Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС У БОЛЬНЫХ ЦИРРОЗАМИ ПЕЧЕНИ РАЗНОЙ ЭТИОЛОГИИ

Булатова И.А. 1 Щёкотова А.П. 1 Долгих О.В. 2 Падучева С.В. 1
1 ГБОУ ВПО Пермский государственный медицинский университет им. ак. Е.А. Вагнера Минздрава России
2 ФБУН Федеральный научный центр медикопрофилактических технологий управления рисками здоровью населения
Цель исследования: изучить особенности выработки цитокинов в сыворотке крови больных циррозом печени (ЦП) вирусной, невирусной и смешанной этиологии, а также взаимосвязи цитокинового статуса с биохимическими тестами, отражающими тяжесть поражения печени. Обследовано 50 больных ЦП вирусной этиологии, 22 пациента с ЦП невирусного генеза и 10 больных смешанным ЦП (вирус+алкоголь), группа контроля – 30 практически здоровых лиц. В сыворотке крови оценивали биохимические тесты, в том числе уровень трансаминаз, гамма-глутамилтранспептидазы, альбумина и фракций билирубина. Методом ИФА изучали содержание цитокинов в сыворотке крови: фактора некроза опухоли альфа (ФНО-α), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-4 (ИЛ-4), васкулоэндотелиального фактора роста (ВЭФР) и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ). У больных ЦП вне зависимости от этиологии выявлено повышение концентраций ФНО-α (р<0,001), ИЛ-6 (р<0,001), ИЛ-4 (р=0,03), ВЭФР (р=0,001) и Г-КСФ (р=0,01) по сравнению с контрольной группой, которые достоверно коррелировали с биохимическими тестами, отражающими тяжесть поражения печени. Концентрация ИЛ-6 была значимо выше у больных с невирусным (р=0,008) и смешанным ЦП (р=0,02). При вирусном ЦП наблюдалась более высокая активность ИЛ-4 (р=0,04). Значимо высокая выработка ВЭФР наблюдалась в группе с невирусным ЦП, а Г-КСФ - у больных ЦП вирусной (р=0,01) и невирусной этиологии (р=0,04). Цитокиновый статус больных ЦП вне зависимости от этиологического фактора отражает активность воспалительного процесса, так как преобладает повышение провоспалительных цитокинов, механизмов сосудистого ремоделирования, неоангиогенеза и тяжесть поражения печени. При вирусном ЦП на фоне увеличения выработки ФНО-α, ИЛ-6 и ВЭФР наблюдается значимая активность ИЛ-4 и Г-КСФ, при невирусном циррозе – гиперпродукция ИЛ-6, ВЭФР и Г-КСФ, при смешанном генезе – гиперпродукция ИЛ-6 и Г-КСФ.
цирроз печени
цитокины
фактор некроза опухоли альфа
интерлейкин-6
интерлейкин-4.
1. Базарный В.В., Гаренских Н.В. Диагностическое значение гранулоцитарного колониестимулирующего фактора при циррозе печени // Новости «Вектор-Бест». – 2013. – Т. 68. – № 2. – С. 12-14.
2. Булатова И.А., Щёкотова А.П., Насибуллина Н.И., Калугина Е.А. Оценка фиброгенеза печени при хроническом гепатите С по результатам определения сывороточных цитокинов // Новости «Вектор-Бест». – 2014. – Т. 71. – № 1. – С. 15-19.
3. Куликов В.Е., Тонеева М.А., Емелина Т.А., Антонова Э.Р., Корнилова В.А. Цитокиновый статус у больных циррозами печени вирусной этиологии. Международный научно-исследовательский журнал. – 2015. – № 4. – DOI: 10.18454/IRJ.2227-6017-http://research-journal.org/medical/citokinovyj-status-u-bolnyx-cirrozami-pecheni-virusnoj-etiologii/.
4. Маевская М.В., Буеверов А.О. Цитокины в патогенезе алкогольного гепатита и возможности терапии // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. – 2009. – Т. 19. – № 2. – С. 14-19.
5. Павлов А.И. Алкогольная болезнь печени: диагностика и лечение в многопрофильном стационаре. Эффективная фармакотерапия. Гастроэнтерология. – 2013. – Т. 41. – № 4. –http://umedp.ru/articles/alkogolnaya_bolezn_pecheni_diagnostika_i_lechenie_v_mnogoprofilnom_statsionare.html
6. Сапронова Н.Г., Лукьянов С.В., Чигаева Е.В. Особенности лечения пациентов с вирус-ассоциированным циррозом печени // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 6. – URL: www.science-education.ru/113-10856.
7. Хазанов А.И., Плюснин С.В., Васильев А.П., Павлов А.И., Пехташев С.Г., Скворцов С.В., Бобров А.Н., Онуфриевич А.Д. Алкогольные и вирусные циррозы печени у стационарных больных (1996–2005 гг.): распространенность и исходы // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. – 2007. – Т.17. – № 2. – С.19-27.
8. Черных Е.Р., Леплина О.Ю., Старостина П.М. Цитокиновый профиль у больных хроническими вирусными гепатитами с фиброзом и циррозом печени // Медицинская иммунология. – 2006. – Т. 8. – № 4. – С. 539-546.
9. Abayli В., Canataroglu A., Akkiz Н. Serum profile of T helper 1 and T helper 2 cytokines in
patients with chronic hepatitis C virus infection // Turk. J. Gastroenterol. – 2003. – V. 1. – P. 7-11.
10. Bataller R., Brenner D.A. Liver fibrosis // Clin. Invest. – 2005. – V. 115. – P. 209-218.

