В основе многих метаболитических процессов в организме лежат окислительно-восстановительные реакции. Среди них особую роль играют свободнорадикальные реакции, при которых образуются перекисные соединения [6]. Процессам свободнорадикального окисления (СРО) подвержены определенные белки, аминокислоты, углеводы и особенно липиды за счет входящих в их состав полиненасыщенных жирных кислот. СРО начинается с образования первичного активного центра реакций - свободного радикала (СР), имеющего в одном из атомов кислорода один или несколько неспаренных электронов на внешней орбитали [1, 9, 11]. Свободные радикалы (СР) принимают участие в модуляции специфической активности ряда мембранных ферментов, синтезе простагландинов и лейкотриенов, метаболизме катехоламинов и стероидных гормонов, а также обладают антибактериальным действием, активируют процессы клеточной пролиферации и дифференцировки, инициируют реакцию окисления субстратов. Этот нормальный физиологический процесс может быть опасен, так как возможна неконтролируемая «утечка» СР, приводящая к повреждению липидных, белковых и нуклеиновых молекул и повреждению мембранных структур, нарушению функции ионных насосов и активности мембраносвязанных ферментов [8]. Поэтому понимание механизмов регуляции процессов свободнорадикального окисления может дать новые подходы к профилактике и терапии эндемических заболеваний, например скрытых форм комбинированных гипоэлементов животных, как в нашем случае с растущими свиньями (синдром дефицита Se, J и Cu в кормах и организме).
Известно, что на первом этапе свободнорадикального окисления полиненасыщенных жирных кислот в клетке происходит накопление промежуточных продуктов-гидроперекисей, которые называют первичными продуктами ПОЛ [7]. Среди различных классов реакций липидного обмена процессы СРО играют решающую роль в нормальной физиологии и биохимии, а также являются различными классами реакций липидного обмена. Процессы СРО играют решающую роль в нормальной физиологии и биохимии, а также являются универсальным неспецифическим звеном физиологических механизмов развития различных патологических синдромов, в том числе скрытых комбинированных гипомикроэлементозов животных.
Гидроперекиси метаболизируют во вторичные продукты перекисного окисления - малоновый альдегид (МДА), ацетон, гексаналь (карбонильные соединения) и ряд других вторичных продуктов ПОЛ. Альдегидные группы этих веществ способны вступать в реакцию с аминогруппами белков и нуклеотидов с образованием прочных сшивок (типа шиффовых оснований), что сопровождается повреждением биополимеров и нарушением их нормального функционирования. Вторичные соединения - диеновые конъюгаты (ДК), МДА и иные - являются «конечными» продуктами ПОЛ. Поэтому, изучая СРО и ПОЛ, мы в качестве критериев исследовали антиоксидантные ферменты - каталазу, супероксиддисмутазу и продукты пероксидации липидов: ДК, МДА, а также перекисную резистентность эритроцитов (ПРЭ), которая характеризует общее состояние антиоксидантной системы в организме.
С целью исследования липидного обмена отобрали по 20 поросят-аналогов в каждую группу и изучали влияние применяемых нами органических препаратов недостающих микроэлементов на состояние ПОЛ и антиоксидантной системы в течение месяца, когда применяли микроэлементы.
Методики определения продуктов ПОЛ и активности ферментов АОС были общепринятыми [1, 7, 9, 11], а их принципы подробно изложены в наших работах [2, 3, 4, 6]. Препараты микроэлементов мы применяли перорально, так как специфические опыты J. Dembinski et al. [10] по выяснению эффективности действия препаратов селена, вводимого в виде инъекций и per os, показали, что более высокая эффективность наблюдалась при пероральном введении селена. Применяли органические препараты селена - ДАФС-25 (в дозе 0,2 мг/кг), йода - ЙОДДАР (в дозе 0,2 мг на голову в сутки) и 0,5 мг/кг CuSO4 ежедневно в течение месяца с месячным перерывом в течение всего периода откорма поросят.
Результаты и обсуждение
Мы установили, что у контрольных животных на откорме параметры общих липидов, общего холестерина и триглицеридов находились в пределах физиологической нормы для поросят и после периода I опыта несколько выросли к 8 месяцам откорма (II опыт), что объясняется возрастными особенностями (табл. 1).
