Для понимания сущности процессов, происходящих в организме под влиянием уникальных компонентов из продуктов пчеловодства, необходимо выяснить механизм их влияния на естественные защитные реакции организма и разработать научно-обоснованную концепцию практического использования этих природных соединений для повышения иммунного статуса организма. Сегодня большое внимание исследователей привлекают биологически активные продукты пчеловодства: маточное молочко, прополис, цветочная пыльца и др. [1, 2, 4]. Установлены высокие иммунокоррегирующие свойства этих продуктов. Однако до настоящего времени нет единого мнения о степени иммунокоррегирующей активности разных доз БАПП на организм [3, 4, 5]. В этой связи целью исследований явилось – изучить влияние низких, средних и высоких доз БАПП: маточного молочка, прополиса и цветочной пыльцы на состояние естественной резистентности животных.
Материал и методы исследований. Работа выполнена в лабораториях кафедры микробиологии и иммунологии, аквакультуры и пчеловодства РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, в условиях АКХ «Уныш» Буздякского района республики Башкортостан. В опытах по изучению влияния разных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на иммуногенез использовали 210 поросят с 1 месячного возраста. Животных, по принципу аналогов, разделили на три основные группы (I, II, III), каждая из которых включала четыре опытные группы (1, 2, 3, 4). 1-ая группа служила контрольной. Она была общей для всех основных групп. 2, 3, 4-ая группы входили во все основные группы.
Поросятам I основной группы выпаивали из шприца со шлангом прополисное молочко (готовили из расчета 10 %-ного спиртового раствора прополиса на 1000 мл кипяченой и охлажденной воды). При этом низкая доза составила 2 мл прополисного молочка, средняя – 5 мл, высокая – 50 мл. Дачу препарата проводили 2 раза в день перед кормлением. Всего израсходовали 21546 мл прополисного молочка, что составило 215, 46 мл 20 % спиртового экстракта прополиса (43, 09 г чистого прополиса и 215, 4 мл 96 ° этилового спирта).
20 %-ный спиртовой экстракт прополиса готовили из сырья, отвечающего требованиям ГОСТ 28886-90, настаиванием в 96 ° этиловом спирте при комнатной температуре в течение трех суток, с ежедневным шуттилированием. Содержание сухого вещества определяли выпариванием над водяной баней до постоянного веса – оно составило 110-120 мг/мл.
Животным II основной группы выпаивали из шприца со шлангом водный раствор цветочной пыльцы (готовили из расчета 20 гр. цветочной пыльцы на 100 мл кипяченной и охлажденной воды ). При этом низкая доза составила 0, 5 гр. цветочной пыльцы (2, 5 мл водного раствора цветочной пыльцы), средняя – 1, 5 гр. (7, 5 мл водного раствора), высокая – 15 гр.(75 мл водного раствора). Дачу препарата проводили 2 раза в день перед кормлением. Всего израсходовали 6426 граммов цветочной пыльцы, в т.ч. 189 гр. на опыты с низкой дозой, 567 гр. – со средней и 5670 гр. – с высокой дозой цветочной пыльцы.
Поросятам III основной группы выпаивали из шприца со шлангом водный раствор маточного молочка. В качестве маточного молочка использовали таблетки апилака (в 1 таблетке весом 1 гр. содержится 0, 01 гр. апилака). Раствор апилака готовили из расчета 20 таблеток апилака на 100 мл кипяченой и охлажденной воды. Низкая доза составила 1 мл раствора апилака (0, 002 гр. апилака), средняя 2, 5 мл (0, 005 гр. апилака), высокая – 20, 0 мл (0, 04 гр апилака). Выпаивание препарата проводили 2 раза в день перед кормлением. Всего израсходовали 1776, 6 таблеток (17, 76 гр. апилака), в т.ч. 75, 6 таблеток (0, 75 гр.) на опыты с низкой дозой, 189 таблеток (1, 89 гр.) – со средней дозой и 1512 таблеток (15, 12 гр.) – с высокой дозой апилака.
До начала опыта, а затем через 3, 7, 14, 21, 35 и 60 дней от начала опыта проводили взятие крови. Изучение факторов естественной резистентности проводили классическими методами. Статистический анализ материала проводили с использованием программ Statistica 6.1 и приложения Excel из пакета MS Office XP.