Цирроз печени (ЦП) до настоящего времени является одним из самых тяжелых заболеваний органов пищеварения, что связано с широкой распространенностью основных этиологических факторов в виде персистирования гепатотропных вирусов, сочетающихся с ростом потребления алкоголя, а также развитием тяжелых осложнений, высокой частотой инвалидизации и уровнем смертности данной категории больных. На сегодняшний день цирроз печени как причина смерти занимает 10-е место и входит в 6 основных причин у лиц наиболее трудоспособного возраста 35–55 лет. Осложнения цирроза печени являются наиболее частой причиной смерти у больных гастроэнтерологического профиля, составляя не менее 40 % от общего числа пациентов [5, 7]. Терапевтическое лечение ЦП незначительно улучшает отдаленный прогноз, в связи с чем актуальным является углубленное изучение звеньев патогенеза ЦП, воздействие на которые может улучшить результаты терапии и прогноз больных.

Прогрессирующее повреждение печени и развитие внепеченочных осложнений у больных ЦП неразрывно связаны с иммунными механизмами и хроническим воспалительным процессом [9, 10]. В последние годы большое внимание уделяется изучению роли цитокинов в механизмах развития иммунно-воспалительных и фиброгенных процессов при хронических заболеваниях печени. Есть данные об активации цитокинового каскада при ЦП. По данным одних авторов прогрессия фиброза сопряжена с активацией гуморального звена иммунной системы, а количественные соотношения и степень взаимосвязи между цитокинами определяют тяжесть течения ЦП, хотя результаты не всегда однозначны [1, 2, 3, 4, 8]. В других работах приводятся данные об истощении иммунных механизмов, в частности при вирус-ассоциированном ЦП [6].

Учитывая разнородность данных в литературе, касающихся уровня цитокинов в сыворотке крови и их роли при циррозах печени различного генеза, исследования в этом направлении должны продолжаться.

Цель исследования – изучить особенности выработки цитокинов в сыворотке крови больных ЦП вирусной, невирусной и смешанной этиологии, а также взаимосвязи цитокинового статуса с биохимическими тестами, отражающими тяжесть поражения печени.

Материал и методы исследования. Были обследованы 82 пациента (42 мужчины и 40 женщин) с ЦП разной этиологии, средним возрастом 52,8 ± 13,7 лет. По этиологическому фактору пациенты с ЦП были распределены следующим образом: ЦП вирусного генеза – 50 человек (в исходе хронического гепатита С – 30 больных, в исходе хронического гепатита В – 10, в исходе микст-гепатитов – 10), ЦП невирусной этиологии – 22 пациента, в том числе: алкогольного генеза – 10, криптогенный ЦП – 8, первичный билиарный цирроз – 4 человека, 10 больных со смешанным ЦП (алкоголь+вирус). Сопоставимая по полу и возрасту контрольная группа включала 30 практически здоровых лиц. Диагноз ЦП пациентам исследуемой группы был поставлен на основании анамнестических данных, результатов физикального, инструментального, а также лабораторного обследования. У всех пациентов с ЦП имелись признаки портальной гипертензии и асцит. По шкале Чайльда-Пью 24 больных находились на стадии компенсированного ЦП, 26 пациентов были в стадии субкомпенсации, у 32 больных наблюдался декомпенсированный ЦП.

