Длительное влияние на организм животных низкого содержания в растительных кормах йода, селена, кобальта в биогеохимических условиях региона Нижней Волги приводит к изменениям процессов метаболизма, негативно влияет на уровень активности эндокринной, антиоксидантных систем, гемопоэза, предопределяет развитие оксидативного стресса, служащего пусковым механизмом фундаментальных молекулярно-клеточных сдвигов, обуславливающих развитие патогенеза различных эндемических заболеваний, в т.ч. скрытой формы гипомикроэлементоза, ведущего к снижению функций продуктивности сельскохозяйственных животных [1; 3; 4; 6; 11]. Все вышеизложенное имеет актуальное значение при комплексной разработке физиолого-биогеохимической проблемы профилактики и коррекции скрытых форм гипомикроэлементозов конкретного вида животных, например овец, в т.ч. и эдильбаевской породы, изучением физиологического статуса которых в биогеохимической ситуации низкого уровня селена, йода и кобальта (Астраханская область) никто до наших работ не занимался, хотя численность этих животных в области приближается к двум миллионам голов.
В работе показано положительное влияние органического препарата седимина, содержащего йод и селен, на коррекцию скрытого комбинированного гипомикроэлементоза овцематок, в т.ч. на физиолого-биохимические параметры крови, продуктов перекисного окисления липидов (диеновые конъюгаты и малоновый диальдегид), уровень активности антиоксидантных ферментов, которые активируются микроэлементами (каталаза) и в молекулу которых входит селен (глутатионпероксидаза).
Целью исследований являлось определение влияния седимина на физиолого-биохимические параметры крови, выяснение стационарного состояния уровня продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), антиоксидантной системы эдильбаевских овец
Материалы и методы
Физиологические опыты были поставлены в двух аналогичных группах овец, по 15 голов каждая. Условия кормления и содержания подопытных и контрольных животных были одинаковыми. Начиная с первого триместра суягности и до окота опытным овцам внутримышечно вводили в верхнюю треть бедра органический препарат седимин [5], который представляет собой водную смесь соединений йода и селена на стабилизирующей основе декстранового комплекса. В 1 мл седимина содержится: 7,5 мг/мл йода и 0,09 мг/мл стабилизированного селена (соответствует 0,2 мг/мл селенита натрия). Опытным овцематкам седимин применяли в дозе 6 мг на голову через каждые 20 дней эксперимента и до окота. Кровь из ушной вены брали до кормления и определяли: форменные элементы, гемоглобин, лейкоформулу, Ca, Р, Se, J, Co, Mn, Zn, Cu, щелочной резерв, а в сыворотке крови - белок и его фракции, глюкозу и каротин по общепринятым методикам [7]. Уровень диеновых конъюгатов (ДК) в сыворотке крови оценивали спектрометрически по УФ-спектрам [10], а малонового диальдегида (МДА) – исследовали по В.С. Бузлама и др. [2]. Активность каталазы – по М.А. Королюк [8], супероксиддисмутазы (СОД) – по ее способности конкурировать с нитросиним тетразолием за супероксидные анионы - по С.И. Чевари [12], глутатионпероксидазы (ГПО) – по R. Paglian Valentine [13].
Результаты исследований обрабатывали статистически по Г.Ф. Лакину [9] с использованием компьютерных программ Microsoft Excel 97 Pro, Statistica. Для определения степени достоверности средних величин изучаемых параметров физиологического состояния овец использовали t-критерий Стьюдента, при уровне значимости Р<0,05.
Результаты и обсуждение
Гематологические показатели эдильбаевских овцематок и ягнят исследованы нами в условиях Астраханской области впервые. Это необходимо для установления стационарного уровня этих важных физиологических показателей организма животных, что имеет большое значение для интегративной физиологии и ветеринарной лечебной практики.
