Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,813

ОЦЕНКА АКТИВНОСТИ ГЛИКОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В ГРАНУЛЕМАХ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГРАНУЛЕМАТОЗНОМ ПЕРИОДОНТИТЕ

Адамчик А.А. 1 Будзинский Н.Э. 2 Сирак А.Г. 2 Дыгов Э.А. 2 Гатило Ю.Ю. 2
1 ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет Минздрава России»
2 ГБОУ ВПО «Ставропольский государственный медицинский университет Минздрава России»
В статье проводится гистохимическое изучение активности окислительно-восстановительных, гликолитических ферментов (сукцинатдегидрогеназы, цитохромоксидазы, лактат- и малатдегидрогеназы) и фосфатаз, проведенное на 55 гранулемах, взятых при удалении зубов с диагнозом хронический гранулематозный периодонтит. Установлено нарушение сосудистой проницаемости в образующих гранулему тканях и существование очагов аллергизации в организме. В ранних фазах развития гранулематозного периодонтита наблюдается усиление активности окислительно-восстановительных, гликолитических и фосфатазных ферментов в клетках эпителия, соединительной ткани, в мембранных и волокнистых структурах стенок мелких и более крупных кровеносных сосудов гранулем. В гранулемах с затихшим воспалительным процессом и фиброзным превращением их тканей отмечается низкая оксиредуктазная и фосфатазная активность. Обострения хронического гранулематозного периодонтита сопровождаются увеличением сосудистой проницаемости, усилением активности окислительно-восстановительных, фосфатазных ферментов в клеточных и мембранно-волокнистых структурах
гранулема
фосфатаза
биоциноз
гомеостаз полости рта
гликолитические ферменты
периодонтит
1. Арушанян Э.Б. Временная динамика принудительного плавания крыс как адекватный критерий оценки специфической активности антидепрессантов /Арушанян Э.Б., Щетинин Е.В., Батурин В.А. //Экспериментальная и клиническая фармакология. 1990. - Т. 53. - № 5. - С. 64-67.
2. Арушанян Э.Б. Стриатные дофаминергические механизмы и специфическая активность антидепрессантов/Арушанян Э.Б., Щетинин Е.В.//Экспериментальная и клиническая фармакология. - 1994. - Т. 57. - № 3. - С. 60-64.
3. Будзинский Н.Э. Определение антимикробной активности мирамистина, иммобилизованного на композиционном полисорбе, на микрофлору корневых каналов при остром и обострившемся хроническом периодонтите и процесс остеофикации в эксперименте на животных / Н.Э.Будзинский, С.В.Сирак, Е.М.Максимова, А.Г.Сирак // Фундаментальные исследования. - 2013. - №7-3. - С. 518-522.
4. Будзинский Н.Э. Особенности лечения хронического верхушечного периодонтита с использованием мирамистина, иммобилизованного на композиционном полисорбе / Н.Э.Будзинский, С.В.Сирак // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - №3. - С. 133.
5. Григорьянц Л.А. Показания и эффективность использования различных хирургических вмешательств при лечении больных с одонтогенным гайморитом, вызванным выведением пломбировочного материала в верхнечелюстной синус. / Л.А.Григорьянц, С.В.Сирак, Р.С.Зекерьяев, К.Э.Арутюнян // Стоматология. - 2007. - Т.86, №3. - С.42-46.
