Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Гребенникова С.В. 1 Оксенюк О.С. 1 Смирнова О.Б. 1 Калмыкова Ю.А. 1

---

1 ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской федерации

У 40 белых крыс вызывали дерматит простой раздражительный контактный и лечили разные группы животных инъекциями внутрь брюшной полости «Омегавена», содержащего полиненасыщенные жирные кислоты, кремом «Витамин Ф99» жирным и мазью «Радевит». Оценивали в крови содержание малонового диальдегида, активность супероксиддисмутазы и каталазы. Благоприятной оказалась динамика компонентов перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы после лечения сочетанием инъекций «Омегавена» и наружно – кремом «Витамин Ф99» жирный, содержащими омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты. Показано преимущество влияния на перекисное окисление липидов крови при экспериментальном дерматите простом раздражительном контактном средств, содержащих омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты, над таковыми противовоспалительного действия. Авторы рекомендуют применение препаратов системного и местного лечения, содержащих омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты, а также антиоксиданты при воспалительных заболеваниях кожи.

Статья в формате PDF

195 KB

дерматит простой раздражительный контактный

свободнорадикальное окисление липидов

полиненасыщенные жирные кислоты

1. Касихина Е.И. Цитопротективная терапия в комплексном лечении хронических воспалительных заболеваний кожи // РМЖ дерматол. - 2015. - № 19. - С. 1146-1149.

2. Конь И.Я., Шилина Н.М., Вольфсон С.Б. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты в профилактике и лечении болезней детей и взрослых // Лечащий врач. - 2006. - № 4. - С. 55-59.

3. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е.. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. – 1988. - № 1. – С. 16-18.

4. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях / под ред. Каркищенко Н.Н., Грачева С.В. – М., 2010. – 358 с.

5. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. – М., 1977. – С. 66-68.

6. Шепелев А.П., Шовкун Л.А. Перекисное окисление липидов и система антиоксидантов в норме и при патологии. - Ростов н/Д, 2012. - 363 с.

7. Amado A., Taylor J.S., Sood A. Ирритантный контактный дерматит // Дерматология Фицпатрика в клинической практике. – М., 2012. – Т. 1. – С. 430-437.

8. Mistra H.P., Fridovich I. The role of superoxide anion in the autooxidation of epinephrine and simpl assay for superoxide dismutase // J. Biol. Chem. - 1972. - Vol. 247. - № 10. – Р. 3170-3175.

9. Ratnam D.V., Ankola D.D., Bhardwa V. Role of antioxidants in prophylaxis and therapy: A pharmaceutical perspective // J. Control. Release. - 2006. - Vol. 113. - P. 189-207.

Совершенствование лечения заболеваний кожи, в патогенезе которых существенна роль воспаления, является актуальной задачей. В настоящее время внимание исследователей этой проблемы привлекают к себе средства, содержащие омега-3 и -6 полиненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК). Влияние ПНЖК на воспалительные очаги – восстановление мембран, антиоксидантное, ингибиция перекисного окисления липидов (ПОЛ) [1].      Проявление противовоспалительного эффекта ПНЖК омега-3 – путем снижения продукции провоспалительных эйкозаноидов (простагландина Е3, лейкотриена В5), уменьшения интерлейкина 1 и фактора некроза опухоли [2]. Между ПНЖК и свободнорадикальным окислением липидов (СРОЛ) установлена тесная связь. Через стадию перекисных производных ПНЖК происходит биосинтез простагландинов и лейкотриенов [6].      Недостаточное разрушение реактивных форм кислорода либо их перепроизводство приводят к повышению уровня и развитию оксидативного стресса [9]. При этом мембранные фосфолипиды в первую очередь подвергаются деструкции [6]. Антиоксидантная защита в коже включает каталазы (КАТ), супероксиддисмутазы (СОД) и др. [9].

