Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Подгорная А.В. 1 Махмутходжаев А.Ш. 1 Михеенко Г.А. 1 Кох Л.И. 1 Юрьев С.Ю. 1

---

1 ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет Минздрава России»

К числу основных причин рецидивирующего течения бактериального вагиноза относится недостаточная функция неспецифического иммунитета влагалища, в частности, нарушение продукции антимикробных пептидов. Цель настоящего исследования заключалась в изучении клинической эффективности профилактической терапии бактериального вагиноза в межрецидивный период у беременных женщин с использованием рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2b. В исследование вошли 77 беременных женщин с рецидивирующим бактериальным вагинозом в сроке гестации 14,8±2,3 нед., которые были случайным образом разделены на две группы сравнения. Основную группу составили 38 пациенток, которым с профилактической целью назначали рекомбинантный человеческий интерферона альфа-2b в дозе 250 000 ME в виде интравагинальных суппозиториев 2 раза в день двумя курсами продолжительностью по 10 дней. В контрольную группу вошли 39 пациенток, не получавшие профилактическую терапию. В работе изучали частоту рецидивов бактериального вагиноза, характер течения беременности, проводили лабораторные исследования для оценки уровня β-дефензина-2, ИЛ-6, ИЛ-10, ИНФ-γ в смывах из влагалища. В результате исследования было выявлено, что при использовании профилактической терапии рекомбинантным интерфероном альфа-2b у пациенток основной группы при сравнении с группой контроля статистически значимо снижалась частота рецидивов бактериального вагиноза, реже встречались такие осложнения беременности, как преждевременные роды и их угроза, дородовое излитие околоплодных вод при доношенной беременности, послеродовый эндометрит. Снижение частоты осложнений беременности и послеродового периода было ассоциировано с увеличением концентрации изучаемых цитокинов и β-дефензина-2 во влагалище. Таким образом, терапия рекомбинантным человеческим интерфероном альфа-2b беременных женщин с рецидивирующим бактериальным вагинозом оказывает влияние на неспецифический иммунитет влагалища, что способствует снижению частоты повторных эпизодов заболевания и акушерских осложнений.

Статья в формате PDF

180 KB

неспецифический иммунитет

цитокины

антимикробные пептиды

беременность

бактериальный вагиноз

1. Бактериальная пленка при бактериальном вагинозе / Е.С. Березовская, И.О. Макаров, М.А. Гомберг, Е.И. Боровкова, Е.А. Чулкова, Л.А. Аракелян // Акушерство, гинекология, репродуктология. – 2013. – № 2. – С. 34-36.

2. Решетько О.В. Бактериальный вагиноз при беременности: современное состояние проблемы и значение фармакотерапии / О.В. Решетько, К.А. Луцевич // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия: Научный журнал. – 2007. – Т. 9, No. 4. – С. 337-351.

3. Современная концепция об антимикробных пептидах как молекулярных факторах иммунитета / В.Н. Кокряков, Г.М. Алешина, О.В. Шамова, Д.С. Орлов, Ю.В. Андреева // Медицинский академический журнал. – 2010. – Т. 10, № 4. – С. 149-160.

4. Шамова О.В. Молекулярно-клеточные основы реализации биологической активности антимикробных пептидов лейкоцитов [Текст]: дис. ... д-ра биол. наук: 14.03.03; 03.01.04 / Шамова Ольга Валерьевна; ФГБНУ "ИЭМ". – Санкт-Петербург, 2013. – 46 с.

5. Association between bacterial vaginosis and preterm delivery / T.R. Das, S. Jahan, S.R. Begum, M.F. Akhtar // Mymensingh Med. – 2011. – Vol. 20. – P. 115–120.

6. Bals Epithelial antimicrobial peptides in host defense against infection // Respir Res. 2000, 1:141–150.

7. Correlation of bacterial vaginosis with preterm labour: a case control study / W. Nigeen, A.S. Bhat, K. Gulzar, S. Taing // Int J ReprodContraceptObstet Gynecol. – 2015. – Vol. 4. – P. 1868-74.

8. Doerflinger S.Y. Bacteria in the vaginal microbiome alter the innate immune response and barrier properties of the human vaginal epithelia in a species-specific manner / S.Y. Doerflinger, A.L. Throop, M.M. Herbst-Kralovetz // J Infect Dis. – 2014. –Vol. 209(12). – P. 1989-99.