6. Григорьян А.А. Разработка и клиническое применение нового ранозаживляющего средства для лечения заболеваний слизистой оболочки полости рта у детей и подростков /Григорьян А.А., Сирак С.В., Сирак А.Г., Ханова С.А. //Современные проблемы науки и образования. - 2013. - № 2. - С. 41.
7. Сирак С.В. Профилактика кариеса и воспалительных заболеваний пародонта с использованием зубных эликсиров / С.В.Сирак, И.М.Быков, А.Г.Сирак, Л.В.Акопова // Кубанский научный медицинский вестник. – 2013. – №6 (141). – С. 166-169.
8. Сирак С.В. Изучение противовоспалительных и регенераторных свойств стоматологического геля на основе растительных компонентов, глюкозамина гидрохлорида и димексида в эксперименте / С.В.Сирак, М.В.Зекерьяева // Пародонтология. - 2010. - Т.15, №1. - С. 46-50.
9. Сирак С.В. Способ лечения радикулярной кисты челюсти /Сирак С.В., Федурченко А.В., Сирак А.Г., Мажаренко Т.Г.// Патент на изобретение RUS 2326648 09.01.2007
10. Сирак С.В. Осложнения, возникающие на этапе пломбирования корневых каналов зубов, их прогнозирование и профилактика / С.В.Сирак, И.А.Шаповалова, И.А.Копылова // Эндодонтия Today. - 2009. - №1. - С. 23-25.
11. Сирак С.В. Особенности выбора антимикробных препаратов для местного лечения воспалительных заболеваний пародонта у детей и подростков / С.В.Сирак, И.А.Шаповалова, Ю.Н.Пугина, А.К.Лолаева, О.В.Афанасьева, М.В.Локтионова // Стоматология детского возраста и профилактика. - 2008. - Т.7. - №4. - С. 61-63.
12. Сирак С.В. Изучение морфологических изменений в пульпе зубов экспериментальных животных при лечении глубокого кариеса и острого очагового пульпита / С.В.Сирак, А.Г.Сирак, И.А.Копылова, А.К.Бирагова // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2011. - Т. 23, №3. - С. 29-33.
13. Сирак А.Г. Морфофункциональные изменения в пульпе зубов экспериментальных животных при лечении глубокого кариеса и острого очагового пульпита с использованием разработанных лекарственных композиций / А.Г.Сирак, С.В.Сирак // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - №2. - С. 44.
14. Сирак С.В. Опыт использования местных ранозаживляющих средств при лечении вульгарной пузырчатки с локализацией на слизистой оболочке полости рта и губах/Сирак С.В., Чеботарев В.В., Сирак А.Г., Григорьян А.А.//Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2013. - Т. 8. - № 1. - С. 59-62.
15. Сирак С.В. Использование поликомпонентной адгезивной мази в сочетании с иммуномодулирующим препаратом в комплексной терапии пузырчатки/Сирак С.В., Копылова И.А., Чеботарев В.В., Аль-асфари Ф.М.С.//Пародонтология. - 2012. - Т. 17. - № 2. - С. 62-65.
16. Сирак С.В. Стоматологическая заболеваемость взрослого населения основных климатогеографических зон Ставропольского края/Сирак С.В.//Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Ставропольская государственная медицинская академия. Ставрополь, 2003.
17. Сирак С.В. Оценка риска осложнений эндодонтических манипуляций на основе показателей анатомо-топографического строения нижней челюсти/Сирак С.В., Коробкеев А.А., Шаповалова И.А., Михайленко А.А.//Эндодонтия Today. - 2008. - № 2. - С. 55-60.
18. Слетов А.А. Экспериментальное определение регенераторного потенциала клеток костного мозга/Слетов А.А., Переверзев Р.В., Ибрагимов И.М., Кодзоков Б.А., Сирак С.В.//Стоматология для всех. - 2012. - № 2. - С. 29-31.
