На территории Центральной России основными возделываемыми культурами являются представители семейств Cucurbitaceae и Solanaceae. Изучение микрофлоры прикорневой зоны растений данных семейств показало, что доминирующими видами являются представители родов Bacillus и Psеudomonas [1, 2, 3]. Однако их влияние на рост и развитие представителей этих семейств остаются неизученными.
Целью данного исследования явилось изучение ростостимулирующего влияния ризосферных бактерий Pseudomonas pseudoalcaligenes и Bacillus subtilis на семена Solanum lycopersicum Mill. и Cucurbita pepo L.
Материалы и методы исследования
Объектом исследования являлись штаммы бактерий Pseudomonas pseudoalcaligenes и Bacillus subtilis, выделенные из ризосферы сельскохозяйственных растений, а также референтные штаммы: P. pseudoalcaligenes MV-11, полученный из Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ФГУП ГосНИИГенетика, и B. subtilis ATCC 6633, полученный из государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «ГИСК им. Л.А. Тарасевича». Штаммы микроорганизмов, выделенные из ризосферы растений, культивировали на плотных питательных средах в течение суток при температуре 370С. Для B. subtilis использовали МПА (Россия), картофельно-глюкозный агар (Lab-Biomed, Россия), для P. pseudoalcaligenes - ГРМ-агар (ЗАО «НПО БИОКОНТ», Россия). Видовую идентификацию изолятов производили на основе изучения морфологических, тинкториальных и культурально-биохимических свойств с помощью программного обеспечения для автоматизированной идентификации бактерий производства ООО НПО «Диагностические системы».
Определение ростостимулирующей активности исследуемых штаммов производили в биотесте с семенами томата и тыквы. Семена растений предварительно подвергали стерилизации в 0,05%-ном растворе перманганата калия, после чего их помещали в стерильные чашки Петри и заливали стерильной дистиллированной водой для набухания. Через 24 ч семена помещали между слоями фильтровальной бумаги и инокулировали суспензией четырехсуточной культуры бактерий, полученной в МПБ и разведенной до титра 107 КОЕ/мл.
В качестве контроля служили семена растений, обработанные стерильным МПБ. Чашки Петри выдерживали при оптимальной для роста семян температуре 220С в течение 7 суток. Энергию прорастания и всхожести семян определяли посредством подсчета количества проросших семян в опытных образцах и контроле (ГОСТ 12038-84, 1984). Оценку ростостимулирующего действия изучаемых штаммов производили путем измерения длины и массы корней и зеленых проростков семян, обработанных бактериальной суспензией, и соответствующих показателей в контроле. При определении морфометрических параметров массу и длину корня и проростка в контрольной группе принимали за 100%.
Результаты и обсуждение
Результаты лабораторно-вегетационного опыта показали, что инокуляция семян Solanum lycopersicon Mill. и Cucurbita pepo L. штаммами P. pseudoalcaligenes и B. subtilis не оказывала влияния на их всхожесть. Отмечена сходная динамика в прорастании семян томата и тыквы как в контрольных, так и в опытных образцах (табл. 1).
Таблица 1
Результаты всхожести семян томата и тыквы после инокуляции штаммами P. pseudoalcaligenes и B. subtilis
Инокуляты |
Всхожесть семян томата, % |
Всхожесть семян тыквы, % |
P. pseudoalcaligenes MV-11 |
100 |
99 |
P. pseudoalcaligenes |
98 |
97 |
Контроль |
95 |
96 |
B. subtilis АТСС 6633 |
99 |
100 |
B. subtilis |
96 |
99 |
Контроль |
99 |
100 |
В ходе исследования установлено, что инокуляция семян тыквы B. subtilis вызывала стимуляцию формирования проростков. При обработке семян референтными штаммами происходило увеличение длины проростков в 1,6 раз, а массы - в 1,4 раз по сравнению с контролем. Проращивание семян тыквы в присутствии B. subtilis, выделенных из ризосферы C. pepo, вызывало увеличение длины проростков в 1,7 раз, а массы - в 1,3 раза по сравнению с контрольным образцом (табл. 2).