9. IL-10 inhibits while calcitriol reestablishes placental antimicrobial peptides gene expression / A. Olmos-Ortiz, N. Noyola-Martínez, D. Barrera, V. Zaga-Clavellina, E. Avila, A. Halhali, B. Biruete, F. Larrea, L. Díaz // J Steroid BiochemMol Biol. – 2015. – Vol. 148. – P. 187-93.

10. Persistent microbial dysbiosis in preterm premature rupture of membranes from onset until delivery /E.A. Baldwin, M. Walther-Antonio, A.M. MacLean, D.M. Gohl, K.B. Beckman, J. Chen et al. // Peer J. – 2015. – Vol. 3. – P. e1398.

11. Role of lactobacillus species in the intermediate vaginal flora in early pregnancy: a retrospective cohort study /A. Farr, H. Kiss, M. Hagmann, S. Machal, I. Holzer, V. Kueronya et al. // PLoS One. – 2015. – Vol. 10(12). – P. e0144181.

12. Roles of antimicrobial peptides such as defensins in innate and adaptive immunity / J. Oppenheim, A. Biragyn, L. Kwak, D. Yang // Annals of the Rheumatic Diseases. – 2003. – Vol. 62 (Suppl 2). – P. ii17-21.

13. Sialidase activity in aerobic vaginitis is equal to levels during bacterial vaginosis / C. Marconi, G.G. Donders, G. Bellen, D.R. Brown, C.M. Parada, M.G. Silva // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. – 2013. – Vol. 167. – P. 205–209.

14. Yarbrough V.L. Antimicrobial peptides in the female reproductive tract: a critical component of the mucosal immune barrier with physiological and clinical implications / V.L. Yarbrough, S. Winkle, M.M. Herbst-Kralovetz // Hum Reprod Update. – 2015. – Vol. 21(3). – P. 353-77.

Бактериальный вагиноз (БВ) у беременных женщин ассоциируется с увеличением частоты акушерских осложнений, среди которых преждевременные роды, преждевременное излитие околоплодных вод, внутриутробное инфицирование, послеродовые гнойно-септические заболевания [5, 7, 10, 11]. Особую проблему представляет рецидивирующий БВ, возникновение которого обусловлено нарушением неспецифического иммунитета влагалища, в частности снижением продукции антимикробных пептидов (АМП) и изменением выработки цитокинов [2,8, 13, 14]. АМП оказывают не только прямое микробицидное действие, но и опосредованно через стимуляцию синтеза различных цитокинов проявляют иммуномодулирующее действие [3, 4]. С другой стороны, цитокины, являясь главными регуляторными молекулами в работе иммунитета, способны модифицировать экспрессию АМП [6, 9, 12]. Поэтому нарушение продукции и механизмов взаимодействия отдельных звеньев неспецифического иммунитета, может изменять нормальное функционирование последнего.

Представляется актуальным разработка оптимальной тактики ведения беременных женщин с бактериальным вагинозом, основанное на профилактике его рецидивов, возникающих у 30 % женщин в течение трех месяцев после лечения [1]. Рекомбинантный человеческий интерферон альфа-2b оказывает влияние на неспецифический иммунитет путем увеличения выработки цитокинов, которые, в том числе, способны повышать уровень антимикробных пептидов.

Можно предположить, что назначение интерферона альфа-2b в виде вагинальных суппозиториев (Генферон Лайт) беременным женщинам с бактериальным вагинозом в межрецидивный период, способно оказывать коррегирующее влияние на важные звенья неспецифического иммунитета влагалища, тем самым способствовать предупреждению рецидивов заболевания, осложнений беременности, улучшению перинатальных исходов.

Цель исследования заключалась в изучении клинической эффективности профилактической терапии бактериального вагиноза у беременных женщин с использованием рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2b.

Материал и методы исследования

В исследование были включены 77 беременных женщин с рецидивирующим бактериальным вагинозом. Диагноз рецидивирующего БВ устанавливали при наличии не менее двух подтвержденных эпизодов заболевания за истекший период беременности. Пациентки включались в исследование в период ремиссии, которую устанавливали при отсутствии клинических и лабораторных признаков БВ, к которым относились обильные выделения с неприятным запахом из половых путей, положительный аминный тест, наличие ключевых клеток и увеличение pH содержимого влагалища более 4,4. В исследование не включались беременные женщины с наличием инфекционно-воспалительных заболеваний нижнего отдела репродуктивного тракта другой этиологии, в числе которых заболевания передающиеся половым путем, кандидоз, аэробные вагиниты.

