Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОСТАВА МИКРОБИОТЫ ВЛАГАЛИЩА У ДЕВОЧЕК В ПУБЕРТАТНОМ ПЕРИОДЕ

Уварова Е.В. 1 Казакова А.В. 2
1 ФГБУ «Научныий центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России
2 ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Проведен анализ показателей микроценоза влагалища у девочек в пубертатном периоде полового созревания. Критерии возрастного интервала выбранных групп были обусловлены основными этапами формирования репродуктивной системы. Количество обследованных девочек составило 115, из них девочек от менархе до 15 лет — 44 человека, от 15 лет до 18 лет — 71. Исследование состояния влагалищного микробиоценоза проводили при помощи комплексной количественной полимеразной цепной реакции с использованием тест-систем «Фемофлор-17». При оценке состава условно-патогенной флоры учитывалось не только ее присутствие, но и количество по отношению к общей бактериальной массе. Сравнительный анализ микробного пейзажа влагалища в пубертатном периоде полового развития показал, что в составе микрофлоры в зависимости от фазы пубертата достоверных различий нет. Микрофлора влагалища в основном представлена Lactobacillis spp. и незначительной долей анаэробных микроорганизмов, лидирующее положение из которых занимает gardnerella.
микроценоз
пубертатный период
общая бактериальная масса.
1. Анкирская А.С., Муравьева В.В. Интегральная оценка состояния микробиоты влагалища. Диагностика оппортунистических вагинитов // Медицинская технология. М., 2011.
2. Возрастные особенности иммунитета у детей: лекция для врачей / Л.А. Щеплягина, В.М. Чернов, И.В. Круглова [и др.]. М.: Анита Пресс, 2010. – 35 с.
3. Коколина В.Ф. Диагностика и лечение урогенитальных инфекций у детей и подростков: пособие для врачей. М.: Копиринг, 2010. – 36 с.
4. Основные закономерности развития репродуктивной системы девочек: пособие для врачей / А.В. Казакова, Н.В. Спиридонова, О.И. Линева. Самара: Офорт, 2013. – 52 с.
5. Плотко Е.Э., Донников А.Е., Ворошилина Е.С., Хаютин Л.В., Тумбинская Л.В. Биоценоз влагалища с точки зрения количественной ПЦР: что есть норма? // «Акушерство и гинекология». – 2011. – № 1. — С. 66–70.
6. Спиридонова Н.В. Неспецифический вагинит у беременных: возможно ли лечение с сохранением вагинальных лактобацилл? [Текст] / Н.В. Спиридонова, Е.И. Басина, Е.В. Мелкадзе // «Акушерство. Гинекология. Репродукция». – 2012. – Т. 6, № 1. – С. 6–13.
7. Спиридонова Н.В. Особенности микробного пейзажа влагалища у девочек со слипчивым процессом наружных половых органов / Н.В. Спиридонова, А.В. Казакова // «Российский вестник акушера-гинеколога». – 2014. – № 2. – С. 82–86.
8. Спиридонова Н.В., Казакова А.В. Микробный пейзаж влагалища в зависимости от слипчивого процесса гениталий девочек нейтрального возраста / Н.В. Спиридонова // Фундаментальные исследования. – 2015. – № 1-3. – С. 603–608.
9. Уварова Е.В. Детская и подростковая гинекология: руководство для врачей. М.: Литерра, 2009. – 375 с.
10. Уварова Е.В. Специалистам об интимной гигиене девочек от рождения до половой зрелости // Репродукт. здоровье детей и подростков. – 2010. – № 2. – С. 87–92.

В настоящее время большое внимание уделяется проблеме микробной флоры влагалища, имеющей большое значение в формировании репродуктивного здоровья у детей и подростков.

В структуре гинекологической пораженности доля воспалительных заболеваний вульвы и влагалища занимает лидирующее значение.

На современном этапе развития детской гинекологической помощи мало исследований, посвященных изучению микрофлоры влагалища, учитывая периоды полового развития девочки [2–6]. В результате норма биоценоза влагалища, изменяющаяся в зависимости от стадии полового развития ребенка, описываемая разными авторами, имеет много вариаций, что не дает возможности стандартизировать эти показатели. Вследствие этого практический врач не всегда в состоянии оценить микрофлору влагалища как имеющую прямое отношение к патологическому процессу. В ряде случаев существует гипердиагностика вульвовагинитов за счет того, что случайные находки и комменсалы полового тракта принимаются за патогенный фактор [1, 8–10].

