Гигиенически полезная вода содержит семь витальных ионов, среди которых есть два двухвалентных катиона –Ca2+ и Mg2+[1]. В воде они присутствуют в виде раствора солей с анионами HCO-3, Cl- ,SO42-, CO32- и частично в виде свободных ионов. Соли Ca(HCO3)2 и Mg(HCO3)2 придают воде специфическое свойство – карбонатную жесткость, которая имеет условную количественную характеристику, образуемую суммой катионов Ca2+ и Mg2+ с анионами SO42- , Cl- , OH-, CO32-.
Оптимальную жесткость воды с точки зрения здоровья человека трудно определить. Большинство авторов рекомендует наиболее благоприятные значения для Mg2+ как минимум 20-35 мг/дм3, для Cа2+ – около 40-80 мг/дм3 и жесткость воды 2-4мг/дм3 [2, 3].
При высоких или низких концентрациях Ca2+или Mg2+в питьевой воде наблюдается ионный сдвиг в плазме и включаются гормональные механизмы регуляции их метаболизма [4]. Потребление питьевой воды с дефицитом или избытком Ca2+ и/или Mg2+, необходимых организму для нормального функционирования, может привести к развитию разного рода патологий.
Исследования европейских ученых, касающиеся взаимосвязи содержания Cа2+ и Mg2+ в питьевой воде и смертности от сердечно-сосудистых заболеваний, показали, что проявление значительных последствий для здоровья возникает уже после одного года постоянного потребления воды с дисбалансом данных ионов [5]. Опубликовано множество работ, документирующих рост заболеваемости и смертности от сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний, связанных с дефицитом Cа2+ и Mg2+ в питьевой воде [6-8].
При стрессовых ситуациях – стойком дефиците или избытке Ca2+ или Mg2+ в плазме активируется процесс миграции ионов из/в депо, в транспорте которых играют значительную роль разные гормоны, в том числе кортизол, тироксин, трийодтиронин и другие [9].
При этом влияние избыточного содержания Ca2+ и Mg2+ в питьевой воде, определяющих ее жесткость, на мочевыделительную систему и, в частности, водно-солевой обмен, практически не исследовано.
Вышесказанное позволило определить цель работы: изучение влияния длительного потребления питьевой воды с повышенным содержанием ионов Ca2+ и Mg2+ на водо- и ионоуретическую функцию почек и концентрацию некоторых адаптивных гормонов в плазме крови крыс.
Материалы и методы исследования. В экспериментальном исследовании (6 мес.) использованы лабораторные белые крысы линии Wistar. Подбор животных и формирование групп осуществляли согласно рекомендациям И.М. Трахтенберга и соавт. [10]. В течение одной недели животные получали стандартный рацион вивария и питьевую воду, соответствующую СанПин 2.1.4.1074 –01 «Водапитьевая» (содержание Cа2+ =20 мг/дм3 и Mg2+= 6 мг/дм3, что позволяет характеризовать данную группу как контрольную. После периода адаптации крысы были разделены на 3группы:1-я группа – контроль (n=10), 2-я группа животных получала имитаты питьевой воды с повышенным содержанием Mg2+=55мг/дм3(n=10) и 3-я группа – с содержанием Ca2+=100мг/дм3(n=10). После первого месяца эксперимента в связи с адаптацией организма животных, концентрация Mg2+ во 2-й экспериментальной группе была увеличена до 85 мг/дм3 и Ca2+в 3-й экспериментальной группе до 140 мг/дм3.
Все эксперименты выполняли в соответствии с Международными рекомендациями, принятыми Международным советом научных обществ (CIOMS) в 1985 г. и правилами лабораторной практики в РФ (Приказ МЗ РФ от 19.06. 2003, № 267).
