Целью исследования являлось изучение ранозаживляющих свойств космецевтических пленок с алоэ и актовегином в эксперименте[3,4].
Материалы и методы исследования
Определение ранозаживляющих свойств космецевтических плёнок проводилось на модели «линейной» раны у крыс-самцов линии Wystar массой от 250 до 300 г[1].Животные содержались в виварии ПМФИ на стандартном рационе питания. Все этапы работы с животными проводились в соответствии с руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ[5].
Для оценки процесса заживления и эффективности проводимого лечения систематически наблюдали за состоянием раны: измеряли размеры раны, отмечали состояние кожных покровов вокруг раны.
Животные подразделялись на 6 групп по 8 крыс: первая группа – негативный контроль, вторая группа – основа плёнки, третья группа – плёнка с экстрактом алоэ, четвертая группа – плёнка с актовегином, пятая группа – препарат сравнения (стандарт) гель Актовегин 20%, шестая группа – исследуемая плёнка с алоэ и актовегином.
В качестве наркозного вещества использовали хлоралгидрат (300 мг/кг). После наступления наркозного сна приступали к хирургическому вмешательству. На поверхности бедра крыс удаляли шерсть посредством депиляции. Площадь депилируемой поверхности составляла около 3 см2.
Для получения раны складку кожи захватывали хирургическим пинцетом и удаляли лоскут кожи ножницами, соблюдая правила асептики. Раны крысам наносились примерно одного диаметра. Площадь собственно раневой поверхности составляла около 2,6 см2[1].
Местную консервативную терапию ран проводили открытым способом (без повязки) путем нанесения исследуемых объектов на раневую поверхность один раз в день до полного заживления. Измерение ран проводили ежедневно в течение первых пяти дней, далее – через день.
Степень заживления ран у животных оценивали весовым методом по площади раны.
Лечение исследуемыми объектами начинали на следующий день после проведения операции. Среднюю массу «площади ран» определяли на аналитических весах следующим образом: в дни измерения наносили контуры ран на целлофан, а затем переносили на плотный ватман, после чего макеты подвергали взвешиванию.Характер воспалительного процесса в каждой группе животных оценивали визуально.Результаты эксперимента обработаны статистически в программе MicrosoftOfficeExel.
По результатам проведенных исследований рассчитали процент сокращения срока заживления ран по следующей формуле:
где t – время заживления ран в контрольной группе в днях;
t1 – время заживления леченых ран в днях при применении исследуемой космецевтической плёнки с алоэ и актовегином.
Результаты и их обсуждение
Полученные в ходе эксперимента результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1
Изучение ранозаживляющей активности космецевтической пленки с алоэ и актовегином
ДНИ |
ГРУППА |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|
1 |
2,45±0,86 |
2,79±0,42 |
4,09±0,16 |
3,60±4,78 |
3,95±0,39 |
2,94 ±0,30 |
2 |
2,23±0,35 |
1,56±0,24 |
2,49±0,14 |
2,86±0,45 |
2,62±0,36 |
1,91±0,13 |
3 |
1,86±0,34 |
1,04±0,28 |
1,91±0,19 |
1,82±0,55 |
2,29±0,72 |
1,57±0,19 |
4 |
1,64±0,36 |
0,85±0,12 |
1,68±0,19 |
1,85±0,29 |
2,07±0,59 |
1,03±0,05 |
5 |
1,19±0,18 |
0,75±0,15 |
1,17±0,14 |
1,64±0,37 |
1,68±0,47 |
0,68±0,09* |
7 |
0,78±0,21 |
0,36±0,09 |
0,80±0,14 |
0,88±0,07 |
1,12±0,20 |
0,58±0,11# |
9 |
0,62±0,20 |
0,23±0,07 |
0,60±0,15 |
0,64±0,11 |
0,94±0,16 |
0,28±0,03# |
11 |
0,53±0,13 |
0,17±0,07* |
0,48±0,16 |
0,37±0,03 |
0,78±0,24 |
0,20±0,02*# |
13 |
0,41±0,54 |
0,07±0,02 |
0,34±0,14 |
0,29±0,03 |
0,60±0,21 |
0,14±0,01 |
15 |
0,39±0,15 |
0,04±0,00* |
0,18±0,04 |
0,15±0,02 |
0,25±0,07 |
0,04±0,005*# |
17 |
0,34±0,15 |
0,03±0,006 |
0,11±0,03 |
0,04±0,01 |
0,25±0,07 |
0±0 |
19 |
0,28±0,06 |
0±0 |
0,07±0,03* |
0±0 |
0,14±0,04 |
|
21 |
0,24±0,04 |
0±0 |
0,06±0,02 |
|||
23 |
0,12±0,02 |
0±0 |
||||
25 |
0,06±0,02 |
|||||
26 |
0±0 |
Примечание: # – изменения статистически достоверны по отношению к группе препарата гель Актовегин 20% (стандарт), p£0,05;
* – изменения статистически достоверны по отношению к негативному контролю, p£0,05.