Все женщины были случайным образом распределены на 2 группы наблюдения. Пациентки основной группы (n=38) получали препарат рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2b (Генферон Лайт) по 1 суппозиторию (250 000 ME) интравагинально 2 раза в день в течение 10 дней. Курс терапии повторяли в том же режиме в сроке гестации 30 недель. Контрольную группу составили 39 пациенток, которые проходили стандартные процедуры диспансерного наблюдения без профилактического назначения интерферона альфа-2b. Через 24 дня от начала первого профилактического курса терапии у пациенток основной группы проводили гинекологическое обследование, получали смывы со слизистой влагалища для анализа содержания интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-10 (ИЛ-10), интерферона-γ (ИНФ-γ), β-дефензина-2 (HBD-2). Пациентки контрольной группы проходили аналогичное обследование в те же сроки.

Определение уровня HBD-2 и цитокинов проводили с помощью иммуноферментного анализа наборами ELISA и BenderMedSystems (БиоХимМак) по рекомендуемой производителями методике. В обеих группах проводилась ретроспективная оценка течения беременности, родов и послеродового периода на основе анализа медицинской документации.

Статистическую обработку данных осуществляли с помощью лицензионной программы Statistica 8,0 (StatSoft). Использовались методы описательной статистики с вычислением центральных тенденций и их размаха для количественных переменных, процентной доли признака для качественных данных. Результаты выражали в виде медианы и интерквартильного интервала, среднего арифметического, его стандартного отклонения и в процентах. Для сравнения исследуемых групп по количественным переменным применяли непараметрический критерий Манна – Уитни, по качественным признакам группы сопоставляли с использованием критерия χ2 Пирсона. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

Результаты и их обсуждение

На момент включения пациенток в исследование средний срок гестации составлял 14,8±2,3 нед (от 13 до 20 нед). Возраст беременных женщин колебался от 20 до 37 лет, составляя в среднем 26±5 года. Пациентки основной и контрольной группы были сопоставимы по возрастным характеристикам, сроку гестации и паритету. Профилактическое лечение с использованием препарата рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2b в основной группе пациенток ни в одном случае не вызвало значимых нежелательных эффектов, требующих отмены препарата.

Через 24 дня после включения в исследование пациенток обеих группах было выполнено клиническое и лабораторное обследование, при котором оценивали наличие признаков БВ, используя критерии Амселя. На этом этапе ни у одной из пациенток не было выявлено достаточного количества критериев для постановки диагноза БВ. В то же время у многих женщин присутствовали изолированные лабораторные проявления (табл. 1).

Таблица 1

Частота отдельных лабораторных критериев Амселя у пациенток исследуемых групп

Как видно из табл. 1, у большинства пациенток (62 человек – 80,5 %) имело место смещение pHсреды влагалища в сторону щелочной реакции. У трети женщин наблюдалась положительная проба с гидроксидом калия. При этом ключевые клетки были обнаружены в четверти случаев (19 человек – 24,7 %). Сравнение между основной и контрольной группами по частоте встречаемости отдельных лабораторных проявлений БВ статистически значимых различий не выявило (табл. 1). Полученные результаты свидетельствуют о сохраняющемся потенциале к рецидивированию заболевания, что, возможно, связано с особенностями биоценоза влагалища у данной популяции беременных женщин, в частности, снижением числа лактобактерий с повышением относительного содержания анаэробных микроорганизмов.

Анализ содержания во влагалище изучаемого антимикробного пептида и цитокинов выявил статистически значимое преобладание уровней β-дефензина-2, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИНФ-γ у пациенток, получавших профилактическую терапию рекомбинантным человеческим интерфероном альфа-2b (табл. 2).

Таблица 2

СодержаниеHBD-2, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИНФ-γ во влагалище у беременных женщин исследуемых групп, Me [25 %-75 %]

Примечание: Me – медиана, 25 % – нижний квартиль, 75 % – верхний квартиль.