У всех групп животных в динамике наблюдения (на 1-м, 4-ми 6-м месяцах) потребления питьевой воды изучали функцию почек путем сбора фоновых проб мочи в течение 4 часов и за 3 часа после приема 5 % водной нагрузки в соответствии с рекомендациями для изучения осморегулирующей функции почек [11]. В собранных образцах определяли объем мочи, концентрацию макроэлементов (Na+,K+,Ca2+,Mg2+), креатинина и осмолярность. На основании этих данных общепринятыми методами рассчитывали следующие показатели: диурез (V), скорость клубочковой фильтрации (СКФ), относительную реабсорбцию жидкости (%RH2O), осмотическую концентрацию мочи (Uosm), концентрацию катионов в моче (UxV) и экскретируемые фракции катионов (EFх), как показатель их реабсорбции, характеризующие водо- и ионовыделительную функции почек [4, 11]. В конце эксперимента (6-й месяц) крыс декапитировали и собирали пробы крови для исследования концентрации некоторых адаптивных гормонов в плазме – кортизола, тиреотропного гормона (ТТГ) и тиреоидных гормонов.
Концентрации ионов Ca2+, Mg2+, креатинина определяли методом биохимического анализа проб (анализатор «BS–200E», Китай); концентрацию электролитов Na+ и K+ в моче –методом пламенной фотометрии (BWB-XPF lame Photometer, Великобритания); осмолярность мочи измеряли методом криоскопии (миллиосмометр «Osmomat», Германия), концентрацию гормонов – иммуноферментным методом с использованием отечественных стандартных наборов (фотометр «Multiskan FC», США).
Статистический анализ результатов исследования проводили по непараметрическим критериям методами вариационной статистики в динамике наблюдения в каждой группе и при сравнении разных групп; различия считались статистически значимыми при р≤ 0,05 [12].
Результаты исследования. На первом месяце приема питьевой воды с повышенными по сравнению с контролем концентрациями Са2+ и Mg2+ фоновый диурез у крыс обеих экспериментальных групп был статистически значимо ниже контрольной. При этом отмечалось повышение относительной реабсорбции жидкости и осмолярности мочи. Это может свидетельствовать о напряжении осморегулирующей функции почек.
После приема 5 % водной нагрузки различия между группами по показателям диуреза, скорости клубочковой фильтрации, реабсорбции жидкости сглаживались и статистически значимо не отличались. При этом у 3-й экспериментальной группы сохранялось повышение осмолярности мочи (табл.1).
Таблица1
Диуретическая функция почек крыс на первом месяце эксперимента
Показатель |
Концентрация Mg2+, Са2+,мг/дм3 |
||
Контроль |
Mg2+55 |
Са2+ 100 |
|
Фон |
|||
V,мл/100г*час |
0,29±0,04 |
0,15±0,03* |
0,17±0,02* |
СКФ,мл/100г*час |
28,57±1,51 |
25,32±2,68 |
21,12±2,10* |
%RH2O,% |
98,99±0,08 |
99,42±0,05* |
99,26±0,08* |
Uosm,Мосм/л |
982±89,5 |
1477,80±83,20* |
1602,4±129,3* |
После 5% от массы тела водной нагрузки (за 3 часа) |
|||
V,мл/100г*час |
1,35±0,06 |
1,41±0,06 |
1,29±0,08 |
СКФ,мл/100г*час |
35,99±2,33 |
33,15±1,26 |
34,01±2,08 |
%RH2O,% |
96,19±0,17 |
95,69±0,25 |
96,15±0,22 |
Uosm,Мосм/л |
162,80±20,51 |
161,10±12,16 |
217,20±20,99* |
Примечания: здесь и в последующих таблицах:1.*p<0,05 по сравнению с контролем; 2. ∆р<0,05 между 2-й и 3-й экспериментальными группами.
Анализ ионоуретической функции почек показал, что уже через 1 месяц после приема питьевой воды с разными концентрациями Ca2+ и Mg2+в фоновых пробах мочи наблюдалось статистически значимое снижение экскреции основных ионов, вероятно, за счет уменьшения диуреза и благодаря усилению реабсорбции катионов, на что указывало статистически значимое снижение экскретируемых фракций ионов, кроме Na+. После 5 % водной нагрузки происходило увеличение экскреции ионов Ca2+, Na+ и K+, особенно выраженное в 3-й экспериментальной группе, что свидетельствует об активации ионорегулирующих механизмов после приема воды с высокой концентрацией Ca2+, тогда как между 1-й и 2-й группами различия практически не наблюдались (табл. 2).