Группа 1 –негативный контроль. Группа 4 – плёнка с актовегином.
Группа 2 – основа плёнки. Группа 5 – гель Актовегин 20% (стандарт).
Группа 3 – плёнка с алоэ. Группа 6 – пленка с алоэ и актовегином.
В группе животных негативного контроля в области ран была отмечена гиперемия в первые сутки после проведения операции. На 5 день дефекты кожи крыс были заполнены зрелой грануляционной тканью, степень зрелости которой повышалась от поверхности раны ко дну. Грануляционная ткань, образовавшаяся после проведения хирургического вмешательства, имела темно-красный цвет. На 7-й день после начала опыта у животных без фармакологического вмешательства образовался струп. При этом корка была жесткая, грубая, темно-красного цвета. Струпы отпадали на 13-й день, при этом отмечалось не полное очищение раневой поверхности, однако дно раны было сухим и ровным. Процесс регенерации проходил от краев раны к центру. Стадия полной реорганизации рубца у большинства крыс этой группы наступала на 21–22-й день от начала эксперимента.
У половины крыс из группы, которым в качестве коррекции наносили основу пленки, в первые несколько дней после проведения операционного вмешательства отмечалась гиперемия краевран. При формировании грануляционной ткани в ране были видны формирующиеся сосудистые петли, направленные перпендикулярно к раневой поверхности, их зрелость повышалось от краёв раны к центру. Грануляционная ткань имела красный цвет. Струпы в этой группе животных появлялись на 6 день после операции и отпадали на 8-й день. Края ран более мягкие, корка менее грубая, чем у группы крыс негативного контроля, при этом ложе ран было чистое, сухое, ровное, полностью очищенное от некротической массы. Процесс регенерации кожи проходил от краев к центру раны. Полная реорганизация рубца произошла на 16-е сутки.
У группы животных, которым в качестве коррекции наносили пленку с алоэ, в первые дни после проведения операции гиперемии вокруг ран не наблюдалось. На 5 сутки дефекты кожи заполнены зрелой грануляционной тканью, степень зрелости которой повышалась от поверхности раны ко дну. Образовавшаяся грануляционная ткань имела красный цвет. На 6-й день после проведения операции у животных данной группы образовывался струп. Корка имела серовато-красный цвет, структура тонкая, края загнуты наверх. На 13-й день струпы отпадали. Донышко ран было чистое, сухое, ровное.Процесс регенерации проходил от краев к центру раны. Полная реорганизация рубца в этой группе животных наблюдалась на 19-й день.
В группе животных, которым в качестве лечения наносили пленку с актовегином, гиперемия на первые сутки после проведения операции наблюдалась в единичном случае. В дальнейшем в процессе лечения созревающая грануляционная ткань заполняла раневой дефект крыс. В грануляционной ткани видны формирующиеся сосудистые петли, направленные перпендикулярно к раневой поверхности, их зрелость повышается от поверхности раны ко дну. Грануляционная ткань красного цвета. На 5-й день образовался струп. Края корки загибались вверх, структура плотная, цвет темно-красный. На 9-й день струпы отпадали, необходимо отметить, что ложе ран было чистым, сухим, ровным.Процесс регенерации проходил от краев к центру раны. Полная реорганизация рубца у животных данной группы произошла на 17-й день.