Таблица 1
Липидный статус поросят и его изменение под влиянием препаратов селена, йода и меди
Группы, n |
Показатели |
Результаты исследований |
|||||||
Возраст 85-115 дней (I опыт) |
Возраст 8 месяцев (II опыт) |
||||||||
До применения микроэлементов |
Через 48 ч |
15 суток |
30 суток |
До применения микроэлементов |
Через 48 ч |
15 суток |
30 суток |
||
I контрольная (ОР), n=20 |
Общие липиды, г/л |
2,81± 0,04 |
2,8± 0,05 |
2,77± 0,15 |
2,69± 0,07 |
2,96± 0,17 |
2,83± 0,04 |
2,81± 0,06 |
2,82± 0,07 |
Общий холестерин, ммоль/л |
1,92± 0,8 |
1,89± 0,09 |
1,92± 0,17 |
1,94± 0,16 |
1,92± 0,15 |
1,88± 0,13 |
1,74± 0,03 |
1,69± 0,06 |
|
Триглицериды, ммоль/л |
0,59± 0,03 |
0,58± 0,04 |
0,53± 0,04 |
0,59± 0,002 |
0,62± 0,04 |
0,59± 0,08 |
0,59± 0,06 |
0,59± 0,02 |
|
II опытная (ОР+ДАФС-25), n=20 |
Общие липиды, г/л |
2,82± 0,11 |
2,88± 0,07 |
2,94± 0,05 |
3,01± 0,17 |
2,81± 0,04 |
3,09± 0,12 |
3,09± 0,14 |
3,11± 0,16* |
Общий холестерин, ммоль/л |
2,4± 0,09 |
2,31± 0,14 |
2,39± 0,11 |
2,58± 0,26 |
2,83± 0,03 |
2,61± 0,13 |
2,72± 0,11 |
2,76± 0,05 |
|
Триглицериды, ммоль/л |
0,61± 0,05 |
0,67± 0,13 |
0,67± 0,16 |
0,78± 0,02* |
0,62± 0,06 |
0,81± 0,08 |
0,86± 0,01 |
0,88± 0,09* |
|
III опытная (ОР+ДАФС-25 +ЙОДДАР), n=20 |
Общие липиды, г/л |
2,79± 0,07 |
2,90± 0,08 |
3,04± 0,17 |
3,17± 0,08* |
3,09± 0,02 |
3,33± 0,07 |
3,34± 0,05 |
3,55± 0,12* |
Общий холестерин, ммоль/л |
2,14± 0,12 |
2,24± 0,15 |
2,61± 0,05 |
2,85± 0,03* |
2,01± 0,03 |
2,89± 0,12 |
2,91± 0,04 |
3,04± 0,07* |
|
Триглицериды, ммоль/л |
0,64± 0,03 |
0,71± 0,12 |
0,88± 0,03 |
0,81± 0,07* |
0,68± 0,07 |
0,95± 0,04 |
0,94± 0,050 |
0,99± 0,03* |
Уровень холестерина после 30 дней подкормки ДАФС-25 у опытных свиней не отличался от аналогичных результатов контроля, а количество триглицеридов у опытных поросят стало больше, чем в контроле и на начало опыта. В III группе уровень всех липидных параметров достоверно выше, чем в контроле (р<0,05).
ДАФС-25 и особенно комплексное влияние препаратов селена, йода и меди (III гр.) оказывали положительное влияние на параметры липидного обмена во втором опыте. Следует отметить, что достоверное влияние недостающие микроэлементы оказывают через 15 дней и в конце экспериментов, когда в III группе было общих липидов в период 85-115 дней жизни на 17,8%, общего холестерина на - 46,9% и триглицеридов - 37,3% больше, чем в контроле (р<0,05). К концу выращивания свиней (второй опыт) в III группе количество общих липидов на 30-й день вскармливания микроэлементов возросло на 23,9%, общего холестерина - на 79,9% и триглицеридов - на 67,8% относительно контроля (р<0,05). Во II группе, где применяли только один селеноорганический препарат, достоверное увеличение наблюдалось только по общим липидам (10,2%) и триглицеридам (49,2%).
