Современная клиническая классификация кровопотери, используемая в практике, основана на зависимости от объема циркулирующей крови (ОЦК): малая кровопотеря — 5–10%, средняя — от 10% до 30%, большая — от 30% до 40%, массивная – более 40%, смертельная – более 70% ОЦК. Различают несколько стадий острой кровопотери: сосудисто-рефлекторная — первые 24 ч; гидремическая — вторые сутки; костномозговая — с 5-х суток постгеморрагического периода. Следствием острой кровопотери является гипоксия смешанного характера, сочетающая наличие анемии, гиповолемию, нарушение циркуляции и формирование бионергетической гипоксии. При кровопотере особенности метаболизма липидов не выдвигаются на первый план, хотя их роль в механизмах адаптации, компенсации и повреждения чрезвычайно велика. Идея о том, что клетки в стрессовой ситуации, такой как кислородное голодание, способны временно реагировать анаболическими процессами, в частности усилением биосинтеза липидов, является новой. По-видимому, это способ сохранения питательных веществ в организме для последующего использования в качестве источника энергии. Показано, что гипоксия стимулирует хранение и ингибирует катаболизм липидов в культивируемых кардиомиоцитах и макрофагах [3]. Одним из основных изменений в ответ на гипоксию является HIF – опосредованное перепрограммирование клеточного метаболизма. Индуцированная активация передачи сигналов HIF в гепатоцитах приводит к изменению липидного обмена и увеличивает в них накопление липидов [5, 7]. К сожалению, имеется малое количество работ по влиянию степени и срока кровопотери на изменения липидного обмена и их взаимодействие в динамике патологического процесса.
Цель исследования
Определить влияние степени и срока кровопотери на уровень триглицеридов, фосфолипидов, общего холестерина, холестерина в липопротеинах.
Материалы и методы
Исследование проведено на 98 лабораторных крысах массой 150–250 г. Острую кровопотерю осуществляли путем одномоментного забора крови по методике Луценко (1961) в объеме 0,5% от массы тела (10% ОЦК); 1% от массы тела (20% ОЦК); 2% от массы тела (40% ОЦК). Согласно стадийности постгеморрагического периода были определены сроки исследования — 24-й, 48-й, 72-й и 120-й час. В крови определяли: триацилглицериды (энзиматический колориметрический метод, наборы реагентов Ольвекс-диагностикум, Россия), общий холестерин (энзиматический колориметрический метод, наборы реагентов фирмы Ольвекс-диагностикум, Россия); холестерин в липопротеидах высокой плотности (энзиматический колориметрический метод, наборы реагентов Ольвекс-диагностикум, Россия); фосфолипиды (прямой ферментативный колорометрический метод, наборы реагентов фирмы Sentinel, Италия); холестерин в липопротеидах очень низкой плотности и липопротеидах низкой плотности рассчитывали по формуле Friedewald W.T. Расчет индекса атерогенности (ИА) проводили по формуле А.И. Климова.
Математические расчеты выполнены с помощью программного обеспечения StatSoft Inc. – Statistica for Windows, версия 8.0 и «мастер диаграмм» Microsoft Excel 2007, пакет приложений AgCStat [1]. Для определения достоверности различий средних величин применяли критерий непараметрической статистики Манна—Уитни (U). Достоверность рассчитывалась с поправкой Бонферрони.
