Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

ЭНДОГЕННЫЕ ПЕПТИДЫ В ДИАГНОСТИКЕ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ ЭНТЕРОПАТИИ У ДЕТЕЙ

Шуматова Т.А. 1 Зернова Е.С. 1 Катенкова Э.Ю. 1 Шишацкая С.Н. 1
1 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Изучена информативность определения содержания белков, связывающих жирные кислоты, белка, повышающего проницаемость мембран, эотаксина в сыворотке крови и эозинофильного катионного протеина в копрофильтрате у детей грудного возраста с клиникой персистирующей диареи. Обследовано 30 детей с аллергической энтеропатией, индуцированной белком коровьего молока, 30 детей с вторичной лактазной недостаточностью и 30 здоровых детей раннего возраста. Выявлено достоверное повышение уровня кишечной и печеночной форм белков, связывающих жирные кислоты, белка, повышающего проницаемость мембран, эотаксина и эозинофильного катионного протеина у детей с непереносимостью белков коровьего молока (НБКМ) (р<0,05). Данные маркеры позволяют оценить уровень и глубину поражения пищеварительного тракта у детей. Полученные нами результаты расширяют представления о патогенезе НБКМ, позволяют оптимизировать неинвазивную диагностику заболевания и могут быть рекомендованы для использования в клинической практике в сложных диагностических случаях.
аллергическая энтеропатия
дети раннего возраста
непереносимость белков коровьего молока
белки
связывающие жирные кислоты
белок
повышающий проницаемость мембран
эотаксин
эозинофильный катионный протеин
1. Аллергия к белкам коровьего молока. Подходы и алгоритмы лечения / Е.А. Вишнева, Л.С. Намазова-Баранова, Т.В. Турти и др. // Вопросы современной педиатрии. – 2012. – Т. 11. — № 3. – С. 65–69.
2. Гастроинтестинальные проявления аллергии на белок коровьего молока у детей / С.Г. Макарова, Л.С. Намазова-Баранова, Т.Э. Боровик и др. // Медицинский совет. — 2014. — № 1. — Р. 28–34.
3. Клинико-лабораторный анализ энтеральной нутритивной поддержки детей с тяжелыми формами нарушения кишечного всасывания / Т.А. Шуматова, Н.Г. Приходченко, И.В. Ефремова и др. // Тихоокеанский медицинский журнал. – 2013. — № 1. – С. 38–41.
4. Многообразие клинических проявлений аллергии к белкам коровьего молока у детей раннего возраста и современные возможности диетотерапии / Т.А. Филатова, Т.Е. Лаврова // Российский вестник перинатологии и педиатрии. — 2011. — № 3. – С. 88–92.
5. Принципы персонализированной диетотерапии при аллергии к белкам коровьего молока у детей / В.А. Ревякина, И.А. Ларькова, Е.Д. Кувшинова и др. // Российский аллергологический журнал. – 2015. – № 2. – С. 47–51.
6. Эозинофильные воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта и пищевая аллергия у детей / П.В. Шумилов, М.И. Дубровская, О.В. Юдина и др. // Практическая медицина. — 2010. — № 3. — С. 16–25.
7. Gajda A. M., Storch J. Enterocyte fatty acid-binding proteins (FABPs): different functions of liver and intestinal FABPs in the intestine / A. M. Gajda, J. Storch // Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids. — 2015 Feb. — № 93. — Р. 9–16.
8. Intestinal fatty acid-binding protein (I-FABP) as a new biomarker for intestinal diseases / Н. Funaoka, Т. Kanda, Н. Fujii et al. // The Japanese Journal Of Clinical Pathology. — 2010 Feb. — Vol. 58. № 2. — P. 162–168.
Повсеместный рост распространенности аллергических заболеваний очевиден [1, 2, 4, 6]. У детей раннего возраста проблема роста аллергии особенно актуальна ввиду того, что на практике возникают определенные сложности в выявлении причинно-значимого аллергена. По данным Всемирной аллергологической организации белки коровьего молока вместе с белками куриных яиц являются основными триггерами пищевой аллергии у детей раннего возраста [2]. Аллергия к белкам коровьего молока (АБКМ) у детей скрывается под масками многочисленных заболеваний и может проявляться расстройствами дыхательной, пищеварительной систем, вплоть до развития анафилаксии [4, 6]. Основа лечения АБКМ - диетотерапия [1, 5]. Несмотря на широкий ассортимент на отечественном рынке детского питания и лечебных смесей, правильный выбор специализированного продукта для ребенка с аллергией вызывает определенные трудности не только для родителей, но и для врачей. Для подбора правильного питания необходима своевременная и точная диагностика. Однако грудной возраст, тяжесть клинических проявлений ограничивают в данной возрастной группе применение провокационной диеты, а также комплекса диагностических исследований инвазивного характера, включая иммунологические, морфологические, генетические методы. Неспецифичность клинических проявлений АБКМ, ограничения в применении методов инвазивной диагностики влияют на своевременность постановки правильного диагноза, удлиняют заболевание, способствуют формированию внекишечной патологии, появлению нутритивной недостаточности, нарушают рост и развитие ребенка [3, 6]. Все эти факторы делают актуальной разработку системы раннего неинвазивного мониторинга пищевой аллергии; внедрение новых диагностических маркеров будет способствовать улучшению ранней диагностики аллергических заболеваний.