19. Страчунский Л.С. Сравнительная активность антибактериальных препаратов, входящих в лекарственные формы для местного применения, в отношении Staphylococcus aureus: результаты российского многоцентрового исследования / Л.С.Страчунский, А.В.Дехнич, Ю.А.Белькова, Г.Е.Афиногенов, Л.И.Ахметова, Л.Г.Боронина, Е.Н.Гугуцидзе и др. // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2002. - Т.4, №2. - С. 157-163.
20. Grimm Dr.W.D. Сomplex, three-dimensional reconstruction of critical size defects following delayed implant placement using stem cell-containing subepithelial connective tissue graft and allogenic human bone blocks for horizontal alveolar bone augmentation:a case report as proof of clinical study principles/Grimm Dr.W.D., Plöger Dr.M., Schau Dr.I., Vukovic Dr.M.A., Shchetinin E., Akkalaev A.B., Avanesian R.A., Sirak S.V.//Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2014. - Т. 9. - № 2 (34). - С. 131-133.
21. Grimm Dr.W.D. Рrefabricated 3d allogenic bone block in conjunction with stem cell-containing subepithelial connective tissue graft for horizontal alveolar bone augmentation:a case report as proof of clinical study principles/Grimm W.D., Plöger M., Schau I., Vukovic M.A., Shchetinin E., Akkalaev A.B., Arutunov A.V., Sirak S.V.//Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2014. - Т. 9. - № 2 (34). - С. 175-178.
22. Sirak S.V. Сlinical and morphological substantiation of treatment of odontogenic cysts of the maxilla / S.V. Sirak, A.V. Arutyunov, E.V. Shchetinin, A.G. Sirak, A.B. Akkalaev, D.V. Mikhalchenko / Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2014. - V.5, №5. - P.682-690.
23. Sirak S.V. Microbiocenosis of oral cavity in patients with dental implants and over-dentures / S.V. Sirak, R.A. Avanesyan, A.B. Akkalaev, M.K. Demurova, E.A. Dyagtyar, A.G. Sirak // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2014. - Т. 5. - №5. - С. 698-704.
Известно, что зубные гранулемы, как очаги хронической инфекции, вызывают аллергическую реакцию организма в результате непрерывного поступления из гранулемы микробов и продуктов распада тканей [3, 4, 5]. Причинами повышения активности окислительно-восстановительных и гликолитических ферментов могут являться стресс [1, 2], снижение реактивности организма, воспаление [19, 23]. В литературе описано несколько исследований, посвященных гистохимическому изучению ферментативных реакций в гранулемах, морфологии и гистохимии гранулематозных периодонтитов, в которых гранулема рассматривается как одонтогенный хрониосептический очаг [7, 13, 20]. Так как продукты распада микробов и тканей влияют на ферментативные процессы, ряд авторов рассматривают ферментативные сдвиги в гранулемах во взаимосвязи с целым организмом [8, 9, 11, 12, 22]. Есть основание полагать также, что состояние ферментативной активности в соответствующих структурах отражает направленность, выраженность инфекционного процесса, а главное, до некоторой степени определяет сосудисто-тканевую проницаемость [16, 17, 18, 21]. Последнее является одним из важнейших моментов в хроническом воспалительном процессе, позволяющим судить о связи длительно текущего продуктивного воспаления с другими органами и системами человеческого организма [1, 2, 6, 13, 14, 15].