Материалы и методы

У 40 белых крыс вызывали «выраженную ожоговую травму» в передней области спины: металлическую пластину площадью 3,8 см квадратных и толщиной в 1,5 мм, использованную для ожога, нагревали на электрической плитке с закрытой спиралью при начальных проявлениях покраснения покрывающей спираль металлической части и накладывали ее на кожу белой крысы в течение 3 сек. Вызывая так у белых крыс дерматит простой раздражительный контактный (ДПРК), мы выделили 4 группы животных, из которых 1-я группа – контрольная (без ДПРК). Экспериментальное исследование выполнено с соблюдением Международных принципов Европейской конвенции о защите позвоночных животных с учетом норм и правил биомедицинской этики (с разрешения этического комитета РостГМУ – протокол № 16/13 от 14.11.2013 г.) [4]. Всем крысам с ДПРК 1 раз в 3 дня для профилактики пиодермии на очаги наносили «Эритромициновую мазь». Вторая группа – сравнения с ДПРК без лечения в течение 4 дней; животных 3-й группы лечили мазью «Радевит» (ежедневные смазывания очага поражения в течение 11 дней); крысы 4-й группы получали ежедневно инъекции внутрь брюшной полости по 1,0 мл «Омегавена», а также смазывание очагов поражения – крем «Витамин Ф 99» жирный. Кровь получали от животных 3-4 групп после 11 дней лечения, и к этому времени проявления ДПРК уже становились существенно слабее [1; 7].

Мазь «Радевит» рекомендована для лечения дерматитов контактных, ожогов, проявляет противовоспалительное действие. В группе 4-й применяли инъекции «Омегавена», имеющего в составе омега-3 и -6 ПНЖК, а наружно – крем «Витамин Ф 99» жирный, действующим веществом в котором является витамин F – источник незаменимых ПНЖК, эфиры омега-3 жирных кислот и др.

Из компонентов ПОЛ мы оценивали содержание малонового диальдегида (МДА) [5], антиоксидантную систему (АОС) характеризовала активность супероксиддисмутазы [8] и каталазы [3] в сыворотке крови.

Результаты и обсуждение

Мы провели анализ в группе экспериментальных животных с ДПРК, развившемся после «выраженной ожоговой травмы». Из таблицы видно, что в 1-й (контрольной) группе белых крыс без ДПРК показатели в сыворотке крови составили: МДА – 6,23 ±0,44 нмоль/мл, СОД – 23,83±1,57 усл. ед./мл и КАТ – 44,31±3,47 ЕД/мл х мин.      Во 2-й группе (сравнения) - кровь получали от животных с ДПРК после 4 дней от выраженной ожоговой травмы без какого-то лечения. При этом воспалительная реакция в очагах поражения была значительной. Содержание МДА оказалось равным 7,06±0,47 нмоль/мл, активность СОД – 11,81±1,09 усл. ед./мл, КАТ – 33,55 ±1,45 ЕД/мл х мин. Сопоставление этих показателей с таковыми «здоровых» крыс контрольной группы выявило существенное снижение показателей антиоксидантной защиты – СОД в 2 раза (Р < 0,001) и КАТ в 1,3 раза (Р<0,05). При этом содержание МДА проявило некоторую тенденцию к росту (в 1,1 раза). Тем самым определяется декомпенсация системы СРОЛ (оксидативный стресс) – вместо адекватного ситуации повышения активности компонентов антиоксидантной системы наблюдается снижение их активности. Полученные при исследовании показатели представлены в таблице.                                                                                                            

Компоненты свободнорадикального окисления липидов крови белых крыс при различных методах лечения (выраженная ожоговая травма)

Примечание. Различия существенные: с контрольной группой - *, с группой сравнения - без лечения 4 дня после выраженной ожоговой травмы – 2*, с группой 3 таблицы – 3*.           

Следующие 2 группы животных получали лечение различными методами. Белые крысы 3-й группы (по существу, также 2-я группа сравнения) получали ежедневные смазывания очага ДПРК официально рекомендуемой для лечения контактных дерматитов и ожогов мазью «Радевит». После 11 дней лечения ДПРК содержание в сыворотке крови МДА оказалось повышенным – 8,80±0,39 нмоль/мл (Р < 0,001) в 1,4 раза. Рост по сравнению с группой 2 (Р < 0,05) отмечен в 1,3 раза. В то же время активность СОД возрастала по сравнению с показателем группы 2 – в 2,7 раза (Р < 0,001) до 32,30 ±5,80 усл. ед./мл, а в сопоставлении с контрольной группой отмечена тенденция к превалированию в 1,4 раза. Аналогичная СОД динамика установлена в этой группе и по активности каталазы. Активность этого важнейшего фермента антиоксидантной защиты – 38,60±0,91 ЕД/мл х мин превышала показатель 2-й группы (сравнения, 4 дня после ожоговой травмы без лечения) в 1,2 раза (Р < 0,05). Сопоставление с показателем контрольной 1-й группы выявило в 3-й группе лишь незначительную (в 1,2 раза) тенденцию к снижению.