Результаты исследований и их обсуждение. Титр комплемента у животных контрольной группы во все сроки исследования изменялся в сторону незначительного достоверного повышения и колебался в пределах от 7, 0±0, 31 до 8, 5±0, 39. Низкие дозы прополиса цветочной пыльцы и маточного молочка вызывали повышения уровня комплементарной активности сыворотки крови. Этот процесс начинался с 3-го дня опыта, постепенно нарастал и был более выраженным у животных, которым выпаивали раствор маточного молочка. Наибольший показатель комплемента у поросят, получавших низкие дозы прополиса, отмечался к 35 дню, цветочной пыльцы и маточного молочка к 21-му. На эти сроки он превысил показатель контроля, соответственно в 2, 11; 1.86 и в 2, 93 раза (P³0, 95). В конце опытов, на срок 60 дней, комплементарная активность сыворотки крови поросят, получавших низкие дозы прополиса, была выше уровня контрольных животных в 2.0 раза, цветочной пыльцы в 1, 06 раза и маточного молочка в 2, 25 раза (Р³0.95).
Средние дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка, по сравнению с низкими дозами, способствовали более выраженному повышению комплементарной активности сыворотки крови. В группе с прополисом титр комплемента нарастал до 35 дня, составил на этот срок 40, 0± 0, 36, что было выше уровня контроля, к этому сроку, в 4, 7 раза (Р³0.95). В конце опыта он еще оставался значительно высоким и в 3, 75 раза превосходил показатель животных контрольной группы, составив 30, 0 ± 0.34. Несколько ниже было повышение уровня комлемента сыворотки крови поросят, получавших средние дозы цветочной пыльцы по сравнению с прополисом. У животных этой группы пик комплемента отличался к 21 дню, он был равен 20, 0± 0, 41, что в 2, 6 раза превышала контрольную цифру. Последующие сроки исследования комплементарная активность сыворотки крови животных этой группы постепенно понижалась, но во все сроки была выше контрольного уровня и более двух раз ниже показателей прополисной группы. Самого высокого уровня достигла комплементарная активность сыворотки крови поросят, которым выпаивали средние дозы раствора маточного молочка.
Процесс повышения титра комплемента продолжался у животных этой группы до 21 дня опыта. На этот срок он достиг 44, 0±0, 37, что было выше значения контрольных поросят в 5, 86 раза (Р³0, 95). Этот показатель оставался высоким по сравнению с предыдущими группами и к концу опытов был выше уровня контроля в 4, 75 раза, прополисной группы –в 1, 26 раза, группы со цветочной пыльцой – в 2, 53 раза (Р³0, 95). Он составил к 60 дню 38, 0±0, 23.
Высокие дозы прополиса до 7 дня опыта вызывали резкое повышение титра комплемента сыворотки крови поросят. К этому сроку он достиг 30, 0±`0, 28, т. е. 4, 28 раза был выше контрольного уровня (Р³0, 95). В последующие сроки наблюдали значительное понижение этого показателя, этот процесс продолжался до 35 дня. На этот срок комплементарная активность сыворотки крови поросят этой группы составила 5, 0±0, 22, что было ниже уровня интактных животных в 1, 7 раза. К концу опытов она не достигла уровня контроля, в 1, 23 раза уступала ему и была равна лишь 6, 5±0, 30.
Высокие дозы цветочной пыльцы, по сравнению с низкими и средними дозами, также первоначально вызывали выраженное увеличение титра комплемента в сыворотке крови поросят. Этот процесс продолжался до 7 дня опытов. К этому сроку титр комплемента был равен 24, 0±0, 35. Затем отмечали его понижение. Самым низким этот показатель был на срок 21 день и составил 5, 5±0, 38. В последующие сроки исследования комлементарная активность сыворотки крови постепенно начала повышаться и приблизилась к уровню контрольных животных, составив на срок 35 и 60 дней соответственно 7, 0±0, 42, 7, 0±0, 33. Высокие дозы маточного молочка вызвали самые резкие изменения в динамике комплементарной активности сыворотки крови поросят. На срок 7 дней она достигла52, 0±0, 31, что было в 7, 42 раза (Р³0, 95) выше контрольного показателя. Уже на срок 14 дней отмечали резкий спад комплементарной активности сыворотки крови поросят этой группы. К этому периоду она составила 13, 0 ± 0, 42. В последующие сроки эксперимента отмечали понижение этого показателя. К 35 дню она равнялась 3, 5 ± 0, 38, т.е. в 2, 42 раза уступала показателю животных контрольной группы на этот срок. В конце опытов она составила 4, 2± 0, 35, значительно уступая уровню контрольных животных и поросят предыдущих групп.