Результаты исследования и их обсуждение
Следует отметить неоднозначное изменение уровня триглицеридов (ТГ) в крови относительно контроля в постгеморрагический период. Снижение ТГ отмечается лишь при 0,5%-ной кровопотере на 48-й час; при 1%-ной (24-й, 72-й час) и 2%-ной (72-й час) кровопотере их содержание в крови возрастает. Сравнительный анализ динамики ТГ в сыворотке крови при кровопотерях различной степени тяжести показал, что направленность изменений при 0,5%-ной и 1%-ной кровопотерях в первые 24–48 ч одинакова, но отлична при 2%-ной кровопотере. После 0,5%-ной и 1%-ной кровопотери на 48-й час ТГ достоверно снижаются относительно 24-го часа, а при 2%-ной кровопотере имеется тенденция к их повышению. Самый низкий уровень ТГ отмечен на 48-й час постгеморрагического периода при 0,5%-ной кровопотере, что может быть связано с усилением их использования в стрессовой ситуации на фоне слабо представленного гипоксического компонента. При 2%-ной кровопотере на 48-й час отмечаются самый высокий уровень ТГ относительно иных видов кровопотерь, возможно, из-за ограничения их использования в условиях выраженной гипоксии, так как преимущественным источником для энергообеспечения клеток становится глюкоза за счет активации ключевого фермента гликолиза – фосфофруктокиназы (ФФК), и, соответственно, возрастание пропускной способности реакции анаэробного гликолиза. После 48 ч кровопотери динамика изменений ТГ примерно одинакова (рис. 1). Возрастание ТГ в крови на 72-й ч независимо от объема потерянной крови может быть следствием нарастания их синтеза. Ряд авторов показал наличие связи между HIF-1α, Липин-1 и особенностью метаболического ответа клеток на гипоксию, которая приводит к возрастанию синтеза триглицеридов и формированию липидных капель в клетках [6].
Рис. 1. Триглицериды при 0,5%-ной, 1%-ной и 2%-ной кровопотере
* — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 1%-ной кровопотере; ^ — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; ¦ — достоверность группы 1%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; достоверность относительно контроля указана в тексте
В клинической практике при коррекции постгеморрагических ситуаций, в том числе и метаболических, следует учитывать не только степень, но и срок кровопотери, а также их сочетанное действие. Дисперсионный анализ по оценке силы и достоверности влияния степени кровопотери, срока постгеморрагического периода на уровень ТГ показал, что наибольшее влияние оказывает сумма организованных факторов (степень кровопотери, срок кровопотери и их взаимодействие), в среднем — 32%; из них наибольшая сила влияния принадлежит сочетанному действию (взаимодействию) массы и срока кровопотери — 22%; влияние срока постгеморрагического периода — 8%.
Характер изменений фосфолипидов (ФЛ) зависим от степени кровопотери. При кровопотере в объеме 0,5% от массы тела ФЛ достоверно снижены на 24-й, 72-й и 120-й часы относительно контрольных значений; наоборот, при других степенях кровопотери ФЛ постепенно возрастают и приобретают достоверные отличия от контроля: 1% на 72-й час; 2% на 48-й, 72-й час. Наиболее яркие различия в содержании ФЛ и характере их изменений представлены на 72-й ч – при 0,5%-ной кровопотере зарегистрированы самые низкие значения ФЛ относительно контроля и иных видов кровопотерь, при 1%-ной и 2%-ной – самые высокие значения как относительно 0,5%-ной кровопотери, так и относительно контроля (рис. 2).
Рис. 2. Изменение уровня фосфолипидов при 0,5%, 1% и 2% кровопотере
* — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 1%-ной кровопотере; ^ — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; достоверность относительно контроля указана в тексте
С одной стороны, динамика изменения ФЛ в крови может быть связана с интенсивностью свободнорадикальных процессов в организме, с другой — с адекватной реакцией увеличения их синтеза, направленной на восстановление утраченных клеток крови. Дисперсионный анализ показал, что наибольшее влияние оказывает сумма организованных факторов – 59%; из них основным фактором является степень кровопотери и составляет в среднем 44%; на значение срока кровопотери приходится 5,2% , на сочетание их действия — 9%.
Степень кровопотери влияет на количественные показатели общего холестерина (ОХ) в постгеморрагический период относительно контроля: при 0,5% ОХ достоверно ниже лишь на 72-й час; при 1%-ной кровопотере ОХ достоверно выше на 24-й час и далее достоверно ниже на 72–12-й час; при 2%-ной кровопотере отмечено его достоверное повышение на 24-й и 120-й час. Следует отметить, что уровень ОХ на 24-й час при 0,5%-ной кровопотере ниже, чем при 1%-ной и 2%-ной (рис. 3). Различия в динамике количественных изменений ОХ в зависимости от массы потерянной крови наиболее ярко проявляются на 72–120-й час: при 0,5%-ной и 1%-ной кровопотере уровень ОХ достигает или приближается к контрольным значениям, а при 2%-ной кровопотере он продолжает возрастать относительно контроля и иных степеней кровопотери. Снижение общего холестерина в сыворотке крови на фоне гипоксии отмечено у пациентов с гиперхолестеринемией, подвергавшихся периодической гипоксии в барокамере [2]. В работах по влиянию гипоксии на биосинтез холестерина в клеточных культурах гепатоцитов доказано, что гипоксия подавляет экспрессию HMG-CoA-редуктазы, следствием чего является ограничение биосинтеза холестерина, и это рассматривается как защитный механизм [8]. Но в то же время ряд авторов отмечает, что гипоксия способствует накоплению холестерина главным образом в качестве сложного эфира, в гладкомышечных клетках, культивированных в гиперлепидэмической сыворотке [5].