У пациенток основной группы β-дефензин-2 обнаружили во влагалище в 76,3 % случаев, в то время как у пациенток контрольной группы данный антимикробный пептид присутствовал только в 53,8 % смывов (р=0,039). Частота обнаружения во влагалищном содержимом изученных цитокинов основной и контрольной групп статистически значимо не различалась и составила 49,35 %, 54,55 %, 57,14 % соответственно для ИЛ-6, ИЛ-10, ИНФ-γ. Обращает на себя внимание значительное увеличение противовоспалительного цитокина ИЛ-10, в отличие от провоспалительных ИЛ-6 и ИНФ-γ. Возможно, степень повышения уровней цитокинов определяет направление реализации иммунного ответа.

Таким образом, профилактическое назначение препаратов рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2b беременным пациенткам с рецидивирующим бактериальным вагинозом приводит к росту содержания во влагалище β-дефензина-2, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИНФ-γ, что может свидетельствовать о влиянии препарата на ключевые звенья неспецифического иммунитета влагалища.

Эффективность профилактической терапии рецидивирующего БВ оценивалась на основании изучения частоты рецидивов заболевания, осложнений беременности, родов и послеродового периода. Как показал проведенный анализ, рецидивы БВ наблюдались в обеих группах женщин, но при этом частота рецидивов была статистически значима меньше в группе женщин, получавших Генферон Лайт (10,5 % и 30,8 % пациенток в основной и контрольной группах соответственно; p=0,029). При этом в контрольной группе женщин было зарегистрировано 15 эпизодов заболевания, у 3 пациенток имели место 2 рецидива БВ до срока родов. Анализ частоты обнаружения и концентрации антимикробного пептида и цитокинов показал значительное снижение показателей у пациенток с последующими рецидивами. Так HBD-2 обнаруживался только у 1 женщины в основной и у 6 в контрольной группах, что в целом составило 43,75 %. Частота встречаемости цитокинов также была значимо меньше у беременных женщин с повторными эпизодами после профилактического лечения (31,25 % для ИЛ-6, ИЛ-10 и 37,5 % для ИНФ-γ). Обращает на себя внимание низкие значения всех показателей у данных пациенток. В большинстве случаев, как отдельно для основной и контрольной, так и в целом для обеих групп, медиана и ее нижний квартиль представляли нулевое значение с невысоким показателем верхнего квартиля (табл. 3).

Таблица 3

Содержание HBD-2, ИЛ-6, ИЛ-10 и ИНФ-γ во влагалище у беременных женщин исследуемых групп с рецидивами БВ после профилактического лечения, Me [25 %-75 %]

На основании полученных данных можно сделать заключение, что профилактическое интравагинальное назначение интерферона альфа-2b по предложенной схеме позволяет уменьшить частоту рецидивирования БВ у беременных женщин, что может иметь значение для течения беременности.

Сравнительный анализ характера течения беременности и послеродового периода пациенток исследуемых групп представлен в табл. 4.

Таблица 4

Течение беременности и послеродового периода у беременных женщин с рецидивирующим бактериальным вагинозом

Как видно из табл. 4, у пациенток, не получавших лечение с использованием интерферона альфа-2b, статистически значимо чаще наблюдались такие осложнения, как преждевременные роды и их угроза, преждевременное излитие околоплодных вод при доношенной беременности, послеродовый эндометрит, что позволяет сделать заключение об эффективности интерферонотерапии в профилактике акушерских осложнений у женщин с рецидивирующим бактериальном вагинозом. При анализе встречаемости осложнений среди женщин с повторными эпизодами заболевания во втором и третьем триместрах беременности выявлена ассоциация между данными характеристиками. Практически у всех женщин с рецидивами (93,75 %) встречалось от двух до трех осложнений периода гестации или после родов. У 12 пациенток зарегистрирована угроза преждевременных родов, которая реализовалась в 10 случаях, и 1 дополнительный случай без предварительной угрозы. Диагноз преждевременного разрыва плодных оболочек при доношенной беременности и послеродового эндометрита были поставлены у 4 женщин.

Заключение

Таким образом, применение препарата рекомбинантного человеческого интерферона альфа-2b по рекомендуемой нами схеме у беременных женщин с рецидивирующим бактериальным вагинозом оказывает влияние на неспецифический иммунитет влагалища и способствует снижению частоты рецидивов заболевания и акушерских осложнений.  

Библиографическая ссылка