Бактерицидная активность сыворотки крови поросят контрольной группы колебалась в пределах от 45, 8 до 49 %. Низкие дозы продуктов пчеловодства вызывали изменения этого показателя в сторону его некоторого повышения. Этот процесс был постепенным и продолжался до 35 дня эксперимента. У поросят, которым выпаивали с водой низкие дозы прополиса, бактерицидная активность сыворотки крови к 35 дню превосходила показатель контрольных поросят, на этот срок, в 1, 21 раза, составив 59, 6±0, 50 %. В конце опытов она продолжала превышать уровень контроля и была равна 56, 6±0, 36 %.
Бактерицидная активность сыворотки крови поросят, получавших низкие дозы цветочной пыльцы, к 35 дню была выше контрольного показателя в 1, 15 раза и ровнялась 56, 8±0, 34 к 60 дню, соответственно в 1, 09 раз (52, 7±0, 49). Значительно выше, по сравнению с предыдущими двумя группами, поднимался уровень бактерицидной активности сыворотки крови поросят, которым выпаивали с водой низкие дозы маточного молочка. Ее максимум также отмечался на срок 35 дней и составил 67, 8±0, 50 %, что было в 1, 38 раза (Р³0, 95) выше показателя поросят контрольной группы. В конце опытов бактерицидная активность сыворотки крови поросят этой группы превосходили показатель контроля в 1, 24 раза и находилась на уровне 60, 0±0, 53 %. Средние дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка способствовали, по сравнению с низкими дозами, более выраженному повышению уровня бактерицидной активности сыворотки крови поросят. В прополисной группе бактерицидная активность повышается до 35 дня, достигла на этот срок показателя, равного 88, 9 ± 0, 38 %, что было выше уровня контроля в 1, 84 раза (P³0, 95). Значительно повышенной она оставалась до конца эксперимента, составив на этот срок 81, 0±0, 47 %, т.е. превысив контрольный показатель в 1, 68 раза (Р³0, 95).
Несколько ниже был уровень бактерицидной активности сыворотки крови поросят, получавших среднюю дозу цветочной пыльцы, по сравнению с показателями животных, получавшими среднюю дозу прополиса. У поросят этой группы повышение бактерицидной активности сыворотки крови продолжалось также до 35 дня опыта. На этот срок она достигла 80, 9±0, 70 %, превысив контрольную цифру в 1, 65 раза. К концу опыта она была на уровне 70, 7±0, 31 %, что в 1, 46 раза (Р³0, 95) было выше показателя поросят контрольной группы на этот срок.
Средние дозы маточного молочка вызвали самое высокое повышение уровня бактерицидной активности сыворотки крови поросят. Уже через 3 дня она составила 60, 0±0, 50 %. Затем интенсивно нарастала и достигла пика к 35 дню, составив 94, 9±0, 79 %, что в 1, 93 раза (Р³0, 95) было выше показателя контрольных поросят. В конце эксперимента бактерицидная активность сыворотки крови поросят этой группы были значительно выше, по сравнению с предыдущими двумя группами, и особенно с показателями животных контрольной группы. Она составила 87, 0±0, 42 %, что в 1, 8 раза было выше уровня контроля (Р³0, 95).
Высокие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка вызвали перепады параметров бактерицидной активности сыворотки крови поросят. Прополис до 7 дня способствовал повышению уровня бактерицидной активности сыворотки крови. К этому сроку она достигла 75, 0±0, 46 %. Затем интенсивно понижалась. К 21 дню опыта была ниже уровня контроля и составила 40, 6±0, 42 %. Минимальный показатель был на срок 35 дней – 29, 9±0, 40 %, что в 1, 63 раза уступал уровню контрольных поросят. К 60 дню наблюдалось достоверное повышение бактерицидной активности сыворотки крови, но она не достигла контрольного уровня, составила 31, 7±0, 43 %, что было ниже контрольного показателя в 1, 52 раза (P³0, 95).
Высокие дозы цветочной пыльцы вызывали повышение бактерицидной активности сыворотки крови до 14 дня опытов. Но эти показатели значительно уступали их уровню у поросят, получавших средние дозы этого препарата. C 21 дня эксперимента наблюдали понижение бактерицидной активности сыворотки крови, которое продолжалось до конца опытов. На срок 60 дней она в 1, 3 раза была ниже показателя контрольных животных на этот срок.
Маточное молочко в высоких дозах вызывало вначале резкое повышение бактерицидной активности сыворотки крови, которое через 3 дня превышало контрольный уровень в 1, 67 раза, составив 76, 9± 0, 37 %, к 7 дню – в 1, 93 раза, достигнув 89, 7±0, 46 %. К 14 дню отмечали резкое понижение его – 45, 0±0, 38 %. До 35 дня эксперимента бактерицидная активность сыворотки крови поросят этой группы понижалась и в 2, 43 раза (P³0, 95) уступала контрольному показателю, составив 20, 1±0.36 %. В конце опытов она была равна 24, 9±0, 28 %, что в 1, 93 раза (P³0, 95) было ниже показателя поросят контрольной группы.