Таблица 2
Ионоуретическая функция почек крыс на первом месяце эксперимента
Показатель |
Концентрация Mg2+, Са2+,мг/дм3 |
||
Контроль |
Mg2+55 |
Са2+100 |
|
Фон |
|||
UCaV,мМ/100г*час |
1,22±0,15 |
0,48±0,07* |
0,80±0,18* |
EFCa,% |
1,96±0,24 |
0,88±0,11* |
1,71±0,36∆ |
UMgV,мМ/100г*час |
0,94±0,10 |
0,52±0,08* |
0,53±0,07* |
EFMg,% |
4,72±0,36 |
2,82±0,23* |
3,65±0,40∆ |
UNaV,мМ/100г*час |
12,28±1,14 |
10,94±1,97 |
7,76±2,06* |
EFNa,% |
0,30±0,02 |
0,28±0,3 |
0,25±0,06 |
UKV,мМ/100г*час |
15,87±1,62 |
11,79±1,85* |
7,25±1,58* |
EFK,% |
8,09±1,18 |
6,36±0,52 |
4,82±0,82*∆ |
После 5 % от массы тела водной нагрузки (за 3 часа) |
|||
UCaV,мМ/100г*час |
0,82±0,17 |
0,66±0,09* |
1,39±0,49*∆ |
EFCa,% |
0,94±0,35 |
0,90±0,13 |
2,02±0,75*∆ |
UMgV,мМ/100г*час |
3,84±0,27 |
3,40±0,29 |
3,91±0,22 |
EFMg,% |
15,47±1,00 |
14,66±1,10 |
16,77±0,95 |
UNaV,мМ/100г*час |
5,05±0,88 |
4,21±0,36 |
7,38±0,70∆ |
EFNa,% |
0,10±0,02 |
0,09±0,01 |
0,15±0,01*∆ |
UKV,мМ/100г*час |
36,78±2,97 |
30,19±3,31 |
43,74±2,48*∆ |
EFK,% |
14,40±1,02 |
12,76±1,28 |
18,45±1,39* |
Это свидетельствует о том, что водная нагрузка снижает напряжение осморегулирующих механизмов во всех группах, но стимулирует экскрецию основных катионов в 3-й группе.
В связи с адаптацией животных к описанным концентрациям ионов Ca2+ и Mg2+ мы увеличили концентрацию этих ионов в воде Mg2+до 85 мг/дм3 и Са2+ до 140 мг/дм3. После 4-х месяцев приема питьевой воды с различным содержанием ионов наблюдалось снижение уровня фонового диуреза в экспериментальных группах за счет повышения относительной реабсорбции жидкости. После введения 5 %-ной водной нагрузки сохранялись статистически значимые отличия по сравнению с контрольной группой, в отношении СКФ и реабсорбции жидкости, благодаря чему скорость мочеотделения и осмолярность мочи между группами не различались (табл. 3).
Таблица 3
Диуретическая реакция почек крыс на 4 месяце после начала эксперимента
Показатель |
Концентрация, Mg2+, Са2+, мг/дм3 |
||
Контроль |
Mg2+85 |
Са2+ 140 |
|
Фон |
|||
V,мл/100г*час |
0,29±0,06 |
0,16 ±0,02* |
0,22±0,03 |
СКФ,мл/100г*час |
10,09±1,09 |
13,42 ±2,94 |
14,89±1,70* |
%RH2O,% |
97,08±0,57 |
98,56 ±0,25* |
98,46±0,21* |
Uosm,Мосм/л |
568,25±77,24 |
833,29 ±108,10* |
692,8±108,6 |
После 5 % от массы тела водной нагрузки (за 3 часа) |
|||
V,мл/100г*час |
1,43±0,09 |
1,47 ±0,11 |
1,47±0,08 |
СКФ,мл/100г*час |
11,20±0,49 |
15,34 ±1,57* |
13,91±0,54* |
%RH2O,% |
87,13±0,75 |
89,93 ±1,09 |
89,35±0,48* |
Uosm,Мосм/л |
122,75±18,43 |
99,00 ±9,85 |
117,17±18,04 |
При анализе ионоуретической функции почек крыс через 4 месяца потребления воды разного ионного состава статистически значимые отличия в выведении основных ионов выявлены в экспериментальных группах по сравнению с контролем (табл. 4).