Цель исследования

Оценить информативность определения эндогенных пептидов в сыворотке крови и копрофильтратах у детей с аллергической энтеропатией для совершенствования диагностики пищевой аллергии.

Материалы и методы

Под нашим наблюдением находились 60 детей в возрасте от 6 до 12 месяцев с клиникой персистирующей диареи. В ходе исследования пациенты были разделены на 2 группы. Первую группу составили 30 детей с отягощенным аллергологическим анамнезом, рецидивирующим кожным и кишечным синдромами. У этих детей определялись полиморфные высыпания на коже с участками сухости, экскориациями, жидкий стул, вздутие живота, кишечные колики, срыгивание, беспокойство после кормления, на фоне перечисленных клинических проявлений появились недостаточные прибавки в массе тела. В соответствии со стандартами у детей этой группы был выставлен диагноз аллергической энтеропатии с непереносимостью белков коровьего молока. Во вторую группу вошли 30 больных с клиникой персистирующей кислой диареи, развившейся после эпизода кишечной инфекции, применения антибактериальной терапии, перехода на искусственное вскармливание. В соответствии со стандартами диагностики у детей этой группы был выставлен диагноз вторичной лактазной недостаточности. Группа контроля - 30 условно здоровых детей соответствующего возраста.

У всех наблюдаемых детей в копрофильтратах определяли содержание эозинофильного катионного протеина методом энзим-связанного иммуносорбентного анализа (ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay) с использованием реактивов фирмы Immundiagnostik (Германия). Для расшифровки патогенетических механизмов нарушения кишечного всасывания различного генеза в сыворотке крови у детей определяли белки, переносящие жирные кислоты, - кишечную (I-FABP) и печеночную фракции (L-FABP), а также бактерицидный белок, повышающий проницаемость мембраны клеток (BPI), и эотаксин. Данные маркеры изучали методом энзим-связанного иммуносорбентного анализа с использованием реактивов фирмы Hycult Biotech (США) на иммуноферментном автоматическом 2-планшетном анализаторе EVOLIS Twin Plus производства Bio-Rad (CША). Расчеты осуществляли путем построения калибровочной кривой с помощью компьютерной программы. Результаты статистического анализа принимались как достоверные при p<0,05. Статистическую обработку материала выполняли с помощью специализированных пакетов прикладных программ для исследований («Excel-2010» и «Statistica 6.1» for Windows).