Фагоцитарная активность нейтрофилов крови животных контрольной группы находилась в пределах от 15, 3 до 16, 8 %. Низкие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка способствовали умеренному повышению показателя фагоцитоза, которое сохранялось во все сроки исследований. Прополис вызывал увеличение фагоцитарной активности нейтрофилов до 35 дня от начала опыта. К этому сроку она превысила контрольный уровень в 1, 58 раза и составила 26, 6±0, 18 %. В конце опыта показатель уровня фагоцитоза в этой группе была выше, чем в контроле, в 1, 15 раза (19, 1±0, 21 %). Несколько уступал уровню фагоцитарной активности лейкоцитов крови животных прополисной группы показатель фагоцитоза поросят, которым вводили внутрь низкие дозы цветочной пыльцы. Пик фагоцитоза нейтрофилов в этой группе составил к 35 дню 22, 0±0, 17%, превысив уровень фагоцитарной активности нейтрофилов крови поросят контрольной группы в 1, 3 раза (Р>=0, 95). В конце исследовании этот показатель был ниже, по сравнению с контрольным уровнем.
Низкие дозы маточного молочка вызывали в организме поросят более выраженное повышение уровня фагоцитоза, по сравнению с низкими дозами прополиса, и особенно цветочной пыльцы. В крови животных этой группы уровень фагоцитоза достиг своего максимума также к 35 дню и составил 28, 9±0, 21 %, что повышало контрольный показатель в 1, 72 раза (Р>=0, 95). В конце опытов она была выше значения поросят контрольной группы в 1, 27 раза (Р>=0, 95) и равнялась 21, 0±0, 17 %.
Более высокой была фагоцитарная активность нейтрофилов крови поросят, получавших продукты пчеловодства в средних дозах. Процесс повышения показателя фагоцитоза продолжался в группах с прополисом и цветочной пыльцой до 35 дня опыта, с маточным молочком – до 21 дня. К этим срокам фагоцитарная активность нейтрофилов, соответственно составила: 42, 0±0, 15 %, 34, 8±0, 20 % и 46, 1± 0, 13 %, что было выше его уровня у поросят контрольной группы, на эти сроки, соответственно в 2, 5; 2, 07 и в 2, 84 раза (Р>=0, 95). В конце эксперимента показатели фагоцитоза крови поросят продолжали превышать уровень контроля в 2, 24; 1, 76 и в 2, 24 раза (Р>=0, 95), соответственно составив 37, 0±0, 18 %, 29, 2±0, 15 % и 40, 0±0, 24 %.
Высокие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка вызывали значительные колебания фагоцитарной активности нейтрофилов крови. В начале опыта во всех группах, в различной степени интенсивности, наблюдалось резкое повышение уровня фагоцитоза. Этот процесс отмечался до 7 дня эксперимента и не достигал максимального уровня поросят, получавших средние дозы этих продуктов пчеловодства. В последующие сроки шло резкое снижение активности фагоцитоза, которое нарастало до 35 дня опытов. К 60 дню опытов фагоцитарная активность нейтрофилов крови поросят этих групп, хотя и незначительно повысилась, но не достигла даже уровня контрольных животных. Она составила, соответственно 12, 8±0, 20 %, 14, 9±0, 23 % и 9, 9±0, 18 %, что было ниже контрольной цифры в 1, 28;1, 1 и в 1, 66 раза (Р>=0, 95).
Заключение. Анализ данных по влиянию разных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на факторы естественной резистентности показал, что наиболее оптимальными явились средние дозы, которые способствовали повышению факторов естественной резистентности (комплементарной и бактерицидной активности сыворотки крови и фагоцитарной активности лейкоцитов крови) до уровня высокой сопротивляемости организма и поддержания его устойчивости к постоянно поступающим извне и развивающимся внутри него неблагоприятным факторам. Наиболее активное воздействие на общую резистентность организма оказывало маточное молочко, несколько уступал ему прополис, и более умеренно действовала на естественные факторы устойчивости цветочная пыльца.
Библиографическая ссылка
Маннапова Р.Т., Кутлин Ю.Н. ВЛИЯНИЕ РАЗНЫХ ДОЗ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРОДУКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА НА ЕСТЕСТВЕННУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ЖИВОТНЫХ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 3. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=24451 (дата обращения: 06.10.2024).