Для дальнейшего выяснения физиологического механизма влияния Se, J и Cu на процессы ПОЛ и состояние АОС мы исследовали показатели перекисного окисления липидов и состояния антиоксидантной защиты животных в возрасте 3-4 и 8-9 месяцев жизни (табл. 2).
Таблица 2
Влияние селена, йода и меди на показатели ПОЛ и АОС растущих поросят
Гру-ппы, n=5 |
Показа-тели |
Результаты исследований |
|||||||
Возраст 85 дней (I опыт) |
Возраст 8 месяцев (II опыт) |
||||||||
До применения микроэлеме-нтов |
Через 48 ч |
15 суток |
30 суток |
До применения микроэлеме-нтов |
Через 48 ч |
15 суток |
30 суток |
||
I |
ДК, мкМ/л |
2,04±0,13 |
2,11± 0,15 |
2,07± 0,27 |
2,03± 0,11 |
2,42±0,19 |
2,24± 0,16 |
2,44± 0,18 |
2,34± 0,19 |
II |
2,01±0,08 |
2,12± 0,04 |
1,99± 0,07* |
1,82± 0,13* |
2,39±0,07 |
2,03± 0,04 |
1,95± 0,05 |
1,72± 0,04* |
|
III |
1,92±0,02 |
1,72± 0,03* |
1,63± 0,05* |
1,49± 0,07* |
2,41±0,03 |
2,14± 0,05 |
1,76± 0,08* |
1,54± 0,07* |
|
I |
МДА, мкМ/л |
3,54±0,16 |
3,52± 0,24 |
3,47± 0,31 |
3,37± 0,09 |
3,66±0,08 |
3,51± 0,65 |
3,49± 0,16 |
4,19± 0,27 |
II |
3,63±0,08 |
3,42± 0,22 |
3,60± 0,07 |
3,02± 0,04* |
3,71±0,05 |
3,29± 0,07* |
2,62± 0,08* |
2,61± 0,05* |
|
III |
|
3,57±0,14 |
3,62± 0,21* |
2,48± 0,02 |
2,26± 0,02* |
3,59±0,04 |
3,34± 0,04 |
3,07± 0,03* |
2,01± 0,08* |
I |
Катала-за, мкМ/л |
5,81±3,1 |
5,79± 4,3 |
5,69± 0,31 |
5,75±0,2 |
5,73±0,2 |
5,90±0,3 |
5,72±0,4 |
5,75±0,4 |
II |
5,8±2,9 |
5,99± 2,1 |
6,11± 2,2* |
5,96±0,8 |
5,62±0,5 |
5,89±0,3 |
6,05± 0,3* |
5,87±0,2 |
|
III |
5,91±1,2 |
6,08± 4,6* |
6,48± 0,39* |
6,23± 0,1* |
5,71±0,2 |
5,95±0,1 |
6,48± 0,2* |
6,15± 0,3* |
|
I |
Суперо-ксидди-смутаза, ед/мин |
281±14 |
279±15 |
282±17 |
281±13 |
246±19 |
241±22 |
245±16 |
251±23 |
II |
279±18 |
292±13 |
313±12* |
315±13* |
241±21 |
269±20 |
278±15 |
288±12* |
|
III |
282±15 |
299±19 |
346±16* |
345±15* |
247±16 |
279±21 |
279±11 |
298±17* |
|
I |
ПРЭ, % |
3,63±0,16 |
3,61± 0,09 |
3,62± 0,07 |
3,62± 0,04 |
3,72±0,13 |
3,72± 0,09 |
3,72± 0,09 |
3,74± 0,07 |
II |
3,75±0,09 |
3,52± 0,15 |
3,27± 0,04* |
3,51± 0,06* |
3,47±0,13 |
3,22± 0,14 |
3,06± 0,04* |
2,35± 0,04 |
|
III |
3,84±0,07 |
3,54± 0,12 |
3,42± 0,07* |
2,63± 0,15* |
3,79±0,14 |
3,31± 0,06 |
3,02± 0,09* |
2,26± 0,08* |
р<0,05 относительно контроля
Диеновые конъюгаты (ДК) у животных в первом опыте уменьшились во II группе на 10,0%, в III - на 22,4%. А во втором эксперименте во II группе - соответственно: на 28,1% и в III - на 36,1% (р<0,05) от начала опыта. Уровень малонового диальдегида (МДА) уменьшается у 85-115-дневных поросят в первом опыте на 16,8% во II группе, а в III - на 26,2%. Во втором опыте (возраст 8 месяцев) МДА у свиней II группы снизился на 29,7%, а в III - на 36,7%. Уровень ДК и МДА у контрольных животных не изменялся в течение всего времени исследования (р>0,5), а в опытных группах ДК достоверно снизился (р<0,05). Недостающие Se, J и Cu положительно влияли на антиоксидантный статус животных. Активность каталазы опытных животных повысилась на 2,8% в первом опыте и на 4,5% во втором опыте во II группе, а в III группе соответственно на 5,4% и 4,1%, а СОД - 6,1% и 19,5%; 22,3% и 20,6% относительно контрольных показателей (р<0,05).