Таким образом к 11-му дню лечения мазью «Радевит» ДПРК показатели СРОЛ крови выявили повышенный уровень МДА (от показателя контрольной группы в 1,4 раза и от показателя 2-й группы после 4 суток ожоговой травмы без лечения – в 1,3 раза). Вместе с тем отмечено компенсаторное нарастание по сравнению со 2-й группой активности СОД (нарастание в 2,7 раза) и КАТ (соответственно в 1,2 раза).

Экспериментальные животные 4-й группы получали комплексное лечение ДПРК сочетанием ежедневных инъекций в брюшную полость «Омегавена» (по 1,0 мл), содержащего омега-3 и омега-6 ПНЖК, с ежедневными смазываниями очагов ДПРК кремом «Витамин Ф 99» жирный, в составе которого имеется витамин F – источник незаменимых ПНЖК и эфиры омега-3 жирных кислот.

После 11 дней лечения показатель МДА крови 7,88±0,65 нмоль/мл не отличается существенно от показателей 1-й и 2-й групп, а лишь только проявил некоторую тенденцию к превалированию над показателем 1-й группы (в 1,3 раза) и 2-й группы (тенденция в 1,1 раза).

Если в 3-й группе животных, получавших наружно мазь «Радевит», не содержащую компонентов омега-3 и омега-6 ПНЖК, показатель МДА после 11 дней лечения превышал таковой в группах контрольной и сравнения (1-я и 2-я), то в 4-й группе показатель МДА после 11-дневного комплексного лечения инъекциями «Омегавена» и наружным применением крема «Витамин Ф 99» жирный нормализовался и не превышал его в 1-й и во 2-й группах.

Активность СОД в 4-й группе – 33,42±7,40 усл. ед./мл существенно - в 2,8 раза превышала (P < 0,05) таковую группы сравнения (2-й, 11,81 ±1,09 усл. ед./мл), что демонстрирует выраженную компенсацию состояния свободнорадикального окисления липидов. В группе 3 (леченные мазью «Радевит») превалирование над группой 2 было в 2,7 раза (Р < 0,01). Показатель каталазы крови – 48,60±2,79 ЕД/мл х мин в сравнении со «здоровыми» (то есть без ДПРК) белыми крысами контрольной (1-й) группы проявил тенденцию к некоторому превалированию (в 1,1 раза), был существенно выше такового во 2-й группе – 33,55 ±1,45 ЕД/мл х мин (в 1,5 раза; Р < 0,001) и аналогично выше (в 1,3 раза; Р < 0,01), чем в 3-й группе (38,60± 0,91 ЕД/мл х мин), то есть у получивших наружное лечение мазью «Радевит». Таким образом, показатели 4-й группы по всем 3 компонентам СРОЛ и АОС демонстрируют при сравнении наиболее благоприятные изменения после проведенного лечения – по МДА, СОД и особенно по активности КАТ, показатель которой оказался существенно выше (Р < 0,01) в 1,3 раза, чем в 3-й группе. Ниже оказалось содержание основного показателя СРОЛ – малонового диальдегида, зато выше – активность каталазы крови. Убедительно демонстрируется при этом более благоприятная динамика состояния СРОЛ и АОС в группе экспериментальных животных, леченных сочетанием инъекций «Омегавена» и наружно – крема «Витамин Ф 99» жирный (4-я группа), чем леченных смазываниями очагов мазью «Радевит» (3-я группа). Такое повышение эффективности действия на СРОЛ и АОС объясняется, очевидно, влиянием содержащихся в использованных лечебных средствах омега-3 и омега-6 ПНЖК.

Наши исследования компонентов СРОЛ и АОС крови у белых крыс с экспериментально вызванным ДПРК при различных методах лечения позволили наблюдать некоторые закономерности. В группе 2-й с ДПРК (4 дня после ожоговой травмы) – декомпенсация системы СРОЛ и АОС с достоверным снижением активности СОД и КАТ крови при некоторой тенденции (в 1,1 раза) к повышению содержания в крови МДА (оксидативный стресс). После 11 дней лечения самой благоприятной оказалась динамика компонентов СРОЛ и АОС в группе 4, при лечении сочетанием инъекций «Омегавена» и наружно – крема «Витамин Ф 99» жирный, содержащими омега-3 и омега-6 ПНЖК.