Таблица 4
Ионоуретическая реакция почек крыс через 4 месяце после начала эксперимента
Показатель |
Концентрация Mg2+, Са2+, мг/дм3 |
||
|
Контроль |
Mg2+85 |
Са2+ 140 |
Фон |
|||
UCaV,мМ/100г*час |
0,18±0,04 |
0,35 ±0,05* |
0,28±0,05* |
EFCa,% |
0,73±0,12 |
1,56 ±0,31* |
0,95±0,14 |
UMgV,мМ/100г*час |
0,99±0,19 |
0,54 ±0,07* |
0,71±0,10 |
EFMg,% |
6,09±1,46 |
4,02±0,77* |
4,08±0,53* |
UNaV,мМ/100г*час |
0,08±0,01 |
0,15 ±0,03* |
0,06±0,02 |
EFNa,% |
0,01±0,00 |
0,01 ±0,00 |
0,01±0,00 |
UKV,мМ/100г*час |
25,87±3,54 |
19,72 ±4,40* |
18,06±2,84* |
EFK,% |
1,83±0,22 |
1,07 ±0,14* |
0,93±0,21* |
После 5 % от массы тела водной нагрузки (за 3 часа) |
|||
UCaV,мМ/100г*час |
0,38±0,15 |
0,50 ±0,15 |
0,28±0,03 |
EFCa,% |
1,47±0,53 |
1,69 ±0,47 |
0,96±0,12 |
UMgV,мМ/100г*час |
2,74±0,37 |
3,98 ±0,44* |
3,12±0,29 |
EFMg,% |
19,74±2,06 |
22,27 ±2,37* |
18,07±1,66 |
UNaV,мМ/100г*час |
0,29±0,09 |
0,24 ±0,04 |
0,43±0,13 |
EFNa,% |
0,02±0,00 |
0,01 ±0,00 |
0,02±0,01 |
UKV,мМ/100г*час |
35,49±5,47 |
24,74 ±3,67* |
22,20±5,15*∆ |
EFK,% |
46,99±6,44 |
21,05 ±2,41* |
22,22±5,73*∆ |
В отличие от 1-го месяца, в фоновых пробах мочи наблюдалось статистически значимое повышение экскреции и экскретируемых фракций ионов Ca2+ и Na+, снижение уровня экскреции ионов Mg2+ и K+. Описанные изменения ионоуреза были особенно отчётливо выражены в группе с повышенным потреблением Mg2+. После водной нагрузки большинство отличий нивелировалось, при сохранении повышенного по сравнению с контролем выведения Mg2+ (2-я экспериментальная группа) и уменьшении калийуреза.
На 6 месяце эксперимента почечная функция в условиях фонового сбора мочи свидетельствовала о напряжении осморегулирующих механизмов в 3-й группе крыс, что выражалось в более низком уровне диуреза, повышенной реабсорбции жидкости и осмолярности. Во второй опытной группе эти различия были выражены в меньшей степени (табл. 5).
Таблица5
Диуретическая функция почек крыс нашестом месяце эксперимента
Показатель Конецэксперимента |
Концентрация Mg2+, Са2+,мг/дм3 |
||
Контроль |
Mg2+85 |
Са2+ 140 |
|
Фон |
|||
V,мл/100г*час |
0,20±0,02 |
0,23±0,02 |
0,17±0,01*∆ |
СКФ,мл/100г*час |
11,95±1,33 |
13,98±0,86 |
15,02±1,10* |
%RH2O,% |
98,26±0,25 |
99,02±0,63* |
98,89±0,06* |
Uosm,Мосм/л |
1147,81±127,69 |
1134,79±117,82 |
1565,81±122,02*∆ |
К этому периоду статистически значимых отличий ионоуретической функции почек у экспериментальных животных по сравнению с контролем практически не наблюдалось (за исключением увеличения реабсорбции К+), что следует расценивать как адаптацию ионорегулирующих механизмов к питьевой воде с повышенным содержанием Ca2+иMg2+(табл.6).