Цель исследования: анализ активности окислительно-восстановительных и фосфатазных ферментов в гранулемах у больных, страдающих гранулематозным периодонтитом.

Материалы и методы исследования. Всего было изучено 55 гранулем, взятых на исследование у лиц молодого возраста, преимущественно у детей после удаления зубов с диагнозом «хронический гранулематозный периодонтит». Небольшая часть гранулем получены при удалении постоянных зубов. На выделенных из гранулем препаратах проведены гистохимические реакции на окислительно-восстановительные ферменты по методам Фарбера и Пирса; на фосфатазы - по методам Гомори и Такеучи [9]. При оценке окислительно-восстановительного цикла ферментов определяли сукциндегидрогеназу, цитохромоксидазу, алкогольдегидрогеназу и лактатдегидрогеназу. Из гидролитических фосфатазных ферментов определяли кислую и щелочную фосфатазу. Для морфологических исследований использовали окраску гематоксилин-эозином, по Бильшовскому, Маллори и по Ван-Гизон.

На основании общей морфологической картины все исследуемые гранулемы разделили на три группы: эпителиальные, сложные и смешанные. Последние встречались довольно часто и представляли собой либо комбинацию из эпителиальных и сложных, либо характеризовались наличием одной капсулы, объединяющей разные гранулемы возле одного и того же зуба. Поскольку наибольший интерес представлял характер воспалительного процесса, его течение и стадии развития, все гранулемы схематически разделили на 3 группы. В первую группу включали гранулемы с самыми ранними фазами течения продуктивного воспаления, богатые сосудами и относительно молодыми клеточными элементами различного происхождения (рис. 1-а). Гранулемы второй группы представлены гранулематозным воспалением, где преобладали фибробластические реакции, явления коллагенизации и гиалиноза (рис. 1-б). Самая большая, третья группа включала гранулемы с рецидивами острого воспаления - свежими очагами воспалительной инфильтрации среди грубых пучков зрелой волокнистой соединительной ткани (рис. 1-в).

  

а                                                         б                                             в

Рис. 1. Микропрепараты. а - ранние фазы продуктивного воспаления (первая группа). Окраска альциановым синим. Ок. 10, об. 20; б - гранулематозное воспаление с преобладанием фибробластических реакций, явлений коллагенизации и гиалиноза (вторая группа). Окраска по Ван-Гизон. Ок. 10, об. 10; в - гранулемы с рецидивами острого воспаления и очагами воспалительной инфильтрации (третья группа). Окраска по Маллори. Ок. 10, об. 20

 

Гистохимический анализ ферментов в гранулемах наиболее ранних фаз развития продуктивного воспаления показал, что энзиматическая активность здесь исключительно высока и проявляется, по существу, почти во всех структурах. Ферменты окислительно-восстановительного цикла, среди них энзимы дыхательной цепочки - сукциндегидрогеназа, цитохромоксидаза характеризуются значительной активностью. Менее активными по сравнению с окислительно-восстановительными оказались гликолитические ферменты - алкоголь и лактатдегидрогеназа.

Высокий окислительно-восстановительный потенциал отмечен в фибробластах, микрофагальных элементах и плазматических клетках. Более низкая ферментативная активность выявлена у лейкоцитов, лимфоидных клеток и макрофагов. Волокнистые структуры гранулемы, в том числе волокна, формирующие капсулу, не содержат зерен формазана, энзиматическая активность в них не определяется, однако внутренняя оболочка стенок мельчайших и средних кровеносных сосудов и в толще грануляционной ткани, и в капсуле является ферментативно активной. В эпителиальных гранулемах высокая ферментативная активность отмечалась в цитоплазме эпителиальных клеток, особенно увеличиваясь со снижением степени дифференцировки указанных элементов.

Активность ферментов гликолитического цикла в гранулематозных тканях проявлялась в тех же структурах, что и у ферментов дыхания, но значительно ниже. Таким образом, при продуктивном воспалении, когда грануляционная ткань состоит в основном из круглых и полиморфных клеток и изобилует тонкостенными мелкими кровеносными сосудами, имеют место повышенные ферментативные реакции в большей мере окислительно-восстановительного цикла и в меньшей гликолиза, причем проявляется эта энзиматическая активность в соединительнотканных и эпителиальных элементах.

Гистохимическое определение щелочной фосфатазы в гранулемах показало довольно высокое ее содержание в стенках капилляров, мелких и средних кровеносных сосудов. Накапливается щелочная фосфатаза в тонких волокнистых структурах, особенно активной оказалась оболочка гранулемы, где выявлено много мелких кровеносных сосудов.