Этиологическая верификация вирусных гепатитов В, С и Д проводилась методом иммуноферментного анализа (ИФА), а также с помощью полимеразной цепной реакции наборами реагентов ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Для выявления хронической алкогольной интоксикации применялся опросник GAGE [5]. Для исследования биохимических показателей аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТП), общего и прямого билирубина, альбумина использовали автоматический анализатор «Architect-4000» («Abbott», США). Концентрацию фактора некроза опухоли альфа (ФНО-α), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина – 4 (ИЛ-4), васкулоэндотелиального фактора роста (ВЭФР) и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) в сыворотке крови обследуемых лиц определяли методом ИФА с использованием соответствующих наборов реагентов (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием программы Statistica 7.0 (StatSoft). Данные описывались с помощью среднего и стандартного отклонения (М±σ) и в виде медианы (Ме) и интерквантильного размаха (25-ый и 75-ый процентили). Для оценки значимости различий независимых групп применяли непараметрический критерий Манна – Уитни. Корреляционный анализ проводился с вычислением коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Различия считались достоверными при р<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Основные биохимические показатели функции печени (трансаминазы, фракции билирубина, преимущественно прямого, и ГГТП) у больных ЦП в сравнении с контрольной группой были значительно изменены, что свидетельствовало о выраженном синдроме цитолиза и холестаза, что свидетельствует об активности воспаления и о нарушении оттока желчи, косвенно связанным с ремоделированием печени на фоне фиброза, а снижение уровня альбумина (р<0,001) указывает на печеночно-клеточную недостаточность за счет снижения синтетической функции печени (табл. 1).

Таблица 1

Уровень цитокинов и биохимические показатели в сыворотке крови больных ЦП

и в контрольной группе, Ме (25–75 процентиль)

Показатели

Контрольная группа (n=30)

ЦП (n=82)

р

АЛТ, Е/л

16,7 (14 - 18,6)

44,0 (28 – 66,7)

0,022

АСТ, Е/л

19,0 (17,6 – 27,5)

66,0 (47 – 107)

0,006

Билирубин общий,

мкмоль/л

10,0 (8,2 – 14,5)

40,0 (21 – 146)

<0,001

Билирубин прямой,

мкмоль/л

3,0 (2,4 – 3,5)

25,2 (11,9 – 50,9)

0,001

ГГТП, Е/л

10,9 (9,9 – 15,6)

64,5 (23,6 – 152,8)

<0,001

Альбумин, г/л

50,2 (45,2 – 51)

34,7 (28 – 40,9)

<0,001

ФНО-α, пг/мл

0 (0 – 0)

3,5 (2,6 – 4,9)

<0,001

ИЛ-6, пг/мл

0 (0 – 0)

22,0 (8,3 – 49,5)

<0,001

ИЛ-4, пг/мл

1,4 (1 – 1,5)

1,6 (1,4 – 1,9)

0,03

ВЭФР, пг/мл

86,65 (6,6 – 187,4)

203,55 (93,85 – 478,75)

0,001

Г-КСФ, пг/мл

8,3 (6,2 – 15,3)

10,85 (5 – 57,1)

0,01

Примечание: р – значимость различий.

Значения концентрации провоспалительных цитокинов ФНО-α и ИЛ-6 и противовоспалительного ИЛ-4 в сыворотке крови в исследуемой группе всех больных ЦП были достоверно выше, чем данные показатели в группе контроля (р<0,001, р<0,001 и р=0,03 соответственно), причем существенно преобладала активация провоспалительных цитокинов. Медиана концентрации ВЭФР у пациентов с ЦП превышала значения контрольной группы в 2,3 раза (р=0,001), а кратность повышения Г-КСФ составила 1,3 (р=0,01) (табл. 1). Таким образом, развитие ЦП сопровождается гиперпродукцией преимущественно провоспалительных цитотокинов ФНО-α и ИЛ-6, в меньшей степени противовоспалительного ИЛ-4 и факторов роста, что указывает на активацию цитокиновой регуляции воспалительного процесса, механизмов сосудистого ремоделирования и неоангиогенеза в печени и согласуется с результатами, полученными в других исследованиях [1, 3, 8].

