Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Сагдатова А.А. 1 Нургалиева А.Х. 2 Загидуллин Ш.З. 1 Хуснутдинова Э.К. 2, 3

---

1 ГБОУ ВПО «Башкирский Государственный Медицинский Университет Минздрава РФ»

2 ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный университет»

3 ФГБУН «Институт Биохимии и Генетики, Уфимский Научный Центр РАН»

В статье представлены результаты анализа связи полиморфного варианта гена ABCG5 (rs4131229) с нарушениями биохимических показателей у больных с желчнокаменной болезнью и практически здоровых лиц. 180 пациента с диагнозом желчнокаменная болезнь были разделены на 2 группы: 1-я группа — больные с хроническим калькулезным холециститом (105 пациентов), 2-я группа – больные с острым калькулезным холециститом (75 пациентов). Проведено исследование ассоциации полиморфных локусов rs4131229 гена ABCG5 с биохимическими показателями сыворотки крови больных холелитиазом. Выявлено, что хронический калькулезный холецистит у носителей генотипа ТС гена ABCG5 протекает с высоким уровнем АСТ, а острый калькулезный холецистит у индивидов с полиморфным вариантом гена ABCG характеризуется высокими показателями общего холестерина, общего билирубина, АЛТ и АСТ сыворотки крови.

Статья в формате PDF

121 KB

общий билирубин

общий холестерин

АСТ

АЛТ

полиморфизм гена ABCG5

хронический калькулезный холецистит

1. Berge K. E. Accumulation of dietary cholesterol in sitosterolemia caused by mutations in adjacent ABC transporters./ Berge K.E., Tian H., Graf G.A. [et al] // Science. — 2000. – Vol. 290. – P. 1771–1775.

2. Klett E.L. Localization of ABCG5 and ABCG8 proteins in human liver, gallbladder and intestine / Klett E.L., Lee M.H., Adams D.B. [et al.] // BMC Gastroenterol. — 2004; 4:21.

3. Li Q. ATP-Binding Cassette Transporter G5 and G8 Polymorphisms and Several Environmental Factors with Serum Lipid Levels / Li Q., Yin R.-X., Wei X.-L. [et al.] // Plos one. – 2012. – Vol. 7, Issue 5. – P. 372–379.

4. Lu K. Two genes that map to the STSL locus cause sitosterolemia: genomic structure and spectrum of mutations involving sterolin-1 and sterolic2, encoded by ABCG5 and ABCG8, respectively / Lu K., Lee M.H., Hazard S. [et al.] // Am. J. Hum. Genet. – 2001, 69. – P. 278–290

5. Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA // Methods molecular biology. N.Y. — 1984. — Vol. 2. — P. 31–34.

6. Stinton L.M. Epidemiology of Gallbladder Disease: Cholelithiasis and Cancer / Stinton L.M., Shaffer E.A. // Gut and Liver. – 2012. — Vol. 6, No. 2. — P. 172–187.

7. Tauscher A. ABCG5 and ABCG8 are expressed in gallbladder epithelial cells / Tauscher A., Kuver R. // Biochem. Biophys. Res. Commun. – 2003, 307. — P. 1021–1029.

8. Yoo E.-H. The prevalence and risk factors for gallstone disease / Yoo E.-H., Lee S.-Y. // Clin. Chem. Lab. Med. — 2009. — Vol. 47, № 7. — P. 795–807.

Цель исследования

Изучение ассоциации полиморфного варианта АТФ-связанного кассетного (АВС) трансмембранного белка - транспортера холестерина ABCG5 (rs4131229) - с биохимическими показателями у больных с желчнокаменной болезнью.

Материалы и методы

Материалом для исследования послужили образцы ДНК больных желчнокаменной болезнью в стадии обострения и здоровых доноров в возрасте от 23 до 80 лет, проживающих в г. Уфа. Группа больных, наблюдавшихся в гастроэнтерологическом и хирургическом отделениях ГБУЗ РБ ГКБ № 21 г. Уфа Республики Башкортостан, составила 180 индивидов, из которых 105 имели диагноз «хронический калькулезный холецистит» - ХКХ (1-я группа), 75 - «острый калькулезный холецистит» - ОКХ (2-я группа)), у которых проведен анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного варианта АТФ-связанного кассетного (АВС) трансмембранного белка - транспортера холестерина ABCG5 (rs4131229). Диагностику ЖКБ проводили на основании данных общеклинического обследования, ультразвуко­вого исследования желчного пузыря. В качестве контроля исследована группа здоровых лиц без каких-либо признаков заболеваний желудочно-кишечного тракта, а также сердечно-сосудистой патологии, обусловленной атеросклерозом, состоящая из 167 человек. Распределение по половому признаку среди больных было следующим: мужчин - 35, женщин - 145, среди индивидов контрольной группы: мужчин - 33, женщин - 134.