В эпителиальной петлистой сети щелочная фосфатаза почти отсутствует и только клеточные мембраны и ядра до некоторой степени обладают фосфатазной активностью. Соединительнотканные клетки содержат этот фермент в небольших количествах; среди других соединительнотканных элементов, яснее всего на препаратах выступали фосфатазноактивные фибробласты и фиброциты. Другой фермент - кислая фосфатаза также отражает усиленный метаболизм в воспаленных тканях, однако повышенная активность данного фермента подчеркивает еще одну сторону воспалительного процесса, а именно пролиферативную его стадию и превалирование этой стадии над другими. Высокой активностью отличаются размножающиеся соединительнотканные клетки, их ядра, а также растущие и пролиферирующие эпителиальные тяжи. Много фермента и в эндотелии капилляров. В связи с наличием усиленных обменных процессов установлено, что кислая фосфатаза в большей мере накапливается в лизосомах и эндоплазматической сети клеточных элементов хронического продуктивного воспаления. Во 2-й группе гранулем, в ходе развития которых имело место хроническое воспаление, а в клеточном составе преобладали гистиоциты и фибробласты и широким планом развернулись фибробластические реакции, т.е., по существу, сформировался очаг фиброзной соединительной ткани, ферментативная активность уменьшалась. Это уменьшение свойственно всем клеточным и волокнистым структурам [12, 22]. Падает активность окислительно-восстановительных энзимов также в соединительнотканных и эпителиальных клетках. Гистиоцитарные и фибробластические элементы характеризуются крайне незначительной активностью. Запустевающие кровеносные сосуды, особенно вытянутые клетки и волокна капсулы гранулемы, почти не давали реакции на ферменты; в равной мере нет их и в местах гиалиноза, лишенных клеток. Слабая ферментативная активность обнаруживалась в цитоплазме эпителия. В ткани гранулемы еще ниже активность ферментов гликолитического пути - алкоголь и лактатдегидрогеназ. В такой же мере снижалась активность щелочной фосфатазы. Стенки средних и более крупных сосудов еще оставались фосфатазно-активными, в фиброзной и гиалинизированной ткани щелочная фосфатаза, отсутствовала. Значительно изменялся обмен кислой фосфатазы - ее активность сохранялась только в ядерных субстанциях клеток соединительной и эпителиальной ткани. Угнетение активности энзиматических реакций в ходе затихающего продуктивного периодонтита, сопровождалась уменьшением сосудисто-тканевой проницаемости. В гранулемах 3-й группы вновь появлялись воспалительные фокусы, в них нарастала активность окислительно-восстановительных и фосфатазных ферментов. Усиление ферментативной активности происходило не только в местах лейкоцитарной и лимфоцитарной инфильтрации и круглоклеточной пролиферации, но также в эпителии и стенках сосудистых разветвлений гранулемы, клеточно-волокнистых ее структурах далеко за пределами воспалительных очагов. Темп и объем ферментативных реакций вырос, что свидетельствует об увеличении сосудисто-тканевой проницаемости при экзацербации воспалительного процесса.

Заключение. Для подтверждения ликвидации патологического процесса в периапикальных тканях при оценке клинических результатов терапии гранулематозного периодонтита достаточно информативным является исследование активности окислительно-восстановительных, гликолитических ферментов (сукцинатдегидрогеназы, цитохромоксидазы, лактат- и малатдегидрогеназы) и фосфатаз. Кроме этого, следует учитывать общее состояние, реактивность организма при определении показаний к радикальному лечению хронического гранулематозного периодонтита - удалению очага воспаления во всех сомнительных или малоэффективных случаях терапии.

Рецензенты:

Слетов А.А., д.м.н., профессор кафедры челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии ГБОУ ВПО «Ставропольский государственный медицинский университет», г.Ставрополь;

Калиниченко А.А., д.м.н., главный врач стоматологической клиники «Фитодент», г. Михайловск.

 


Библиографическая ссылка

Адамчик А.А., Будзинский Н.Э., Сирак А.Г., Дыгов Э.А., Гатило Ю.Ю. ОЦЕНКА АКТИВНОСТИ ГЛИКОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В ГРАНУЛЕМАХ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГРАНУЛЕМАТОЗНОМ ПЕРИОДОНТИТЕ // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=23965 (дата обращения: 13.08.2020).


Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074