Становится очевидной необходимость определения микробиологической картины и стандартизации показателей микрофлоры половых путей в зависимости от стадии полового созревания для дальнейшего использования их в практике врача детской и подростковой гинекологии.

Целью нашего исследования явилось изучение показателей микроценоза влагалища у девочек в пубертатном периоде полового созревания.

Задачи:

  1. Сформировать группы девочек, участвующих в исследовании, учитывая этапы формирования репродуктивной системы.
  2. Определить микробиологические характеристики влагалища методом комплексной количественной полимеразной цепной реакции с использованием тест-систем «Фемофлор-17» в группах девочек от менархе до 15 лет и 16–18 лет.
  3. Выявить закономерности изменения микрофлоры и стандарты влагалищного биотопа у здоровых девочек в периоде пубертата.

Материалы и методы исследования

Взятие биоматериала осуществлялось на базе детского поликлинического отделения № 1 ГБУЗ СО СГП № 13 с февраля по август 2015 г., при подписании пациенткой или законным представителем информированного согласия на проведение исследования.

Количество обследованных девочек составило 115 человек, из них девочек от менархе до 15 лет — 44 человека, от 15 лет до 18 лет — 71 . Критерии возрастного интервала выбранных групп были обусловлены основными этапами формирования репродуктивной системы.

Критерии включения: здоровые девочки, проходившие профилактический осмотр с отсутствием жалоб, неизмененной слизистой влагалища, а также физиологическими выделениями из половых путей.

Критерии исключения: применение антибактериальных препаратов за месяц до обследования, отсутствие тяжелой экстрагенитальной патологии и наличие острых воспалительных заболеваний на момент осмотра и забора материала.

Исследование состояния влагалищного микробиоценоза проводили при помощи комплексной количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием тест-систем «Фемофлор-17» (производства ООО «НПО ДНК-Технология», Россия).

Материалом для исследования методом комплексной количественной ПЦР у девочек являлся соскоб эпителиальных клеток, который забирался из заднего свода влагалища через гименальное кольцо. Хранение материала осуществлялось при температуре 2–8°С не более 8 ч, далее при температуре –20°С в течение 1 месяца или при температуре –70°С в течение 1 года.

Всего исследовано 115 образцов соскобов отделяемого слизистой влагалища. Спектр диагностируемых показателей включал КВМ (контроль взятия материала), ОБМ (общая бактериальная масса), наличие микоплазм (Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.), дрожжеподобных грибов (Candida spp.); Lactobacillus spp., (Enterobacterium spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp.), (Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Lachnobacterium spp./Clostridium spp., Mobiluncus spp./Corinebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae), а также идентификацию патогенов (Mycoplasma genitalium).

Заключение по результатам диагностического теста Real-Time PCR получали в виде диаграммы, которая описывала вид микробной флоры влагалища.

Рассчитывали абсолютные (в логарифмах полученных показателей бактериальной массы условно-патогенного организма Lg10УПМ) и относительные показатели (разница логарифмов полученных показателей общей бактериальной массы условно-патогенного организма (УПМ) и общей бактериальной массы (ОБМ) — Lg10УПМ – Lg10ОБМ). Оценку наличия Candida spp., Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp., Mycoplasma genitalium проводили только в абсолютных показателях.

При оценке состава условно-патогенной флоры учитывалось не только ее присутствие, но и количество по отношению к общей бактериальной массе (ОБМ). Также определялось количество лактобактерий по отношению к общей бактериальной массе.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием компьютерного программного пакета (Microsoft Office Excel 2007).

Результаты исследования

Пубертатный период, который продолжается от начала первой менструации и до 18 лет, делится на 2 фазы. Первая фаза пубертатного периода (с менархе до полных 15 лет) характеризуется периодическим и последовательным выделением эстрогенов. С 16 лет начинается вторая фаза пубертатного периода репродуктивной системы, которая характеризуется синхронизацией деятельности центрального и периферического звена репродуктивной системы. С началом менструальной функции, когда уровень половых гормонов резко увеличивается и происходит становление менструации, pH влагалища меняется, и среда приобретает высокую кислотность. Всех исследуемых мы разделили на группы с учетом фазы пубертатного периода.