Таблица 6
Ионоуретическая функция почек крыс на шестом месяце эксперимента
Показатель Конецэксперимента |
КонцентрацияMg2+, Са2+,мг/дм3 |
||
|
Контроль |
Mg2+85 |
Са2+ 140 |
Фон |
|||
UCaV,мМ/100г*час |
0,76±0,17 |
1,09±0,14 |
0,96±0,08 |
EFCa,% |
2,51±0,54 |
3,07±0,29 |
2,79±0,17 |
UMgV,мМ/100г*час |
0,70±0,11 |
0,79±0,08 |
0,59±0,05 |
EFMg,% |
3,33±0,46 |
2,74±0,21 |
2,01±0,16*∆ |
UNaV,мМ/100г*час |
0,13±0,03 |
0,10±0,01 |
0,17±0,03 |
EFNa,% |
0,01±0,01 |
0,01±0,01 |
0,01±0,01 |
UKV,мМ/100г*час |
34,17±6,72 |
38,29±5,36 |
45,81±3,05*∆ |
EFK,% |
75,55±1,54 |
46,10±5,09 |
39,20±1,92*∆ |
В регуляции осмо- и ионорегулирующей функции почек, а также в адаптивных реакциях организма большую роль играют гормоны коры надпочечников и щитовидной железы [9, 13]. Исследование концентрации основных адаптивных гормонов в плазме показало, что питьевая вода с повышенным уровнем Са2+ и Mg2+к 6-му мес. наблюдения вызывала снижение концентрации кортизола и тироксина, уровень ТТГ и трийодтиронина статистически значимо не отличался между группами (табл. 7).
Таблица 7
Влияние длительного потребления питьевой воды с повышенным содержанием кальция и магния на концентрацию в плазме крови основных адаптивных гормонов
Группа |
Показатели |
|||
Кортизол, нМ/л |
Тиреотропный гормон, мМЕ/л |
Трийодтиронин (Т3), нМ/л |
Тироксин (Т4), нМ/л |
|
Контроль |
134,36±5,38 |
1,38±0,41 |
3,04±0,12 |
144,66±7,31 |
Mg2+85 |
100,57±5,52* |
1,25±0,63 |
2,85±0,20 |
112,40±12,57* |
Са2+ 140 |
111,07±11,70* |
1,45±0,66 |
2,81±0,17 |
124,56±9,72* |
Заключение. Таким образом, совокупность показателей, характеризующих реакцию организма на длительный прием питьевой воды с повышенным содержанием Са2+и Mg2+, позволяет сделать вывод о том, что на первом месяце потребления происходит напряжение осморегулирующих механизмов в фоновых пробах. На 4-м месяце эксперимента снижается напряжение осморегулирующей функции и усиливается экскреция ионов, особенно при потреблении воды с высоким содержанием Mg2+, отражая напряжение ионорегулирующих механизмов. К шестому месяцу различия по сравнению с контрольной группой сглаживаются, что говорит о формировании адаптации организма к питьевой воде с повышенным содержанием Са2+ и Mg2+. В большей степени разница осмо- и ионорегулирующих показателей к 6 мес. выражена при потреблении питьевой воды с повышенным содержанием Са2+. Водные нагрузки уменьшают напряжение осмо- и ионорегулирующих механизмов, вероятно, в результате усиления процесса разведения. К этому времени у крыс, получавших питьевую воду с содержанием Mg2+85 и Са2+ 140 мг/дм3, также снижалась концентрация гормонов кортизола и Т4, особенно после приема воды с высоким содержанием Mg2+, что, вероятно, свидетельствует о снижении функциональных резервов адаптивных регуляторных механизмов в результате длительного напряжения гормональной системы, обеспечивающей гидро- и ионоуретическиую реакцию почек в течение 6 месяцев. Более существенное снижение концентрации этих гормонов после приема воды, содержащей Mg2+ в концентрации 85 мг/дм3, чем в группе потреблявшей Са 140 мг/дм3 может свидетельствовать о большей «плате» за функциональную адаптацию системы регуляции водно-солевого обмена при хроническом действии Mg2+ на организм.
Библиографическая ссылка
Недовесова С.А., Трофимович Е.М., Турбинский В.В., Айзман Р.И. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ФУНКЦИИ ПОЧЕК И ГОРМОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ У КРЫС ПРИ ПОТРЕБЛЕНИИ ПИТЬЕВОЙ ВОДЫ С ПОВЫШЕННОЙ КОНЦЕНТРАЦИЕЙ КАЛЬЦИЯ И МАГНИЯ // Современные проблемы науки и образования. 2017. № 6. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=27335 (дата обращения: 02.04.2025).
DOI: https://doi.org/10.17513/spno.27335