Результаты исследования

Проведен анализ особенностей анамнеза и данных состояния здоровья детей раннего возраста с явлениями неустойчивого стула более трех недель. Нами установлено, что высокий риск развития непереносимости белков коровьего молока связан с наличием в анамнезе 9 основных факторов. Среди них со стороны матери явления пищевой непереносимости во время беременности отмечались у 22 (73%) женщин, хроническая фетоплацентарная недостаточность - у 22 (73%) будущих матерей. Со стороны ребенка перинатальное поражение ЦНС отмечено у 26 (86%) детей, раннее искусственное вскармливание - у 27 (90%) детей, применение антибактериальной терапии - у 28 (93%) детей, клиника пищевой гиперчувствительности, наличие кожного синдрома, выраженной сухости кожных покровов отмечены у 30 (100%) детей, нарушение микробиоты кишечника диагностировано у 22 (73%) пациентов.

Клинический анализ показал, что у детей обеих групп нарушение кишечного всасывания характеризовалось персистирующей диареей кислого характера. У детей первой группы в 86% случаев (26 детей) определялись срыгивания, у 20% пациентов (5 детей) отмечалась 1-2-кратная рвота, 92% младенцев (27 детей) беспокоили кишечные колики. В клиническом анализе крови у детей этой группы в 53% случаев (16 человек) регистрировали анемию легкой и средней степени тяжести. 86% детей (26 человек) второй группы также беспокоили срыгивания, 97% младенцев (29 детей) - кишечные колики и вздутие живота, в 26% случаев (8 детей) отмечались низкие прибавки в массе тела. Анемия легкой степени тяжести зафиксирована у 23% пациентов (7 детей). Копрологические исследования у пациентов обеих групп выявили смешанную стеаторею. Йодофильная флора, дисахара с разной степенью выраженности определялись в кале у всех больных. По данным ультразвукового исследования органов брюшной полости 19 детей (40%) первой группы имели признаки реактивного поражения поджелудочной железы в виде пониженной эхогенности паренхимы головки и хвоста органа. У детей второй группы при данном исследовании отклонений от нормы не выявлено.

При изучении сыворотки крови всех групп пациентов нами получены следующие результаты, представленные в таблице.

Эндогенные белки в сыворотке крови у детей

Показатели

I группа

II группа

Контрольная группа

I-FABP (пг/мл)

125,20±23,79 * Ҩ

61,03± 8,41 #

19,21±4,94

L-FABP (пг/мл)

595,42±74,15 * Ҩ

314,93±47,56 #

175,86±23,78

(BPI) (пг/мл)

101,67±19,13 * Ҩ

51,68±10,24

35,18±3,49

Эотаксин (пг/мл)

1908,15±237,09* Ҩ

753,16±80,74

611,93±90,14

где * - достоверность различий p<0,05 между первой группой и контрольной группой;

# - достоверность различий p<0,05 между второй группой и группой контроля;

Ҩ - достоверность различий p<0,05 между первой и второй группами.

Установлено, что содержание в крови белков, связывающих жирные кислоты, кишечной (I-FABP) и печеночной (L-FABP) форм, у пациентов первой и второй групп было достоверно выше, чем в контрольной группе (р<0,05). При этом концентрация интестинальной (I-FABP) формы протеина в крови у детей первой группы в 6,5 раз превышала уровень показателя, зарегистрированный в группе здоровых детей. У детей с вторичной лактазной недостаточностью (вторая группа) содержание I-FABP было выше показателей контрольной группы в 3,2 раза. В литературе имеются данные о том, что повышение I-FABP свидетельствует о наличии повреждения слизистой оболочки тонкого кишечника [7]. Данные, полученные в нашем исследовании, убедительно подтверждают вовлеченность в воспалительный процесс тонкого кишечника как при аллергической энтеропатии, так и при вторичной гиполактазии.

