении которых использовали стандартную схему, произошло рубцевание язвенного дефекта, в то время как включение в эту же схему цинксодержащего препарата повышало процент больных с зарубцевавшейся язвой до 95%. При этом у первых зафиксировано значительное снижение уровней антихеликобактерных антител: IgM с исходного уровня 8982 до 15,05,8 Ед/мл (p<0,001), IgG с 270166 до 17,514,4 Ед/мл (p<0,001). Во второй группе больных отмечено также снижение уровня специфических IgM с 10349 до 1214 Ед/мл (p<0,001), но количество антихеликобактерных антител IgG оставалось практически на исходном уровне (исходный уровень – 209191 Ед/мл, конечный – 186348 Ед/мл). При этом в группе пациентов, получавших сульфат цинка, был выше процент эрадикации Н. рylori: ДНК бактерий H. pylori в копрофильтрате обнаруживалась лишь у 16,6% больных, в то время как в сравниваемой группе пациентов – у 43,3% (p<0,05).
Заслуживает внимания тот факт, что антихеликобактерная терапия сказывалась положительно на состоянии тканей пародонта. Так, в группе, получавшей стандартную терапию, степень кровоточивости снижалась с 2,66±0,45 до 1,9±0,28, PMA с 59,1±6,2 до 22,3±4,1%, индекс гигиены с 2,5±0,5 до 1,32±0,3 балла. Добавление в схему лечения сульфата цинка усиливало положительную динамику показателей индексной оценки состояния пародонта у больных ЯБДПК: степень кровоточивости десны уменьшилась с 2,71±0,51 до 1,41±0,2 (p<0,01 – относительно показателя сравниваемой группы больных) и PMA – с 57,3±5,5 до 15,5±3,5% (p<0,01).
Итак, к концу исхода 1 месяца после лечения уровни провоспалительного цитокина TNFa и противовоспалительных цитокинов IL-4 и IL-10 у больных ЯБДПК обеих групп сравнивались со значениями здоровых. Уровень основного провоспалительного цитокина IL-1β на фоне терапии сульфатом цинка снижался до значения здоровых лиц. Под влиянием стандартной терапии снижение уровня данного цитокина было менее выраженным. Уровни IL-2 и IFN-γ снижались в обеих группах: в группе больных, принимавших сульфат цинка, до уровней здоровых лиц, в то время как у пациентов, получавших стандартную терапию, становились ниже значений здоровых.
Положительное влияние сульфата цинка на результат противоульцерогенного лечения мы объясняем тем, что микроэлемент цинк является ключевым фактором в обеспечении иммунореактивности организма человека. Он участвует в регуляции врожденного и адаптивного иммунного ответа. Цинк способен модулировать провоспалительный ответ через влияние на транскрипционный фактор – NF-κβ, являющийся регулятором провоспалительных реакций. Дефицит цинка вызывает атрофию тимуса, Т-лимфоцитопению и расстройство Т-клеточно-опосредованного иммунного ответа, следовательно, противоинфекционной защиты. В условиях дефицита цинка нарушается способность полиморфноядерных лейкоцитов к хемотаксису и фагоцитированию. Устранение дефицита цинка восстанавливает нарушенные функции полиморфноядерных лейкоцитов, Т-лимфоцитов [13]. Результаты ранее проведенного нами исследования демонстрировали улучшение иммунологических показателей на системном уровне у больных ЯБДПК при добавлении в комплекс терапевтических средств соли цинка, что проявлялось в повышении показателей клеточного звена адаптивного иммунитета и фагоцитарной активности нейтрофилов, снижении сывороточных уровней IgM, циркулирующих иммунных комплексов, TNFa и IL-10 [14]. Особого внимания заслуживают данные литературы, свидетельствующие о том, что цинк способен подавлять продукцию провоспалительных цитокинов путем снижения экспрессии генов IL-1 и TNF-α через ингибирование NF-κβ-опосредованного сигнального пути активации продукции данных цитокинов [15].
Заключение. Результаты проведенного лечения свидетельствуют о том, что стандартная трехкомпонентная терапия у больных ЯБДПК не обеспечивает восстановления измененных в дебюте заболевания показателей цитокинового профиля до уровней здоровых: через 1 месяц после лечения остается повышенным уровень провоспалительного цитокина IL-1β на фоне сниженных относительно показателей здоровых и сравниваемой группы уровней IL-2 и IFN-γ – основных цитокинов адаптивного иммунного ответа. У больных, получавших дополнительно к стандартному комплексу лекарственных средств сульфат цинка, восстановились до нормальных значений уровни IL-1β, IL-2 и IFN-γ. При этом сохранялась активация продукции специфических антихеликобактерных IgG-антител. Эти данные позволяют думать о стимулирующем влиянии соединения цинка на протективный иммунный ответ против H. pylori. Об этом же свидетельствует хороший результат эрадикации данного инфекционного патогена, составляющий 83,4% при использовании сульфата цинка. Параллельное действие терапии, включающей сульфат цинка, на состояние тканей пародонта, заключающееся в уменьшении кровоточивости и воспаления десен, улучшении гигиены полости рта, требует дальнейшего осмысления полученных данных и продолжения исследований.
Библиографическая ссылка
Карзакова Л.М., Захарова В.В., Кудряшов С.И., Комелягина Н.А., Луткова Т.С., Пыркина О.В., Верендеева М.А. ДИНАМИКА УРОВНЕЙ ЦИТОКИНОВ В ДЕСНЕВОЙ ЖИДКОСТИ У БОЛЬНЫХ С ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ НА ФОНЕ КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ, ВКЛЮЧАЮЩЕЙ СУЛЬФАТ ЦИНКА // Современные проблемы науки и образования. – 2019. – № 2. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=28741 (дата обращения: 02.11.2024).