Мы оценили показатели свободнорадикального окисления липидов и антиоксидантной системы крови при экспериментальном дерматите простом раздражительном контактном в процессе парентерального и местного лечения с использованием средств, содержащих омега-3 и омега-6 полиненасыщенные жирные кислоты («Омегавен», крем «Витамин Ф 99» жирный), а также характеризующейся противовоспалительной и антиоксидантной активностью мазью «Радевит».

В группе 2-й – ДПРК после 4 дней от выраженной ожоговой травмы и не получавших какого-либо лечения при значительно выраженной воспалительной реакции пораженной кожи, содержание МДА проявило тенденцию к повышению (в 1,1 раза), а показатели антиоксидантной защиты оказались существенно сниженными: СОД в 2,0 раза и КАТ – в 1,3 раза. Подобное сочетание содержания и активности приведенных выше компонентов выявляет декомпенсацию в системе СРОЛ (оксидативный стресс) в результате выраженной ожоговой травмы.

Животные 3-й группы, получавшие в течение 11 дней местное лечение мазью «Радевит», характеризовались еще сохранявшейся воспалительной реакцией в очаге на коже после выраженной ожоговой травмы (разрешение ее при типе остром ДПРК, отмечавшемся, согласно клиническим и гистологическим нашим исследованиям и по литературным данным, - в период после 2 недель). Содержание МДА в крови оказалось повышенным в 1,4 раза (превалирование над показателем группы 2 – в 1,3 раза), активность СОД превышала показатель 2-й группы в 2,7 раза (сравнение с контрольной группой – тенденция к превалированию в 1,4 раза). Активность КАТ превышала показатель группы сравнения - 4 дня после выраженной ожоговой травмы без лечения (2-я группа) – в 1,2 раза, а сопоставление с контрольной группой (1-й) показало тенденцию к снижению в 1,2 раза. Такое состояние компонентов СРОЛ и АОС выявляет умеренную компенсаторную реакцию.

В основной опытной группе экспериментальных белых крыс (4-я группа), получавших комплексное лечение «Омегавеном» в брюшную полость и наружно – кремом «Витамин Ф 99» жирный (оба средства содержат омега-3 и омега-6 ПНЖК), после 11 дней терапии показатель МДА не отличался существенно от 1-й и 2-й групп (в 3-й группе после лечения мазью «Радевит» показатель МДА превышал таковой в 1-й и 2-й группах в 1,4 и в 1,3 раза соответственно). Активность СОД крови была выше таковой группы сравнения (2-й) в 2,8 раза, а КАТ – в 1,5 раза. Особое внимание обращает на себя превышение активности КАТ в 4-й группе в сравнении с 3-й группой (лечение мазью «Радевит») – в 1,3 раза. По всем 3 компонентам СРОЛ и АОС показатели 4-й группы были более благоприятны, чем в 3-й группе. Тем самым лечение ДПРК препаратами, содержащими омега-3 и омега-6 ПНЖК («Омегавен», крем «Витамин Ф 99» жирный), оказалось эффективнее, чем с противовоспалительной активностью (мазь «Радевит»).

Заключение

Согласно представленным выше данным, при экспериментальном дерматите простом раздражительном контактном у белых крыс отмечается оксидативный стресс, сохранявшийся до существенной клинической стабилизации в очагах «выраженной ожоговой травмы». Наиболее эффективным в отношении состояния показателей перекисного окисления липидов крови оказалось лечение сочетанием «Омегавена» и крема «Витамин Ф 99» жирный. Удалось отметить превосходство средств с омега-3 и -6 ПНЖК, над таковым противовоспалительного действия (мазь «Радевит»). Такие результаты экспериментальных исследований обосновывают использование в условиях клиники в системной («Омегавен») и местной терапии средств, содержащих омега-3 и -6 полиненасыщенные жирные кислоты, а также антиоксиданты, при комплексном лечении воспалительных заболеваний кожи: дерматита простого раздражительного контактного, аллергического контактного дерматита, атопического дерматита, нейродермита очагового и диффузного, псориаза, кожной формы пигментной крапивницы у детей и др.

Библиографическая ссылка