Геномную ДНК выделяли из лимфоцитов периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции [5]. Амплификацию исследованных локусов ДНК проводили с помощью полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторе «GeneAmp PCR System 2720» производства компании «Applied Biosystems» (США). Определение нуклеотидных замен проводили методом анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ-анализ). Перечень исследованных локусов, последовательности праймеров, размеры амплифицируемых фрагментов, названия рестриктаз представлены в таблице 1.

Таблица 1

Полиморфные варианты, последовательность праймеров, номенклатура аллелей анализируемого ДНК-локуса

Результаты оценивали методом электрофореза в 7%-ном полиакриламидном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием и визуализацией в проходящем ультрафиолетовом свете. Статистическую обработку результатов исследования проводили c применением программного обеспечения MS Office Excel. Оценка различий между двумя исследуемыми выборками проводилась по критерию Стьюдента и U-критерию Манна-Уитни. Все пациенты предварительно дали письменное согласие на участие в проводимом исследовании.

Результаты и обсуждение

У больных ЖКБ и лиц контрольной группы проведено изучение связи полиморфного варианта АТФ-связанного кассетного (АВС) трансмембранного белка - транспортера холестерина ABCG5 (rs4131229) с биохимическими показателями у больных желчнокаменной болезнью и здоровых доноров.

Результаты анализа ассоциации исследуемого полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 с биохимическими показателями крови (М ± m) больных ЖКБ по сравнению с контрольной группой представлены в таблице 2.

Таблица 2

Результаты анализа связи исследуемого полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 с биохимическими показателями крови (М ± m) больных ЖКБ по сравнению с контрольной группой

Примечание: n - численности групп; N - объем выборки, * - по сравнению с контролем р <0,05.

При сравнении групп больных и контроля обнаружено, что носители генотипа ТС полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 с ХКХ имели статистически значимый высокий уровень фермента аспартатаминотрансферазы (АСТ), у пациентов с гомозиготным генотипом ТТ гена ABCG5 заболевание протекало с нормальным уровнем аланинаминотрансферазы (АЛТ). Уровень общего билирубина статистически значимо не был отклонен от референтных значений у носителей всех генотипов полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 с хроническим калькулезным холециститом по сравнению с контролем.

Выявлено, что носители генотипа ТС полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 с острым калькулезным холециститом имели статистически значимый высокий уровень общего билирубина по сравнению с контролем. У пациентов с ОКХ и гомозиготным СС генотипом наблюдался достоверно выше референтных значений показатель общего холестерина и АЛТ в сыворотке крови. У индивидов с генотипом ТТ определялся статистически значимый цитолитический синдром: уровни АЛТ и АСТ были повышены в несколько раз.

Путь транспорта холестерина включает захват холестерина липопротеина высокой плотности (ХС ЛПВП) печенью и его выведение с желчью. Мембранные белки- транспортеры ABCG5 и ABCG8, находящиеся в печени, кишечнике [4,2] и эпителиальных клетках желчного пузыря [7], регулируют транспорт липидов на различных уровнях, препятствуют избыточному захвату холестерина в энтероцитах, участвуют в катаболизме холестерина и способствуют его транспорту в желчь. Генетически обусловленный дефицит этих транспортеров является причиной ситостеролемии, т.е. низкой скорости выведения стеролов с желчью и накопления в крови и тканях холестерина и растительных стеролов [1].

Li Q. et al. (2012), проводя исследования в популяции китайцев, показали, что мужчины, носители аллеля rs4131229*T гена ABCG5, характеризуются снижением концентрации общего холестерина, холестерина ЛПВП, триглицеридов и отношения ApoA1/ApoB [3].

Выводы

1. Хронический калькулезный холецистит у носителей генотипа ТС полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 протекал с высоким уровнем АСТ и не превышающим норму общим билирубином, а у больных с гомозиготным генотипом ТТ гена ABCG5 ХКХ характеризовался нормальными значениями АЛТ и общим билирубином. У носителей гомозиготного генотипа СС гена ABCG5 ХКХ также протекал с нормальными показателями общего билирубина.
2. У индивидов с гетерозиготным генотипом ТС полиморфного варианта rs4131229 гена ABCG5 острый калькулезный холецистит, в отличие от ХКХ, протекал с повышенным уровнем общего билирубина. При гомозиготном СС варианте больные с ОКХ, в отличие от пациентов с ХКХ, имели повышенные показатели общего холестерина и АЛТ. У носителей ТТ генотипа гена ABCG5 с ОКХ, как и в 1-й группе, зарегистрирован высокий уровень АЛТ и АСТ в сыворотке крови.

Рецензенты:

Зулкарнеев Р.Х., д.м.н., профессор кафедры пропедевтики внутренних болезней ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Уфа;

Загидуллин Н.Ш., д.м.н., профессор кафедры пропедевтики внутренних болезней ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Уфа.

Библиографическая ссылка