Инокуляция семян тыквы референтными штаммами P. pseudoalcaligenes оказывала ростостимулирующее действие. Происходило увеличение морфометрических параметров проростков семян: длина - в 1,6 раз, масса в 1,4 раза. Штаммы P. pseudoalcaligenes, выделенные из ризосферы растений, индуцировали увеличение длины и массы проростков в 1,7 раз и 1,3 раз соответственно.
Таблица 2
Морфометрические параметры проростков тыквы после воздействия P. pseudoalcaligenes и B. subtilis
Исследуемые варианты |
Длина проростка |
Масса проростка
|
||
см |
в % к контролю |
г |
в % к контролю |
|
P. pseudoalcaligenes MV-11 |
3,4±0,25* |
158,14 |
3,1±0,32* |
135,37 |
P. pseudoalcaligenes |
3,6±0,41* |
167,44 |
2,9±0,2* |
126,64 |
B. subtilis АТСС 6633 |
3,35±0,45* |
155,81 |
3,28±0,33* |
143,23 |
B. subtilis |
3,65±0,3* |
169,77 |
2,9±0,1* |
126,64 |
Контроль |
2,15±0,48 |
100 |
2,29±0,39 |
100 |
*- различия между показателями и контрольным образцом достоверны при р<0,05
Проявление ростостимулирующей активности исследуемых штаммов P. pseudoalcaligenes и B. subtilis также было отмечено на семенах томата (табл. 3).
Таблица 3
Результаты воздействия P. pseudoalcaligenes и B. subtilis на ростовые параметры семян томата
Исследуемые варианты |
Длина проростка |
Масса корня |
||
см |
в % к контролю |
г |
в % к контролю |
|
P. pseudoalcaligenes MV-11 |
2,8±0,15* |
133,33 |
1,9±0,1* |
135,71 |
P. pseudoalcaligenes |
2,9±0,3* |
138,10 |
2,0±0,2* |
142,86 |
B. subtilis АТСС 6633 |
3,0±0,25* |
142,86 |
2,1±0,1* |
150,00 |
B. subtilis |
2,75±0,15* |
130,95 |
2,0±0,15* |
142,86 |
Контроль |
2,1±0,38 |
100 |
1,4±0,32 |
100 |
*- различия между показателями и контрольным образцом достоверны при р<0,05
Анализ полученных данных показал, что при обработке семян S. lycopersicum референтными штаммами P. pseudoalcaligenes происходило увеличение длины и массы проростков в 1,3 и 1,4 раз соответственно. Инокуляция ризосферными штамма исследуемого микроорганизма приводила к достоверному повышению морфометрических показателей: длины проростков в 1,4 раза и 1,4 раза соответственно.
Аналогичные изменения ростовых показателей семян томатов наблюдались при их обработке референтными штаммами B. subtilis: длина проростка увеличивалась в 1,4 раза, масса - в 1,5 раза по сравнению с контролем. Обработка семян ризосферными штаммами данного вида показали увеличение длины проростка в 1,3 раз, массы в 1,4 раз.
Выводы
1. Референтные и ризосферные штаммы P. pseudoalcaligenes и B. subtilis не оказывают влияния на всхожесть семян S. lycopersicum Mill. и C. pepo L.
2. Инокуляция семян тыквы и томата референтными и ризосферными штаммами P. pseudoalcaligenes и B. subtilis вызывает выраженный ростостимулирующий эффект на Solanum lycopersicon Mill. и Cucurbita pepo L., что проявляется достоверным увеличением длины и массы их проростков.
Рецензенты:
Золотухин В.В., д.б.н., профессор кафедры зоологии ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет им. И.Н. Ульянова», г. Ульяновск;
Артемьева Е.А., д.б.н., профессор кафедры зоологии ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет им. И.Н. Ульянова», г. Ульяновск.
Библиографическая ссылка
Артамонова М.Н., Алексеева А.С., Потатуркина-Нестерова Н.И. РОСТОСТИМУЛИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ АССОЦИАТИВНЫХ РИЗОБАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS PSEUDOALCALIGENES И BACILLUS SUBTILIS // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 5. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=21649 (дата обращения: 21.11.2024).