Гиперемии краев ран в группе животных, которым в качестве коррекции наносили гель Актовегин 20 % (стандарт), отмечено не было. На 5-ый день раневые дефекты крыс были заполнены зрелой грануляционной тканью. Ближе к поверхности раны степень зрелости грануляционной ткани уменьшалась, сосуды были мелкие (капиллярного типа). Их количество увеличивалось по сравнению с 4-ым днём. Грануляционная ткань имела красный цвет. У животных в группе препарата сравнения геля Актовегин 20 % (стандарт) струп появлялся уже на 6-й день после начала эксперимента. Образовавшаяся корка имела грубую структуру с загнутыми краями, выходящими за края раны. На 10-й день струпы отпадали, открывая чистое, сухое, ровное донышко ран.Процесс регенерации проходил от краев к центру раны. Полное заживление у данной группы животных наступало на 21-й день после начала эксперимента.
У группы крыс, которым в качестве лечения наносили пленку с алоэ и актовегином, гиперемия вокруг ран в первые несколько дней после проведения операционного вмешательства не наблюдалась. Уже с первых суток лечения наблюдали эффективное очищение ран у животных, что свидетельствовало об увеличении функциональной активности фагоцитов. На 5-ый день дефекты кожи крыс были заполнены зрелой грануляционной тканью. Также нами было отмечено уменьшение признаков воспаления, редуцированное новообразование капилляров, т.к. по мере созревания потребность грануляционной ткани в активном поступлении питательных веществ уменьшалась[2]. Грануляционная ткань имела розовый цвет. На 6-й день образовался струп. Корка имела тонкую структуру с загнутыми кверху краями, равными краям ран. На 9-й день корки отпадали. Стоит отметить, что донышко ран было чистое, ровное, сухое.
Процесс регенерации проходил от краев к центру раны. Полная реорганизация рубца произошла на 15-й день. Образовывались сплошные эпителиальные пласты, закрывающие рану по краям на фоне гранулирующих тканей.
В ходе эксперимента во всех экспериментальных группах животных не отмечали рецидива воспаления. Негативных местных и общих реакций при нанесении космецевтических ранозаживляющих плёнок не отмечали, что подтверждает безопасность при их применении.
Процент сокращения срока заживления ран при применении космецевтической плёнки с алоэ и актовегином в сравнении с группой негативного контроля составил 37,5%. При сравнении результатов экспериментальной группы с группой препарата – аналога (стандарта) гелем Актовегин 20% процент ускорения заживления составил 28,6.
Заключение
Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение исследуемых космецевтических ранозаживляющих плёнок с алоэ и актовегином способствует быстрому и полному отторжению некротических тканей из раны и значительно сокращает сроки заживления ран. Наличие регенерирующего действия определяет целесообразность дальнейшего изучения космецевтической ранозаживляющей плёнки с алоэ и актовегином для создания космецевтического средства, стимулирующего регенерацию тканей.
Рецензенты:
Погорелый В.Е., д.б.н., профессор кафедры фармакологии с курсом клинической фармакологии ПМФИ-филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ МЗ РФ, г.Волгоград.
Кодониди И.П., д.фарм.н., доцент кафедры органической химии ПМФИ-филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ МЗ РФ, г.Волгоград.
Библиографическая ссылка
Кищенко В.М., Степанова Э.Ф., Воронков А.В., Кулешова С.А. ИЗУЧЕНИЕ РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ДЕРМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПЛЕНОК С АЛОЭ И АКТОВЕГИНОМ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ // Современные проблемы науки и образования. 2015. № 3. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=20244 (дата обращения: 02.04.2025).