В группе больных ЦП выявлены прямые корреляции ИЛ-6 и ВЭФР с маркером цитолиза АСТ (р=0,02 и р=0,04 соответственно), прямым билирубином (р<0,001 и р=0,04 соответственно), а также прямая взаимосвязь ИЛ-6 с маркером холестаза ГГТП (р=0,01). Маркер синтетической функции печени альбумин обратно коррелировал с ФНО-α, ИЛ-6 и ВЭФР (р=0,03, р<0,001 и р=0,04 соответственно) (табл. 2). То есть повышение уровней ФНО-α, ИЛ-6 и ВЭФР при ЦП независимо от этиологического фактора соответствует тяжести поражения гепатоцитов.

Таблица 2

Взаимосвязи исследуемых показателей в группе больных ЦП

Показатели

r

p

ФНО-α / ИЛ-6

0,5

<0,001

ИЛ-6 / ВЭФР

0,36

0,003

ФНО-α / альбумин

-0,24

0,03

ИЛ-6 / АСТ

0,26

0,02

ИЛ-6 / билирубин прямой

0,39

<0,001

ИЛ-6 / ГГТП

0,29

0,01

ИЛ-6 / альбумин

-0,58

<0,001

ВЭФР / АСТ

0,23

0,04

ВЭФР / билирубин прямой

0,22

0,04

ВЭФР / альбумин

-0,25

0,04

Примечание: r – коэффициент корреляции; р – значимость различий.

Цитолиз по уровню АСТ был несколько выше в группе пациентов со смешанным ЦП, чем у больных с невирусным ЦП (р=0,04), и не имел достоверных различий от значений АСТ в группе с ЦП вирусного генеза (р=0,41). Концентрации билирубина также были значимо выше в группе с ЦП смешанного генеза. Уровень ГГТП регистрировался повышенным у пациентов с невирусным и смешанным ЦП в сравнении с вирусным ЦП (р=0,001 и р=0,03 соответственно), что объясняется наличием алкогольного влияния в этиологии у этих групп больных (табл. 3).

Таблица 3

Уровень цитокинов и биохимических показателей в сыворотке крови больных ЦП вирусной, невирусной и смешанной этиологии, Ме (25–75 процентиль)

Показатели

ЦП вирусный

(n=50)

ЦП невирусный

(n=22)

ЦП смешанный

(n=10)

АЛТ, Е/л

45, 0 (37,5 – 88,5)

29,5 (23 – 47)

47,2 (27 – 59)

АСТ, Е/л

66,3 (49 – 111,5)

58,5 (30 – 106)

69,0 (60 – 115)2

Билирубин общ,

мкмоль/л

32,7 (19,3 – 162)

37,5 (15,7 – 83,8)

93,0 (37 – 204)2,3

Билирубин пр,

мкмоль/л

17,4 (11 – 36,3)

27,5 (13 – 56,7)

30,0 (16 – 118)3

ГГТП, Е/л

44,9 (16,6 – 75,5)

98, 0 (57,5 – 240)1

116,0 (26,8 – 173) 3

Альбумин, г/л

35,2 (27,9 – 41,5)

32,6 (27,4 – 41)

36,2 (28 – 40,8)

ФНО-α, пг/мл

3,6 (2,1 – 6,3)

3,4 (2,6 – 4)

3,1 (2,7 – 3,9)

ИЛ-6, пг/мл

15,7 (7,1 – 34,4)

37,0 (23,1 – 79,5)1

29,3 (10 – 84,2)3

ИЛ-4, пг/мл

1,7 (1,3 – 2,15)1

1,5 (1,4 – 1,8)

1,75 (1,5 – 1,85)

ВЭФР, пг/мл

198,25 (75,9 – 335,4)

262,85 (156 – 704,5)1,2

151,3 (77,9 – 313,4)

Г-КСФ, пг/мл

12,8 (5,4 – 53,0)3

5,7 (5 – 63,3)2

4,5 (3,7 – 7,4)

Примечание:

1 – различия достоверны в группах с ЦП вирусной и невирусной этиологии;

2 – различия достоверны в группах с ЦП невирусной и смешанной этиологии;

3 – различия достоверны в группах с ЦП смешанной и вирусной этиологии.