В группе девочек с менархе до 15 лет мы обнаружили, что у 89% исследуемых Lg10 Lactobacillis spp. в среднем составил 7,17±0,22, у 41% Lg10 Enterobacteriaceae — 4,03±0,20, у 34% Lg10 Streptococcus spp. — 4,19±0,19, у 55% Lg10 Staphylococcus spp. — 4,04±0,17, у 86% Lg10 Gardnerella vaginalis — 5,59±0,24 , у 91% Lg10 Eubacterium spp. — 5,40±0,19, у 45% Lg 10 Sneathia — 5,13±0,37, у 75% Lg10 Megasphera spp.— 4,94±0,26, у 64% Lg10 Lachnobacterium spp. — 4,48±0,17, у 89% Lg10 Mobiluncus spp. — 4,46±0,15, у 84% Lg10 Peptostreptococcus spp. — 4,56±0,20, у 68% Lg 10 Atopobium vaginae — 3,22±0,40, у 5% Lg10 Mycoplasma hominis (1) – 2,05±0,75, Mycoplasma genitalium (2) не выявлены, у 34% Lg10 Ureaplasma — 4,82±0,25, у 18% Lg10 Candida spp. – 4,41±0,29. Общая бактериальная масса в среднем составила Lg10 ОБМ 7,60±0,12 (табл. 1).

Таблица 1

Состав влагалищного микроценоза у девочек от менархе до 15 лет

Микроорганизм

n

%

M±m

Общая бактериальная масса

44

100%

7,60±0,12

lactobacillus

39

89%

7,17±0,22

Enterobacteriac.

18

41%

4,03±0,20

Streptococ.

15

34%

4,19±0,19

staphyloccoc.

24

55%

4,04±0,17

gardnerella

38

86%

5,59±0,24

eubact.

40

91%

5,40±0,19

sntathia

20

45%

5,13±0,37

megasphera

33

75%

4,94±0,26

lachnobact

28

64%

4,48±0,17

mobiluncus

39

89%

4,46±0,15

peptstrept.

37

84%

4,56±0,20

atopobium

30

68%

3,22±0,40

micoplazma1

2

5%

2,05±0,75

micoplazma2

0

0%

ureaplazma

15

34%

4,82±0,25

candida

8

18%

4,41±0,29

 

В группе девочек 16–18 лет (табл. 2) мы обнаружили, что у 87% исследуемых Lg10 Lactobacillis spp. в среднем составил 7,30±0,15, у 32% Lg10 Enterobacteriaceae — 3,97±0,19, у 32% Lg10 Streptococcus spp. — 4,46±0,33, у 49% Lg10 Staphylococcus spp. — 3,98±0,16, у 86% Lg10 Gardnerella vaginalis — 5,38±0,19, у 93% Lg10 Eubacterium spp. — 5,10±0,16, у 44% Lg10 Sneathia — 4,94±0,29, у 75% Lg10 Megasphera spp. — 4,73±0,22, у 49% Lg10 Lachnobacterium spp. — 4,31±0,20, у 86% Lg10 Mobiluncus spp. — 4,17±0,10, у 65% Lg10 Peptostreptococcus spp. — 4,49±0,14, у 73% Lg10 Atopobium vaginae — 3,73±0,33, у 11% Lg10 Mycoplasma hominis (1) –4,50±0,40, у 3% Lg10 Mycoplasma genitalium (2) — 1,00±0,00 , у 54% Lg10 Ureaplasma — 4,31±0,20, у 28% Lg10 Candida spp. — 3,54±0,13. Общая бактериальная масса в среднем составила Lg10 ОБМ 7,61±0,10.

Таблица 2

Состав влагалищного микроценоза у девочек от 16 до 18 лет

Микроорганизм

n

%

M±m

Общая бактериальная масса

71

100%

7,61±0,10

lactobacillus

62

87%

7,30±0,15

Enterobacteriac.

23

32%

3,97±0,19

Streptococ.

23

32%

4,46±0,33

staphyloccoc.

35

49%

3,98±0,16

gardnerella

61

86%

5,38±0,19

eubact.

66

93%

5,10±0,16

sntathia

31

44%

4,94±0,29

megasphera

53

75%

4,73±0,22

lachnobact

35

49%

4,31±0,20

mobiluncus

61

86%

4,17±0,10

peptstrept.