Процент гемолизируемых эритроцитов в крови животных в первом опыте во II группе к концу эксперимента снизился на 3,7%, а в III группе - на 26,2%, а во втором эксперименте - соответственно на 33,7% и на 40,4% относительно исходных данных. В контроле ПРЭ в течение опытов не изменился (р>0,5).
Следовательно, применение органических препаратов, недостающих в среде и кормах селена (II группа) и Se, Cu и J (III группа), в течение месяца per os с месячным перерывом снижает число эритроцитов, подверженных гемолизу, перекисью водорода, т.е. стабилизирует антиоксидантную систему. Лучший результат всех исследуемых параметров ПОЛ и АОС получен в III группе поросят на откорме, где применяемые комплексно Se, J и Cu снижают интенсивность течения процессов ПОЛ в организме и стабилизируют работу антиоксидантной системы, повышая активность антиоксидантных ферментов. Это однозначно способствует улучшению процессов метаболизма, повышению интегративной функции роста, развития и прироста массы растущих поросят.
Функция прироста живой массы животных опытных групп относительно контроля обусловлена их лучшим общим физиологическим состоянием: высоким уровнем метаболизма, улучшением процессов гемопоэза [4], повышением функций антиоксидантной и эндокринной систем организма растущих животных II и III групп. Подопытные животные II группы, особенно III группы, в 9-месячном возрасте имели лучшую функцию переваримости корма, более крупные и хорошо развитые важнейшие внутренние органы в сравнении с результатами контроля (печень в контроле - 1,57±0,04; II группа - 1,72±0,03 и III группа - 1,92±0,06 кг; сердце - соответственно: 0,28±0,01; 0,31±0,01 и 0,41±0,02 кг; легкие - 0,68±0,02; 0,81±0,02 и 0,96±0,03кг; селезенка - 0,15±0,03; 0,16±0,02 и 0,21±0,03 кг и внутренний жир - 1,64±0,03; 1,93±0,01 и 2,21±0,04 кг).
Таблица 3
Аминокислотная характеристика мышц свиней (в мг/100г ткани мышц спины)
Название аминокислот |
Контроль (ОР) |
I опытная группа (ОР+ДАФС-25) |
II опытная группа (ОР+ДАФС-25+ CuSO4+ «ЙОДДАР») |
Незаменимые аминокислоты |
|||
Лейцин |
1299±29,4 |
1501±18,8 |
1403±26,6 |
Изолейцин |
1014±28,1 |
1068±19,4 |
1104±23,3 |
Валин |
972±24,2 |
1124±16,8 |
1218±29,8 |
Метионин |
521±13,1 |
609±8,2 |
628±19,1* |
Лизин |
1614±32,6 |
1711±28,6 |
1716±28,7 |
Треонин |
1012±17,7 |
1141±38,5 |
1201±24,9 |
Фенилаланин |
808±12,9 |
809±10,1 |
822±10,7 |
Триптофан |
235±11,4 |
249±14,7 |
268±7,86 |
Сумма: |
7457±19,9 |
8153±16,7 |
8245±23,7* |
Заменимые аминокислоты |
|||
Аргинин |
1061±18,6 |
1106±17,3 |
1111±12,4 |
Аланин |
1106±19,7 |
1112±18,8 |
1132±16,4 |
Аспарагин |
1603±24,7 |
1601±16,8 |
1609±16,4 |
Глицин |
815±11,6 |
825±10,5 |
832±10,5 |
Гистидин |
762±14,8 |
811±14,2 |
831±8,81* |
Глутамин |
3201±24,8 |
3202±24,8 |
3211±32,8 |
Пролин |
498±8,9 |
491±10,4 |
511±12,2 |
Оксипролин |
47±3,5 |
50±2,8 |
45±1,4 |
Цистин |
244±13,7 |
252±9,94 |
257±15,3* |
Тирозин |
671±15,5 |
662±14,7 |
691±12,2 |
Серин |
668±8,5 |
675±9,8 |
689±11,5 |
Сумма: |
10476±15,9 |
10739±19,1 |
10879±18,0* |
Общее количество аминокислот: |
18064±29,1 |
18762±15,2 |
19158±14,5* |