 

При сравнительном анализе активности сывороточных цитокинов в группах больных с вирусным, невирусным и смешанным ЦП значения ФНО-α не имели достоверных различий. Концентрация ИЛ-6 была значимо выше у больных с невирусным и смешанным ЦП, чем у пациентов с вирусной этиологией процесса (р=0,008 и р=0,02 соответственно). Активность ИЛ-4, наоборот, была чуть выше у больных с вирусным ЦП в сравнении с невирусным (р=0,04) и не имела достоверных различий от смешанного генеза заболевания (р=0,81). Значимо высокая активность выработки ВЭФР наблюдалась в группе с невирусным ЦП, а Г-КСФ более активно вырабатывался у больных ЦП вирусной и невирусной этиологии, чем у пациентов со смешанным генезом процесса (р=0,01 и р=0,04 соответственно) (табл. 3).

Таким образом, при ЦП вне зависимости от этиологического фактора, изменения цитокинового статуса, сходные с преобладанием активации провоспалительных цитокинов, что несомненно следует учитывать в терапии больных. При этом ЦП вирусного генеза характеризуется повышенной продукцией провоспалительных цитокинов ФНО-α, ИЛ-6 и Г-КСФ, что на фоне активации противовоспалительного ИЛ-4 может свидетельствовать о сопряженности прогрессии фиброза в цирроз с активацией гуморального звена иммунной системы [1, 3, 8]. Цирроз печени невирусной этиологии сопровождается увеличением выработки преимущественно провоспалительных цитокинов ФНО-α и особенно ИЛ-6, а также выраженной гиперпродукцией факторов роста ВЭФР и Г-КСФ, что указывает на активацию цитокиновой регуляции воспалительного процесса и более выраженные процессы сосудистого ремоделирования и неоангиогенеза в печени. Цирроз печени смешанного генеза сопровождается также увеличением выработки провоспалительных цитокинов преимущественно ИЛ-6, маркирующего активность воспалительного процесса в печени.

Выводы:

  1. Цитокиновый статус больных ЦП вне зависимости от этиологического фактора характеризуется сходной активацией выработки провоспалительных цитокинов ФНОα, ИЛ-6, противовоспалительного ИЛ-4, а также гиперпродукцией ВЭФР и Г-КСФ, что способствует поддержанию воспалительного процесса, активации механизмов сосудистого ремоделирования, неоангиогенеза и прогрессированию поражения печени.
  2. Сывороточный уровень цитокинов при циррозе отражает тяжесть поражения печени, что подтверждается выявленными взаимосвязями их с маркерами цитолиза, холестаза и белково-синтетической функции печени.
  3. Цирроз печени вирусной этиологии характеризуется повышенной продукцией ИЛ-4 на фоне активации провоспалительных цитокинов ФНО-α, ИЛ-6 и Г-КСФ, что свидетельствует о сопряженности прогрессии цирроза с активацией иммунной системы.
  4. Цирроз печени невирусной этиологии сопровождается выраженным синдромом холестаза, увеличением выработки преимущественно провоспалительных цитокинов ФНО-α и особенно ИЛ-6, а также гиперпродукцией ВЭФР и Г-КСФ, что указывает на активацию цитокиновой регуляции воспалительного процесса и более выраженные процессы сосудистого ремоделирования и неоангиогенеза в печени.
  5. ЦП смешанного генеза характеризуется синдромом цитолиза, холестаза, увеличением выработки преимущественно провоспалительного цитокина ИЛ-6 и Г-КСФ, маркирующих активность воспалительного процесса в печени.
  6. Активное участие изученных цитокинов в патогенезе ЦП разной этиологии позволяет рекомендовать их определение для оценки не только выраженности иммунно-воспалительного синдрома, но и тяжести поражения печени, а также учитывать особенности цитокинового статуса при назначении терапии.

Библиографическая ссылка

Булатова И.А., Щёкотова А.П., Долгих О.В., Падучева С.В. ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС У БОЛЬНЫХ ЦИРРОЗАМИ ПЕЧЕНИ РАЗНОЙ ЭТИОЛОГИИ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 3. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=24755 (дата обращения: 24.10.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074