46

65%

4,49±0,14

atopobium

52

73%

3,73±0,33

micoplazma1

8

11%

4,50±0,40

micoplazma2

2

3%

1,00±0,00

ureaplazma

38

54%

4,31±0,20

candida

20

28%

3,54±0,13

 

При сравнительном анализе групп менархе 15 лет и 16–18 лет достоверных изменений микробиоценоза не выявлено. Из тенденции следует отметить: количество Lg10 Lachnobacterium spp. уменьшается с 4,48±0,17 до 4,31±0,20 (р=0,055) в группе девочек 16–18 лет; количество Lg10 Peptostreptococcus spp. также уменьшается в этой группе с 4,56±0,20 до 4,49±0,14 (р=0,098).

Учитывая отсутствие достоверных изменений в составе влагалищного биотопа у девочек в группе от менархе до 15 лет и в группе девочек от 16 до 18 лет, мы изучили состав микроорганизмов во влагалище у девочек объединенной группы.

Состав влагалищного микроценоза у девочек от менархе до 18 лет представлен в табл. 3.

Общая бактериальная масса в среднем составила Lg10 ОБМ 7,61±0,08.

 

Таблица 3

Состав влагалищного микроценоза у девочек от менархе до 18 лет

Микроорганизм

n

%

M±m

Min

Max

Общая бактериальная масса

115

100,0%

7,61±0,08

5,2

9,2

lactobacillus

101

87,8%

7,25±0,12

3

9

Enterobacteriac.

41

35,7%

4,00±0,14

3

6,8

Streptococ.

38

33,0%

4,35±0,21

3

7,7

staphyloccoc.

59

51,3%

4,00±0,12

3

7,1

gardnerella

99

86,1%

5,46±0,15

3

8,6

eubact.

106

92,2%

5,22±0,12

3,1

8,2

sntathia

51

44,3%

5,01±0,23

3

8,3

megasphera

86

74,8%

4,81±0,17

3

7,9

lachnobact

63

54,8%

4,38±0,13

3

8,8

mobiluncus

100

87,0%

4,28±0,09

3

6,5

peptstrept.

83

72,2%

4,52±0,12

3

7,6

atopobium

82

71,3%

3,54±0,26

0,1

8

micoplazma1

10

8,7%

4,01±0,47

1,3

6

micoplazma2

2

1,7%

1,00±0,00

1

1

ureaplazma

53

46,1%

4,45±0,16

1,6

6,6

candida

28

24,3%

3,79±0,14

3

5,4

 

В группе девочек с менархе до 18 лет у 87,8% исследуемых Lg10 Lactobacillis spp. в среднем составил 7,25±0,12, у 86,1% Lg10 Gardnerella vaginalis — 5,46±0,15, у 92,2% Lg10 Eubacterium spp. — 5,22±0,12, у 35,7% Lg10 Enterobacteriaceae — 4,00±0,14, у 87% Lg10 Mobiluncus spp. — 4,28±0,09, у 74,8% Lg10 Megasphera spp. — 4,81±0,17, у 72,2% Lg10 Peptostreptococcus spp. — 4,52±0,12, у 71,3% Lg10 Atopobium vaginae — 3,54±0,26, у 54,8% Lg10 Lachnobacterium spp. — 4,38±0,13, 51,3% Lg10 Staphylococcus spp. — 4,00±0,12, у 46,1% Lg10 Ureaplasma — 4,45±0,16,у 44,3% Lg10 Sneathia — 5,01±0,23, у 33% Lg10 Streptococcus spp. — 4,35±0,21, у 24,3% Lg10 Candida spp. – 3,79±0,14, у 8,7% Lg10 Mycoplasma hominis (1) – 4,01±0,47, у 1,7% Mycoplasma genitalium (2) — 1,00±0,00.

Таким образом, сравнительный анализ микробного пейзажа влагалища в пубертатном периоде полового развития показал, что в составе микрофлоры в зависимости от фазы пубертата достоверных различий нет. Микрофлора влагалища в основном представлена Lactobacillis spp. и незначительной долей анаэробных микроорганизмов, лидирующее положение из которых занимает gardnerella.


Библиографическая ссылка

Уварова Е.В., Казакова А.В. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СОСТАВА МИКРОБИОТЫ ВЛАГАЛИЩА У ДЕВОЧЕК В ПУБЕРТАТНОМ ПЕРИОДЕ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=25873 (дата обращения: 30.09.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074