Применение органического препарата седимин, содержащего J и Se, недостающие животным в окружающей среде и кормах у овец из опытной группы, вызывает улучшение гематологических параметров, которые приближаются к показателям физиологической нормы для овцематок [3; 4; 7]. Количество эритроцитов у овец опытной группы увеличивается на 17,7%, содержание в крови гемоглобина – на 9,63% (Р<0,05) и лейкоцитов – 7,34% (Р>0,5) относительно аналогичных показателей у животных контрольной группы. Определенные изменения произошли в лейкоцитарной формуле у опытных овцематок. У них, относительно контроля, в конце эксперимента увеличилось число эозинофилов, моноцитов, сегментоядерных нейтрофилов и уменьшилось количество лимфоцитов и палочкоядерных клеток. У контрольных животных в этот период эксперимента изменений в лейкоцитарной формуле практически не было (табл. 1).
Таблица 1
Влияние седимина на гематологические показатели эдильбаевских овцематок в биогеохимических условиях Астраханской области
Эритроциты, млн/мкл·1012/л |
Гемоглобин, г/л |
Лейкоциты, тыс/мкл·109/л |
Лейкоцитарная формула |
|||||||
гранулоциты |
нейтрофилы |
агранулоциты |
||||||||
Базофилы, % |
Эозино-филы,% |
Миэлоциты,% |
Ю., % |
Палочко-ядерные, % |
Сегменто-ядерные, % |
Лимфоциты,% |
Моноциты,% |
|||
Контрольная группа |
||||||||||
6,87±0,59 |
81±1,43 |
8,99± 0,73 |
- |
1,8 |
- |
- |
5,4 |
29,7 |
61,3 |
1,8 |
Опытная группа |
||||||||||
8,09±0,65 |
78±2,22 |
9,56± 1,22 |
- |
3,8 |
- |
- |
3,3 |
38,8 |
50,6 |
3,5 |
У опытных маток, получавших (трехкратно) внутримышечно седимин, содержащий селен и йод, уровень каротина достоверно повышался уже после второй инъекции органического препарата. Неорганический фосфор в крови опытных овцематок возрастал уже после первой инъекции, но достоверность его повышения в крови наблюдалась (Р<0,05) лишь перед окотом овец (табл. 2). Уровень углеводов в крови в конце опыта снизился.
Таблица 2
Биохимические показатели сыворотки крови эдильбаевских овцематок (n=15) в биогеохимических условиях Астраханской области
Группы овец |
Время эксперимента, 2015 год |
||||
n |
январь |
февраль |
март |
апрель |
|
Каротин, мкмоль/л |
|||||
опытная |
15 |
0,25±0,01 |
0,33±0,02* |
0,47±0,01* |
0,56±0,01* |
контрольная |
15 |
0,24±0,01 |
0,25±0,01 |
0,36±0,02 |
0,38±0,03 |
Общий кальций, моль/л |
|||||
опытная |
15 |
2,0±0,09 |
2,7±0,08 |
2,9±0,11 |
2,8±0,13 |
контрольная |
|
2,1±0,11 |
2,1±0,12 |
2,4±0,13 |
2,3±0,14 |
Неорганический фосфор, моль/л |
|||||
опытная |
15 |
1,43±0,01 |
1,79±0,07 |
1,81±0,03 |
3,64±0,41* |
контрольная |
15 |
1,42±0,05 |
1,47±0,16 |
1,85±0,24 |
2,97±0,43 |
Селен, мкг/мл |
|||||
опытная |
15 |
0,022±0,003 |
0,034±0,003* |
0,062±0,004* |
0,065±0,003* |
контрольная |
15 |
0,018±0,002 |
0,019±0,002 |
0,027±0,004 |
0,028±0,001 |
*-Р<0,05 относительно контроля
В условиях низкого уровня в окружающей среде и растительных кормах Se, J и Co и отрицательных балансов в организме Se и J уровень каротина в крови суягных овец контрольной группы за период эксперимента изменялся незначительно (Р>0,5). Некоторое увеличение каротина в конце марта–апреля, вероятно, объясняется тем, что овцематок начали весной пасти на пастбищах, где стала появляться зеленая трава, содержащая каротина больше, чем корма зимнего периода. Определенное увеличение неорганического фосфора в крови контрольных овец весной объясняется тем же самым. В то же время уровень общего кальция в сыворотке крови за весь период беременности контрольных овцематок колебался незначительно от 2,1 до 2,3 ммоль/л. Содержание в крови овец глюкозы за период опыта несколько возросло.