В нашем исследовании выявлено, что уровень печеночной формы протеина (L-FABP) в крови у детей с АБКМ в 3,4 раза, а у детей с интолерантностью к лактозе - в 1,9 раз превышали показатели группы здоровых детей. Известно, что печеночная форма белка - L-FABP экспрессируется большей частью в печени, из-за своих малых размеров молекулы L-FABP способны быстро выходить из поврежденных клеток печени, приводя к повышению уровня пептида в крови [7, 8]. Полученные нами результаты указывают на вовлечение гепатобилиарной системы в патологический процесс в большей степени при развитии интолерантности к белку коровьего молока у детей.

Содержание в крови бактерицидного белка, повышающего проницаемость клеток (BPI), было увеличено только у детей с аллергией, индуцированной белком коровьего молока, и было выше в 2,9 раза показателей контрольной группы, что подтверждает факт участия этого пептида в развитии аллергического воспаления в слизистой оболочке тонкой кишки.

Показатели эотаксина крови у детей с аллергической энтеропатией оказались в 3,1 раза выше, чем в контрольной группе, и в 2,5 раза выше показателей группы с вторичной лактазной недостаточностью, что свидетельствует об участии данного пептида в аллергическом процессе. При лактазной недостаточности эотаксин достоверно не отличается от его значений в контрольной группе. Следовательно, данный маркер целесообразно использовать как дифференциально-диагностический критерий аллергического воспаления тонкого кишечника.

В настоящее время для определения характера активности поражения желудочно-кишечного тракта особое место занимают лабораторные методы, оценивающие повреждение слизистой оболочки кишечника путем определения экскреции с калом биологически активных веществ, указывающих на активность воспалительного процесса, одним из которых является эозинофильный катионный протеин [6]. В нашем исследовании содержание эозинофильного катионного протеина у детей с непереносимостью белков молока составило 518,74±63,17 нг/мл, у здоровых детей - 192,50±21,15 нг/мл (р<0,001). При вторичной лактазной недостаточности этот показатель составил 176,93±22,59 нг/мл, что соответствует показателям контрольной группы. Таким образом, определение эозинофильного катионного протеина может быть использовано в сложных диагностических случаях у детей в качестве неинвазивного маркера аллергического воспаления слизистой оболочки кишечника.

Заключение

Проведенное исследование показало, что у детей с аллергической энтеропатией, индуцированной белками коровьего молока, в копрофильтратах повышено содержание эозинофильного катионного протеина, а в сыворотке крови отмечено значительное повышение эотаксина и белка, повышающего проницаемость клеточных мембран. Установленная нами закономерность, свидетельствующая о гиперпродукции этих эндогенных пептидов только у пациентов с аллергической природой мальабсорбции, может быть использована в клинической практике при дифференциальной диагностике в сложных случаях. Определение биомаркеров в сыворотке крови и копрофильтратах позволяет выявить характер и глубину поражения гастроинтестинальной зоны у детей, способствует определению правильной тактики лечения. Полученные нами результаты расширяют представления о патогенезе нарушенного кишечного всасывания, позволяют улучшить диагностику заболевания, в том числе неинвазивную, и могут быть рекомендованы для использования в клинической практике.

Рецензенты:

Шапкина Л. А., д.м.н., профессор кафедры факультетской терапии ГБОУ ВПО ТГМУ Минздрава России, главный внештатный детский эндокринолог Приморского края, г. Владивосток;

Лучанинова В. Н., д.м.н., профессор, руководитель научного отдела ГБОУ ВПО ТГМУ Минздрава России, г. Владивосток.


Библиографическая ссылка

Шуматова Т.А., Зернова Е.С., Катенкова Э.Ю., Шишацкая С.Н. ЭНДОГЕННЫЕ ПЕПТИДЫ В ДИАГНОСТИКЕ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ ЭНТЕРОПАТИИ У ДЕТЕЙ // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 5. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=22297 (дата обращения: 27.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074