Рис. 3. Общий холестерин при 0,5%-ной, 1%-ной и 2%-ной кровопотере
* — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 1%-ной кровопотере; ^ — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; ¦ — достоверность группы 1%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; достоверность относительно контроля указана в тексте
Дисперсионный анализ показал, что на динамику и количественное представительство ОХ в крови наибольшее влияние оказала сумма организованных факторов и составляет 55,4%, влияние срока кровопотери — 16%, степени кровопотери — 16%, их сочетанное действие — 24%.
Динамика коэффициента атерогенности (КА) не соответствует динамике изменений ОХ в крови. Наиболее значимо КА изменялся относительно контроля при 0,5%-ной и 1%-ной кровопотере: достоверно увеличивался на 24-й час, снижался на 48-й час, вновь возрастал на 72-й час и оставался выше контрольных значений на 120-й час при 0,5%-ной кровопотере. При 2%-ной кровопотере КА достоверно снижался на 48-й час и возрастал к 120-му часу. Отмечается однонаправленное изменение КА при 0,5%-ной и 1%-ной кровопотере, он выше относительно контроля и 2%-ной кровопотери на 48–72-й час. При 2%-ной кровопотере на фоне роста ОХ коэффициент атерогенности возрастает лишь на 120-й ч, в остальные сроки исследования либо сопоставим, либо ниже контрольных значений (рис. 4).
Рис. 4. Динамика коэффициента атерогенности при 0,5%-ной; 1%-ной и 2%-ной кровопотере
^ — достоверность группы 0,5%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; ¦ — достоверность группы 1%-ной кровопотери к 2%-ной кровопотере; достоверность относительно контроля указана в тексте
Изменения КА обусловлены перераспределением холестерина в липопротеинах (рис. 5). При 0,5%-ной кровопотере рост КА на 24-й, 72-й и 120-й час обусловлен достоверным снижением Х-ЛПВП, при 1%-ной кровопотере КА на 24-й ч и 72-й ч возрастает главным образом за счет достоверного перераспределения в сторону атерогенных липопротеинов. При 2%-ной кровопотере КА до 120-го часа снижен или нормален за счет достоверного возрастания Х-ЛПВП, что может быть расценено как компенсаторная реакция в ответ на увеличение ОХ. На 120-й час коэффициент возрастает за счет увеличения Х-ЛПОНП и Х-ЛПНП при снижении Х-ЛПВП.
Заключение
Итак, при кровопотере любой степени тяжести в постгеморрагическом периоде развивается дислипидемия. Любая кровопотеря обладает проатерогенными свойствами. Наибольшее влияние на изменение липидного профиля крови оказывает сумма организованных факторов (таких как степень кровопотери, срок кровопотери и их сочетанное действие): для фосфолипидов — 59%, для общего холестерина — 55%, для триглицеридов — 32%. Из них на фосфолипиды в большей мере влияет степень кровопотери и составляет 44%, на общий холестерин в равной мере влияют степень и срок кровопотери – по 16%, на триглицериды влияет сочетание степени и срока кровопотери – 22%.
Библиографическая ссылка
Нестеров М.И., Кривохижина Л.В., Ермолаева Е.Н., Кантюков С.А. ВЛИЯНИЕ СТЕПЕНИ И СРОКА КРОВОПОТЕРИ НА УРОВЕНЬ ТРИГЛИЦЕРИДОВ, ФОСФОЛИПИДОВ, ОБЩЕГО ХОЛЕСТЕРИНА, ХОЛЕСТЕРИНА В ЛИПОПРОТЕИНАХ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 6. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=25632 (дата обращения: 05.12.2024).