Количество селена в крови опытных животных из опытной группы достоверно (Р<0,05) увеличилось в феврале – на 78,9%, в марте – 129,6% и апреле – 132,1% относительно данных контроля и достигло физиологической нормы для овец. Аналогично ведут себя и уровень общего белка, глобулинов и общего кальция и неорганического фосфора в крови, который у опытных овец был достоверно выше (кроме фосфора в марте), чем у контрольных животных (Р<0,05). Все это свидетельствует о благоприятном влиянии седимина на овец и повышении уровня обменных процессов в организме опытных овцематок.
Микроэлементы с помощью гормонов, ферментов и витаминов определяют интенсивность биосинтеза белков, липидов, сложных сахаров и ряда витаминов, что находит свое отражение в процессах раскрытия генетического потенциала, лучшей адаптации к изменяющейся среде; резистентность и интегративную функцию продуктивности сельхозживотных; а, главное, соотношение процессов перекисного окисления и антиоксидантной защиты, которое является первичным показателем начинающихся патологических процессов на молекулярно-клеточном уровне этиологии и патогенеза скрытых форм комбинированного гипомикроэлементоза овец.
В крови эдильбаевских овцематок нами установлен достаточно высокий уровень начальных (ДК) и конечных (МДА) продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и низкая активность антиоксидантных ферментов (глутатионпероксидазы, содержащей селен и каталазы, которая активируется селеном и рядом других микроэлементов).
Малоновый диальдегид (МДА), как один из конечных продуктов свободнорадикального окисления (СРО), не подвержен значительным колебаниям в контроле за период эксперимента. Он постепенно накапливается в организме в зависимости от воздействия стресс-факторов среды обитания, что приводит к развитию окислительного стресса, ведущего к гипомикроэлементозу. Высокий уровень МДА в крови оказывает ингибирующее действие на рост массы овец и другие функции организма (табл. 3).
Нам представляется, что после применения седимина у овец из опытной группы включались регуляторные механизмы, обеспечивающие относительно постоянный уровень рН и повышение щелочного резерва крови животных из опытной группы, в котором принимают участие и белки.
Таблица 3
Влияние седимина на уровень свободнорадикального окисления и антиоксидантную защиту у эдильбаевских овцематок
Наименование |
Контрольная группа (n=15) |
Опытная группа (n=15) |
||
до опыта |
в конце опыта |
до опыта |
в конце опыта |
|
общий белок, г/л |
67,4±3,15 |
68,1±4,19 |
68,02±4,92 |
72,55±5,11* |
альбумин, г/л |
23,7±1,18 |
24,8±1,06 |
24,1±2,01 |
28±1,98 |
глобулин, г/л |
28,5±2,07 |
29,0±1,09 |
28,03±4,97 |
34,7±4,12* |
глюкоза, моль/л |
2,16±0,17 |
3,07±0,22 |
2,19±0,41 |
2,01±0,27 |
диеновые конъюгаты (ДК), мкмоль/мл |
2,07±0,04 |
3,16±0,35* |
2,14±0,09 |
1,75±0,06* |
малоновый диальдегид (МДА), мкмоль/л |
0,51±0,09 |
0,59±0,07 |
0,54±0,09 |
0,36±0,07* |
каталаза, мкмоль/мл |
2,98±0,03 |
2,11±0,05 |
3,01±0,03 |
4,72±0,12* |
глутатионпероксидаза (ГПО), мMG-SH л/мин·103 |
8,06±0,05 |
7,17±0,08 |
8,17±0,04 |
11,03±0,99* |
щелочной резерв, об.% CO2 |
41,6±2,32 |
36,5±2,29 |
40,2±3,77 |
49,6±2,05* |
*Р<0,05 относительно контроля и начала опыта
Увеличение белка и его фракций в крови опытных овец, особенно глобулиновой, которая содержит селен [11], а также снижение уровня углеводов относительно контроля свидетельствует о положительном влиянии седимина на белковый и углеводный метаболизм животных. Уровень белка у опытных овец, получавших седимин, содержащий Se и J, приближается к содержанию его в крови до уровня физиологической нормы. Высокий уровень продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), и прежде всего ДК и МДА, в крови контрольных и опытных овцематок до начала эксперимента относительно немногочисленных данных литературы [11] указывает на то, что овцы в Астраханской области постоянно испытывали состояние окислительного стресса, что подтверждают и показатели резервной щелочности крови животных. Кровь овцематок опытной группы перед применением органического препарата йода и селена (седимин) по состоянию кислотно-щелочного равновесия носила явно ацидотический характер.