Суммарно аминокислотная характеристика мышц животных опытных групп (II - 18762±15,2; III - 19158±14,5 мг/100 г) превосходила контроль - 18064±29,1 мг/100 г (р<0,05). При этом количество заменимых аминокислот опытных и контрольных животных было выше суммы незаменимых. Учитывая, что общее количество аминокислот и микроэлементов в опыте было выше контрольных показателей, можно считать, что мясо опытных животных было более полноценным, особенно в III группе. Каких-либо патологических изменений в гистологическом строении печени и почек у животных опытных групп не было обнаружено, а увеличение объема клеток и их ядер, наличие мелкой зернистости (цитоплазмы), светлой кариоплазмы указывает на усиление обмена веществ в этих клетках печени по сравнению с состоянием аналогичных клеток животных контрольных групп [4].
Количество меди, железа, кобальта, цинка, селена и йода в органах и тканях животных в конце опыта в опытных группах было выше, чем у животных контрольной группы [2-6]. Увеличение уровня метаболитических процессов у растущих опытных всеядных животных, получавших недостающие в кормах Se (II группа) и особенно Se, I и Cu (III группа) дополнительно к основному рациону, позволило животным III группы достичь массы контроля на один месяц раньше. Масса животных в конце опыта в контроле составила 91,01±2,58 кг, во II группе - 98,02±5,39 кг и III группе- 107,09±3,9 кг (р<0,05). При этом рентабельность производства в III группе была на 15% выше контроля, где этот показатель был равен 28%, что весьма экономически выгодно.
Заключение
Общее функциональное состояние растущих свиней в геохимических условиях региона Нижней Волги характеризуется низким уровнем практически всех физиологических процессов. При этом организм животных постоянно испытывает стресс-факторы недостаточного количества микроэлементов (Sе, Со, I и частично Сu) в среде и кормах. Это приводит к нарушениям метаболизма микроэлементов, гемопоэза, работы ПОЛ и антиоксидантной системы и, как следствие, к скрытым формам комбинированных гипомикроэлементозов у животных, в том числе у растущих свиней, что следует корректировать обогащением кормов рациона недостающими микроэлементами (Se, J и Cu) в биогеохимической ситуации Астраханской области. Все вышеизложенное предопределяет повышения интегративной функции роста, развития и продуктивности поросят, уменьшает сроки откорма и способствует дополнительному получению высококачественного мяса, что вносит вклад в решение проблемы импортозамещения и продовольственной безопасности России.
Исследования выполнены при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 14-08-01292 а.
Рецензенты:
Пучков М.Ю., д.с.-х.н., профессор, директор Всероссийского научно-исследовательского института орошаемого овощеводства и бахчеводства, г. Астрахань;
Федорова Н.Н., д.м.н., профессор, профессор кафедры «Гидробиология и общая экология» Астраханского государственного технического университета, г. Астрахань.
Библиографическая ссылка
Воробьев В.И., Щербакова Е.Н., Захаркина Н.И. ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ И АНТИОКСИДАНТНАЯ ЗАЩИТА У СВИНЕЙ В ПРОЦЕССЕ ПОСТНАТАЛЬНОГО ОНТОГЕНЕЗА // Современные проблемы науки и образования. 2015. № 2-3. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=23407 (дата обращения: 01.05.2025).