Уровень активности ферментов антиоксидантной защиты организма овец ГПО и каталазы был у овец контрольной и опытной групп перед опытом сравнительно низким. Внутримышечное применение седимина, содержащего органические соединения йода и селена, опытным овцематкам в период суягности благоприятно повлияло на активность энзимов.
В крови опытных овцематок в конце эксперимента обнаружено повышение активности селеносодержащей глутатионпероксидазы (ГПО) на 35%, а каталазы – на 56,8% относительно этих показателей до начала опыта. Усиление антиоксидантной защиты у опытных овцематок сопровождалось снижением уровня продуктов свободнорадикального окисления. Количество диеновых конъюгатов у овцематок опытной группы за период эксперимента понизилось на 19,3%, а вторичных продуктов перекисного окисления – малонового диальдегида уменьшилось на 34,4 относительно контроля и уровня продуктов пероксидации в крови на начало эксперимента.
В период научно-производственного опыта во время окотной компании в опытной отаре, получавшей внутримышечно седимин, овцематкам практически не оказывали родовспоможение и наблюдали самый низкий процент мертворожденных ягнят. В контрольной отаре, состоящей из 251 овцы, ветеринарными специалистами было оказано 59 родовспоможений. У 262-ти маток из опытной отары продолжительность физиологического акта родов в среднем на одного ягненка составила 7,12±0,78 минуты, а у контрольных - несколько больше – 9,62±0,57 минуты (Р<0,05). В опытной отаре масса тела новорожденных ягнят была на 10,4% больше контрольных показателей. Привес на 20-е сутки жизни ягнят был больше у ягнят от опытных маток – на 9,2%, и масса ягнят после 20-ти суток – на 9,79% превышала аналогичные контрольные показатели.
Выводы:
- Резюмируя вышеизложенные результаты экспериментов по выявлению влияния внутримышечного введения органического препарата седимина, содержащего недостающие в рационе йод и селен, можно заключить, что овцематки из опытной отары в заключительный период опыта имели достоверно лучшие физиологические показатели, обеспечивающие стимулирование процессов ана- и катаболизма, уменьшающие количество продуктов перекисного окисления липидов (ДК и МДА) и увеличивающие активность антиоксидантных ферментов (каталаза и глутатионпероксидаза).
- Коррекция скрытого комбинированного синдрома гипомикроэлементоза у опытных эдильбаевских овцематок внутримышечным применением седимина увеличила (Р<0,05) функцию воспроизводства на 4,95% (101±7,98 ягненка на 100 маток в контрольной и 106±6,54 ягненка в опытной отарах). Продолжительность физиологического акта окота в контрольной отаре составила 9,62±0,57 минуты, а у опытных овцематок этот показатель сократился до 7,12±0,78 минуты на одного новорожденного. При этом живая масса контрольных новорожденных ягнят составила 4,9±0,33 кг, а у опытных она была выше на 8,2% (Р<0,05).
Библиографическая ссылка
Хисметов И.Х., Воробьев Д.В., Щербакова Е.Н., Соловьева А.А. ВЛИЯНИЕ СЕЛЕНА И ЙОДА НА ГЕМОПОЭЗ, ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И АНТИОКСИДАНТНУЮ ЗАЩИТУ ЭДИЛЬБАЕВСКИХ ОВЕЦ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 3. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=24670 (дата обращения: 11.10.2024).